| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 植物色彩变异研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.1 外界因素 | 第13页 |
| 1.1.2 植物自身因素 | 第13-15页 |
| 1.1.2.1 叶绿素 | 第14页 |
| 1.1.2.2 叶绿体 | 第14页 |
| 1.1.2.3 核基因 | 第14-15页 |
| 1.2 研究背景 | 第15-17页 |
| 1.2.1 竹资源与前景 | 第15页 |
| 1.2.2 黄秆乌哺鸡竹 | 第15-17页 |
| 1.2.2.1 生物学特性 | 第15-16页 |
| 1.2.2.2 特异性秆色 | 第16-17页 |
| 1.3 Lhca1和Lhca2蛋白研究进展 | 第17-22页 |
| 1.3.1 光合作用光系统 | 第17-18页 |
| 1.3.2 光系统Ⅰ（PSⅠ） | 第18-19页 |
| 1.3.3 Lhca蛋白 | 第19-21页 |
| 1.3.4 毛竹中Lhca蛋白 | 第21-22页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 1.5 技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 PvLhca1和PvLhca2基因cDNA全长的克隆及分析 | 第24-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.2 实验试剂与仪器 | 第24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-35页 |
| 2.3.1 RACE | 第24-34页 |
| 2.3.1.1 PvLhca1和PvLhca2基因特异性引物 | 第24-25页 |
| 2.3.1.2 总RNA提取 | 第25-26页 |
| 2.3.1.3 全绿秆叶 5′ RACE cDNA的制备 | 第26-28页 |
| 2.3.1.4 3′RACE cDNA的制备 | 第28-29页 |
| 2.3.1.5 实验步骤 | 第29-34页 |
| 2.3.2 基因cDNA克隆 | 第34-35页 |
| 2.3.2.1 总RNA的提取 | 第34页 |
| 2.3.2.2 cDNA模板制备 | 第34-35页 |
| 2.3.2.3 实验步骤 | 第35页 |
| 2.4 生物信息学分析 | 第35页 |
| 2.4.1 cDNA全长与氨基酸序列 | 第35页 |
| 2.4.2 不同物种同源基因氨基酸序列比对分析 | 第35页 |
| 2.4.3 蛋白质分析 | 第35页 |
| 2.5 结果分析 | 第35-46页 |
| 2.5.1 总RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.5.2 PvLhca1和PvLhca2 RACE扩增分析 | 第36-38页 |
| 2.5.2.1 PvLhca15′ RACE | 第36页 |
| 2.5.2.2 PvLhca25′ RACE | 第36-37页 |
| 2.5.2.3 PvLhca2基因 3′端延伸 | 第37-38页 |
| 2.5.3 cDNA扩增 | 第38-39页 |
| 2.5.3.1 PvLhca1基因CDNA区扩增 | 第38-39页 |
| 2.5.3.2 PvLhca2基因cDNA扩增 | 第39页 |
| 2.5.4 PvLhca1与PvLhca2基因cDNA序列分析 | 第39-42页 |
| 2.5.5 结构域鉴定 | 第42-45页 |
| 2.5.6 进化树分析 | 第45页 |
| 2.5.7 蛋白质三维预测 | 第45-46页 |
| 2.6 讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 PvLhca1和PvLhca2基因时空表达谱 | 第48-54页 |
| 3.1 实验材料 | 第48-49页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第48页 |
| 3.1.2 试剂与仪器 | 第48页 |
| 3.1.3 定量RT-PCR引物设计 | 第48-49页 |
| 3.2 实验方法 | 第49-50页 |
| 3.2.1 提取植物的总RNA | 第49页 |
| 3.2.2 合成cDNA链 | 第49-50页 |
| 3.2.3 实时定量RT-PCR检测 | 第50页 |
| 3.3 结果分析 | 第50-52页 |
| 3.3.1 PvLhca1在全黄竹笋和全绿竹笋对应节间表达差异 | 第50-51页 |
| 3.3.2 PvLhca2在全黄竹笋和全绿竹笋对应节间表达差异 | 第51-52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 PvLhca1和PvLhca2基因编码蛋白表达差异分析 | 第54-62页 |
| 4.1 实验材料 | 第54页 |
| 4.2 仪器与试剂 | 第54页 |
| 4.3 实验步骤 | 第54-57页 |
| 4.3.1 实时定量RT-PCR | 第54-55页 |
| 4.3.2 WB检测 | 第55-57页 |
| 4.3.2.1 多肽设计与合成 | 第55页 |
| 4.3.2.2 抗体生成 | 第55页 |
| 4.3.2.3 抗体制备 | 第55-56页 |
| 4.3.2.4 WB检测 | 第56-57页 |
| 4.4 结果分析 | 第57-60页 |
| 4.4.1 荧光定量RT-PCR分析 | 第57-59页 |
| 4.4.1.1 PvLhca1基因在不同条纹表达模式分析 | 第57-58页 |
