| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 南方鲇的生物学特性 | 第12-13页 |
| 2 南方鲇常见疾病 | 第13-15页 |
| 2.1 细菌性疾病 | 第13-14页 |
| 2.2 真菌性疾病 | 第14页 |
| 2.3 寄生虫疾病 | 第14页 |
| 2.4 其它因素引起的疾病 | 第14-15页 |
| 3 迟缓爱德华氏菌的研究进展 | 第15-18页 |
| 3.1 迟缓爱德华氏菌的分类地位 | 第15页 |
| 3.2 迟缓爱德华氏菌的生物学特性 | 第15-16页 |
| 3.2.1 培养特性 | 第15-16页 |
| 3.2.2 生化特性 | 第16页 |
| 3.2.3 血清型 | 第16页 |
| 3.3 迟缓爱德华氏菌的流行病学 | 第16-17页 |
| 3.3.1 感染范围 | 第16-17页 |
| 3.3.2 感染症状 | 第17页 |
| 3.4 迟缓爱德华氏菌检测技术的研究进展 | 第17-18页 |
| 3.5 迟缓爱德华氏菌病的防治 | 第18页 |
| 4 鮰爱德华氏菌的研究进展 | 第18-22页 |
| 4.1 鮰爱德华氏菌的分类地位 | 第18-19页 |
| 4.2 鮰爱德华氏菌生物学特性 | 第19-20页 |
| 4.2.1 培养特性 | 第19页 |
| 4.2.2 生化特性 | 第19页 |
| 4.2.3 血清型 | 第19-20页 |
| 4.3 鮰爱德华氏菌的流行病学 | 第20-21页 |
| 4.3.1 感染范围 | 第20页 |
| 4.3.2 感染症状 | 第20-21页 |
| 4.4 鮰爱德华氏菌检测技术的研究进展 | 第21页 |
| 4.5 鮰爱德华氏菌病的防治 | 第21-22页 |
| 5 双重PCR技术概述 | 第22-23页 |
| 6 研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 第二章 南方鲇爱德华氏菌的分离鉴定 | 第24-38页 |
| 1 材料 | 第24页 |
| 1.1 实验动物 | 第24页 |
| 1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 1.3 主要仪器 | 第24页 |
| 2 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.1 病鱼的采集 | 第24-25页 |
| 2.2 病原菌的分离与纯化 | 第25页 |
| 2.3 人工感染试验 | 第25页 |
| 2.4 表型特征检测 | 第25-26页 |
| 2.4.1 培养特性检测 | 第25页 |
| 2.4.2 生化特性检测 | 第25-26页 |
| 2.5 16S rDNA序列测定与系统发育分析 | 第26页 |
| 2.6 gadB与eip基因序列测定和分析 | 第26-27页 |
| 3 结果 | 第27-34页 |
| 3.1 病原菌的分离 | 第27-28页 |
| 3.2 人工感染试验 | 第28-29页 |
| 3.3 表型特征检测 | 第29-32页 |
| 3.3.1 培养特性检测 | 第29页 |
| 3.3.2 生化特性 | 第29-32页 |
| 3.4 16S rDNA序列测定与系统发育分析 | 第32-33页 |
| 3.5 gadB与eip基因序列测定和分析 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-38页 |
| 4.1 爱德华氏菌的危害 | 第34-35页 |
| 4.2 爱德华氏菌培养特性 | 第35-36页 |
| 4.3 爱德华氏菌病的防治 | 第36页 |
| 4.4 爱德华氏菌的鉴定 | 第36-38页 |
| 第三章 迟缓爱德华氏菌与鮰爱德华氏菌双重PCR方法的建立 | 第38-53页 |
| 1 材料 | 第38页 |
| 1.1 菌株 | 第38页 |
| 1.2 主要试剂 | 第38页 |
| 1.3 主要仪器 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-41页 |
| 2.1 双重PCR引物的合成 | 第38-39页 |
| 2.2 E.tarda DNA的提取 | 第39页 |
| 2.3 E.ictaluri DNA的提取 | 第39页 |
| 2.4 E.tarda单一PCR和Eictaluri单一PCR的优化 | 第39-40页 |
| 2.5 双重PCR条件的优化 | 第40页 |
| 2.5.1 退火温度的优化 | 第40页 |
| 2.5.2 Mg~(2+)浓度的优化 | 第40页 |
| 2.5.3 引物浓度的优化 | 第40页 |
| 2.5.4 模板DNA质量浓度的优化 | 第40页 |
| 2.6 PCR产物检测 | 第40-41页 |
| 2.7 双重PCR与单一PCR的比较 | 第41页 |
| 2.7.1 特异性的比较 | 第41页 |
| 2.7.2 灵敏性的比较 | 第41页 |
| 3 结果 | 第41-50页 |
| 3.1 迟缓爱德华氏菌单一PCR条件优化结果 | 第41-43页 |
| 3.2 鮰爱德华氏菌单一PCR条件优化结果 | 第43-45页 |
| 3.3 双重PCR条件优化结果 | 第45-46页 |
| 3.4 特异性比较结果 | 第46-48页 |
| 3.4.1 迟缓爱德华氏菌PCR的特异性实验 | 第46-47页 |
| 3.4.2 鮰爱德华氏菌PCR的特异性实验 | 第47-48页 |
| 3.4.3 双重PCR的特异性实验 | 第48页 |
| 3.5 敏感性比较结果 | 第48-50页 |
| 3.5.1 迟缓爱德华氏菌PCR的敏感性实验结果 | 第48页 |
| 3.5.2 鮰爱德华氏菌PCR的敏感性实验结果 | 第48-49页 |
| 3.5.3 双重PCR的敏感性实验结果 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 双重PCR方法的优点 | 第50-51页 |
| 4.2 双重PCR引物的设计 | 第51页 |
| 4.3 双重PCR的条件优化 | 第51-52页 |
| 4.4 双重PCR方法的敏感性 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61页 |