| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 主要缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-18页 |
| 1.1 研究背景 | 第14-17页 |
| 1.1.1 胰腺癌 | 第14页 |
| 1.1.2 Furin | 第14-15页 |
| 1.1.3 上皮间质转化 | 第15-16页 |
| 1.1.4 Hippo-YAP信号传导通路 | 第16-17页 |
| 1.2 本研究的目的、内容、方法与技术路线 | 第17-18页 |
| 1.2.1 研究目的 | 第17页 |
| 1.2.2 研究内容 | 第17页 |
| 1.2.3 研究技术路线图 | 第17-18页 |
| 第二章 sh-Furin干扰质粒和Flag-Furin过表达质粒的构建及表达效果的鉴定 | 第18-36页 |
| 2.1 实验仪器和材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第18页 |
| 2.1.2 实验耗材 | 第18-19页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第19-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-30页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第21-22页 |
| 2.2.2 sh-GFP及sh-Furin质粒构建 | 第22-25页 |
| 2.2.3 包装病毒 | 第25-26页 |
| 2.2.4 感染细胞 | 第26页 |
| 2.2.5 过表达质粒Flag-Furin的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.6 质粒转染 | 第27页 |
| 2.2.7 总RNA提取 | 第27-28页 |
| 2.2.8 Real-time PCR检测方法 | 第28-29页 |
| 2.2.9 Western Blot检测方法 | 第29-30页 |
| 2.3 数据处理与统计方法 | 第30页 |
| 2.4 结果 | 第30-34页 |
| 2.4.1 检测四种不同胰腺癌细胞系中Furin的表达 | 第30-31页 |
| 2.4.2 菌液PCR鉴定sh-Furin质粒 | 第31页 |
| 2.4.3 sh-Furin质粒测序结果 | 第31-32页 |
| 2.4.4 检测sh- Furin干扰效率 | 第32-33页 |
| 2.4.5 Furin基因CDs区的基因扩增 | 第33页 |
| 2.4.6 载体p3xFLAG-Myc-CMV-24（Vector）的双酶切产物凝胶电泳 | 第33-34页 |
| 2.4.7 连接产物送测序 | 第34页 |
| 2.4.8 检测Flag-Furin过表达效率 | 第34页 |
| 2.5 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 Furin对胰腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力的影响 | 第36-46页 |
| 3.1 实验仪器和材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第36页 |
| 3.1.2 实验耗材 | 第36页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.4 试剂配制 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-39页 |
| 3.2.1 CCK-8 实验 | 第37页 |
| 3.2.2 克隆形成实验 | 第37页 |
| 3.2.3 划痕实验 | 第37-38页 |
| 3.2.4 Transwell migration实验 | 第38页 |
| 3.2.5 Transwell invasion实验 | 第38页 |
| 3.2.6 细胞培养、Western Blot | 第38-39页 |
| 3.3 数据处理与统计方法 | 第39页 |
| 3.4 结果 | 第39-44页 |
| 3.4.1 CCK-8 法检测Furin对胰腺癌细胞增殖能力的影响 | 第39-40页 |
| 3.4.2 克隆形成实验检测Furin对胰腺癌生长的影响 | 第40-41页 |
| 3.4.3 Transwell migration 实验检测 Furin 对胰腺癌细胞迁移能力的影响 | 第41-42页 |
| 3.4.4 划痕实验检测 Furin 对胰腺癌细胞迁移能力的影响 | 第42-43页 |
| 3.4.5 Transwell invasion实验检测Furin对胰腺癌细胞侵袭能力的影响 | 第43页 |
| 3.4.6 Western Blot技术检测Furin对基质金属蛋白酶表达的影响 | 第43-44页 |
| 3.5 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 Furin对胰腺癌细胞上皮间质转化的影响及其分子机制 | 第46-50页 |
| 4.1 实验仪器和材料 | 第46-47页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第46页 |
| 4.1.2 实验耗材 | 第46页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第46页 |
| 4.1.4 试剂配制 | 第46-47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47页 |
| 4.2.1 质粒转染、细胞培养、Western Blot | 第47页 |
| 4.3 数据处理与统计方法 | 第47页 |
| 4.4 结果 | 第47-48页 |
| 4.4.1 Western Blot检测Furin对上皮间质转化相关蛋白的影响 | 第47-48页 |
| 4.4.2 Western Blot检测Furin对Hippo-YAP相关蛋白的影响 | 第48页 |
| 4.5 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 Furin抑制剂D6R对胰腺癌细胞生长和上皮间质转化的影响及其分子机制 | 第50-56页 |
| 5.1 实验仪器和材料 | 第50页 |
| 5.1.1 实验仪器 | 第50页 |
| 5.1.2 实验耗材 | 第50页 |
| 5.1.3 实验试剂 | 第50页 |
| 5.1.4 试剂配制 | 第50页 |
| 5.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 5.2.1 D6R处理细胞 | 第50-51页 |
| 5.2.2 CCK-8 实验 | 第51页 |
| 5.2.3 克隆形成实验 | 第51页 |
| 5.2.4 划痕实验 | 第51页 |
| 5.2.5 Transwell invasion实验 | 第51页 |
| 5.2.6 Western Blot | 第51页 |
| 5.3 数据处理与统计方法 | 第51-52页 |
| 5.4 结果 | 第52-54页 |
| 5.4.1 Furin抑制剂D6R对胰腺癌细胞生长的影响 | 第52页 |
| 5.4.2 Furin 抑制剂 D6R 对胰腺癌细胞克隆形成、侵袭和迁移能力的影响 | 第52-53页 |
| 5.4.3 Furin 抑制剂 D6R 对胰腺癌细胞上皮间质转化和 Hippo-YAP 通路的影响 | 第53-54页 |
| 5.5 讨论 | 第54-56页 |
| 结论与展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 综述 | 第65-72页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 攻读硕士期间发表论文及其他科研成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