| 4.4.1.2 PvLhca2基因在不同条纹表达模式分析 | 第58-59页 |
| 4.4.2 WB检测结果分析 | 第59-60页 |
| 4.4.2.1 效价检测 | 第59页 |
| 4.4.2.2 WB检测分析 | 第59-60页 |
| 4.5 讨论 | 第60-62页 |
| 第五章 农杆菌介导PvLhca1和PvLhca2基因遗传转化拟南芥 | 第62-76页 |
| 5.1 实验材料 | 第62-63页 |
| 5.1.1 材料 | 第62页 |
| 5.1.2 试剂与仪器设备 | 第62页 |
| 5.1.3 植物表达载体构建引物的设计 | 第62-63页 |
| 5.2 实验方法 | 第63-69页 |
| 5.2.1 质粒的提取 | 第63-64页 |
| 5.2.1.1 pc1301质粒提取 | 第63-64页 |
| 5.2.1.2 目的基因质粒提取 | 第64页 |
| 5.2.2 添加酶切位点 | 第64-65页 |
| 5.2.3 限制性酶切 | 第65页 |
| 5.2.4 产物连接 | 第65页 |
| 5.2.5 转化大肠杆菌及阳性克隆筛选 | 第65页 |
| 5.2.6 菌检及测序 | 第65-66页 |
| 5.2.7 根癌农杆菌热激感受态的制备 | 第66页 |
| 5.2.8 转化农杆菌及阳性克隆筛选 | 第66页 |
| 5.2.9 重组质粒及PCR验证 | 第66-67页 |
| 5.2.10 拟南芥的培养 | 第67页 |
| 5.2.11 栽培拟南芥植株 | 第67页 |
| 5.2.12 浸花法侵染拟南芥 | 第67页 |
| 5.2.12.1 准备 | 第67页 |
| 5.2.12.2 制备侵染液 | 第67页 |
| 5.2.12.3 花序侵染 | 第67页 |
| 5.2.13 转基因种子的筛选 | 第67-68页 |
| 5.2.14 转基因植株验证 | 第68页 |
| 5.2.14.1 GUS染色 | 第68页 |
| 5.2.14.2 PCR验证 | 第68页 |
| 5.2.15 表型观察 | 第68页 |
| 5.2.16 P700测定 | 第68页 |
| 5.2.17 获得转基因植株 | 第68-69页 |
| 5.3 结果分析 | 第69-74页 |
| 5.3.1 构建表达载体 | 第69-70页 |
| 5.3.2 转基因验证 | 第70-72页 |
| 5.3.2.1 幼苗期观察 | 第70-71页 |
| 5.3.2.2 GUS检测 | 第71页 |
| 5.3.2.3 PCR验证 | 第71-72页 |
| 5.3.3 表型分析 | 第72-73页 |
| 5.3.4 叶绿素P700活性 | 第73-74页 |
| 5.4 讨论 | 第74-76页 |
| 第六章 不同秆色来源的PvLhca1和PvLhca2 cDNA序列和DNA序列的差异分析 | 第76-85页 |
| 6.1 实验材料 | 第76页 |
| 6.2 主要实验仪器与试剂 | 第76页 |
| 6.3 实验步骤 | 第76-79页 |
| 6.3.1 总RNA的提取 | 第76页 |
| 6.3.2 cDNA模板制备 | 第76-77页 |
| 6.3.3 DNA的提取 | 第77页 |
| 6.3.4 序列扩增 | 第77-79页 |
| 6.3.4.1 cDNA全长扩增 | 第77-78页 |
| 6.3.4.2 DNA全长扩增 | 第78-79页 |
| 6.4 结果分析 | 第79-84页 |
| 6.4.1 PvLhca1和PvLhca2 cDNA序列分析 | 第79-81页 |
| 6.4.1.1 PvLhca1-cDNA序列在全黄秆和全绿秆中序列比较 | 第79-80页 |
| 6.4.1.2 PvLhca2-cDNA序列在全黄秆和全绿秆中序列比较 | 第80-81页 |
| 6.4.2 PvLhca1和PvLhca2 DNA序列分析 | 第81-84页 |
| 6.4.2.1 PvLhca1-DNA序列在全黄秆和全绿秆中序列比较 | 第81-83页 |
| 6.4.2.2 PvLhca2-DNA序列在全黄秆和全绿秆中序列比较 | 第83-84页 |
| 6.5 讨论 | 第84-85页 |
| 第七章 PvLhca1和PvLhca2基因上游调控序列的克隆 | 第85-95页 |
| 7.1 实验材料 | 第85页 |
| 7.2 仪器与试剂 | 第85页 |
| 7.3 实验方法 | 第85-89页 |
| 7.3.1 全绿秆与全黄秆笋样总RNA提取 | 第85页 |
| 7.3.2 高纯DNA提取 | 第85-86页 |
| 7.3.3 特异性引物设计 | 第86页 |
| 7.3.4 片段扩增 | 第86-89页 |
| 7.3.4.1 建库 | 第86-88页 |
| 7.3.4.2 PCR扩增 | 第88-89页 |
| 7.4 调控元件预测 | 第89页 |
| 7.5 结果分析 | 第89-92页 |
| 7.5.1 PvLhca1上游调控序列的克隆和比较 | 第89-91页 |
| 7.5.2 PvLhca2-上游调控序列的克隆和比较 | 第91-92页 |
| 7.6 上游序列调控元件的预测 | 第92-94页 |
| 7.6.1 全黄秆PvLhca1上游序列调控元件的预测 | 第92-93页 |
| 7.6.2 全黄秆PvLhca2上游序列调控元件的预测 | 第93-94页 |
| 7.7 讨论 | 第94-95页 |
| 第八章 结论与展望 | 第95-97页 |
| 8.1 研究结论 | 第95-96页 |
| 8.2 展望 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-104页 |
| 个人简介 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105页 |
