| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-48页 |
| 1.1 哺乳动物卵母细胞发生过程 | 第14-15页 |
| 1.2 卵母细胞成熟过程分子调控机制 | 第15-21页 |
| 1.2.1 GV期阻滞维持 | 第15-17页 |
| 1.2.2 减数分裂恢复与进行 | 第17-21页 |
| 1.3 蛋白质组学研究概述 | 第21-23页 |
| 1.4 定量蛋白质组学研究进展 | 第23-31页 |
| 1.4.1 相对定量 | 第24-30页 |
| 1.4.2 绝对定量 | 第30-31页 |
| 1.5 哺乳动物卵母细胞蛋白质组学研究的意义 | 第31页 |
| 1.6 哺乳动物卵母细胞蛋白质组学研究进展 | 第31-40页 |
| 1.6.1 蛋白质组学与哺乳动物卵母细胞质量 | 第31-33页 |
| 1.6.2 蛋白质组学与哺乳动物卵母细胞成熟 | 第33-36页 |
| 1.6.3 哺乳动物卵母细胞和颗粒细胞蛋白质组 | 第36-37页 |
| 1.6.4 体外培养卵母细胞蛋白质组 | 第37页 |
| 1.6.5 卵母细胞体外受精与蛋白质组 | 第37-38页 |
| 1.6.6 表观遗传相关蛋白:母源效应蛋白组 | 第38页 |
| 1.6.7 哺乳动物早期胚胎蛋白质组 | 第38-40页 |
| 1.7 血清蛋白质样品预处理方法研究进展 | 第40-44页 |
| 1.7.1 超滤管法 | 第41页 |
| 1.7.2 有机溶剂沉淀法 | 第41-42页 |
| 1.7.3 免疫亲和去除法 | 第42-43页 |
| 1.7.4 组合肽文库法 | 第43-44页 |
| 1.7.5 电泳凝胶分离法 | 第44页 |
| 1.8 研究目的、意义 | 第44-47页 |
| 1.9 研究内容 | 第47-48页 |
| 第二章 成熟前后水牛卵母细胞蛋白质表达谱的构建 | 第48-63页 |
| 2.1 材料与方法 | 第49-55页 |
| 2.1.1 材料来源 | 第49页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第49页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第49-50页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第50-55页 |
| 2.2 结果与分析 | 第55-59页 |
| 2.2.1 成熟前后水牛卵母细胞蛋白量平衡及SDS-PAGE分离结果 | 第55页 |
| 2.2.2 成熟前后水牛卵母细胞蛋白质表达谱 | 第55-56页 |
| 2.2.3 成熟前后水牛卵母细胞蛋白质GO聚类分析 | 第56-57页 |
| 2.2.4 成熟前后水牛卵母细胞蛋白质参与的信号通路分析 | 第57-58页 |
| 2.2.5 GV期和MⅡ期水牛卵母细胞高丰度表达蛋白质 | 第58-59页 |
| 2.3 讨论 | 第59-62页 |
| 2.4 小结 | 第62-63页 |
| 第三章 基于iTRAQ技术的成熟前后和胞质正常与异常的水牛卵母细胞定量蛋白质组研究 | 第63-89页 |
| 3.1 材料与方法 | 第64-69页 |
| 3.1.1 材料来源 | 第64页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第64页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第64-65页 |
| 3.1.4 实验方法 | 第65-69页 |
| 3.2 结果与分析 | 第69-82页 |
| 3.2.1 SDS-PAGE分离结果 | 第69-70页 |
| 3.2.2 iTRAQ标记及第一维反相液相分离 | 第70-71页 |
| 3.2.3 LC-MS/MS鉴定结果 | 第71-73页 |
| 3.2.4 不同哺乳动物卵母细胞蛋白质组数据集比较 | 第73-74页 |
| 3.2.5 水牛卵母细胞蛋白质表达谱GO分析及KEGG通路分析 | 第74-75页 |
| 3.2.6 差异表达蛋白质筛选 | 第75-77页 |
| 3.2.7 差异表达蛋白GO分析 | 第77-80页 |
| 3.2.8 差异表达蛋白质KEGG pathway分析 | 第80-81页 |
| 3.2.9 差异表达蛋白的相互作用分析 | 第81页 |
| 3.2.10 qRT-PCR技术验证差异表达蛋白mRNA表达水平 | 第81-82页 |
| 3.3 讨论 | 第82-88页 |
| 3.4 小结 | 第88-89页 |
| 第四章 小分子量蛋白质不同分离富集方法的比较研究 | 第89-111页 |
| 4.1 材料与方法 | 第90-96页 |
| 4.1.1 血清样本、菌株与质粒 | 第90页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第90页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第90-91页 |
| 4.1.4 实验方法 | 第91-96页 |
| 4.2 结果与分析 | 第96-106页 |
| 4.2.1 Gel-filter方法的建立 | 第96-98页 |
| 4.2.2 不同血清小分子量蛋白质富集方法电泳结果比较 | 第98-100页 |
| 4.2.3 LC-MS/MS鉴定结果 | 第100-102页 |
| 4.2.4 不同血清小分子量蛋白质富集方法质谱鉴定结果比较 | 第102-103页 |
| 4.2.5 不同血清蛋白质组数据集的比较 | 第103-104页 |
| 4.2.6 不同富集方法小分子量蛋白质回收率的比较 | 第104-106页 |
| 4.3 讨论 | 第106-109页 |
| 4.4 小结 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-129页 |
| 附录 | 第129-148页 |
| 攻读学位期间发表的学术成果 | 第148-149页 |
| 致谢 | 第149-150页 |
