| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-20页 |
| 1.1 2,3-丁二醇概况 | 第9-11页 |
| 1.1.1 2,3-丁二醇的理化性质 | 第9页 |
| 1.1.2 2,3-丁二醇旋光异构体的形成机制 | 第9-10页 |
| 1.1.3 2,3-丁二醇的应用 | 第10-11页 |
| 1.2 生物法生产2,3-丁二醇 | 第11-16页 |
| 1.2.1 菌种 | 第11页 |
| 1.2.2 原料 | 第11-12页 |
| 1.2.3 微生物生成2,3-丁二醇的代谢途径 | 第12-14页 |
| 1.2.4 微生物法生产2,3-丁二醇代谢途径的改造 | 第14-16页 |
| 1.3 利用乳糖发酵生产2,3-丁二醇研究进展 | 第16页 |
| 1.4 乳糖代谢途径研究进展 | 第16-17页 |
| 1.5 本课题的研究意义与内容 | 第17-20页 |
| 1.5.1 本课题研究的意义 | 第18页 |
| 1.5.2 本课题研究的内容 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-24页 |
| 2.1.1 菌种 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要培养基 | 第22页 |
| 2.1.5 主要溶液 | 第22-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-31页 |
| 2.2.1 质粒的构建 | 第24-29页 |
| 2.2.2 菌株构建 | 第29-30页 |
| 2.2.3 种子培养 | 第30页 |
| 2.2.4 发酵培养 | 第30页 |
| 2.2.5 生长曲线的绘制 | 第30页 |
| 2.2.6 SDS-PAGE蛋白电泳 | 第30-31页 |
| 2.3 分析方法 | 第31-38页 |
| 2.3.1 菌体浓度的测定 | 第31-32页 |
| 2.3.2 代谢产物浓度的测定 | 第32-36页 |
| 2.3.3 单位菌体最大乳糖比消耗速率的测定 | 第36页 |
| 2.3.4 β-半乳糖苷酶酶活的测定 | 第36-37页 |
| 2.3.5 乳糖通透酶酶活的测定 | 第37-38页 |
| 3 结果与讨论 | 第38-59页 |
| 3.1 外源添加β-半乳糖苷酶发酵实验 | 第38-40页 |
| 3.2 重组质粒的构建 | 第40-45页 |
| 3.2.1 质粒pUC18K-bgaB的构建 | 第40-42页 |
| 3.2.2 质粒pUC18K-ElacY的构建 | 第42-44页 |
| 3.2.3 质粒pUC18K-KlacY的构建 | 第44-45页 |
| 3.3 过量表达bgaB基因对菌株利用乳糖的影响 | 第45-51页 |
| 3.3.1 Kan抗性筛选重组菌株 | 第45-46页 |
| 3.3.2 重组菌株KG1/pUC18K-bgaB、10011/pUC18K-bgaB的构建与验证 | 第46页 |
| 3.3.3 过表达bgaB菌株与出发菌株生长速度的比较 | 第46-47页 |
| 3.3.4 过表达bgaB菌株与出发菌株SDS-PAGE的比较 | 第47页 |
| 3.3.5 过表达bgaB菌株与出发菌株β-半乳糖苷酶活力的比较 | 第47-48页 |
| 3.3.6 过表达bgaB菌株与出发菌株乳糖消耗速度比较 | 第48-49页 |
| 3.3.7 过表达bgaB菌株与出发菌株最大乳糖比消耗速率的比较 | 第49-50页 |
| 3.3.8 过表达bgaB菌株与出发菌株2,3-丁二醇及副产物产量的比较 | 第50-51页 |
| 3.4 过量表达ElacY基因对菌株利用乳糖的影响 | 第51-54页 |
| 3.4.1 重组菌株KG1/pUC18K-ElacY、10011/pUC18K-ElacY的构建与验证 | 第51页 |
| 3.4.2 过表达ElacY菌株与出发菌株生长速度的比较 | 第51页 |
| 3.4.3 过表达ElacY菌株与出发菌株乳糖通透酶活力的比较 | 第51-52页 |
| 3.4.4 过表达ElacY菌株与出发菌株乳糖消耗速度比较 | 第52-53页 |
| 3.4.5 过表达ElacY菌株与出发菌株最大乳糖比消耗速率的比较 | 第53-54页 |
| 3.4.6 过表达ElacY菌株与出发菌株2,3-丁二醇及副产物产量的比较 | 第54页 |
| 3.5 过量表达KlacY基因对菌株利用乳糖的影响 | 第54-59页 |
| 3.5.1 重组菌株KG1/pUC18K-KlacY、10011/pUC18K-KlacY的构建与验证 | 第54-55页 |
| 3.5.2 过表达KlacY菌株与出发菌株生长速度的比较 | 第55页 |
| 3.5.3 过表达KlacY菌株与出发菌株乳糖通透酶活力的比较 | 第55-56页 |
| 3.5.4 过表达KlacY菌株与出发菌株乳糖消耗速度比较 | 第56-57页 |
| 3.5.5 过表达KlacY菌株与出发菌株最大乳糖比消耗速率的比较 | 第57页 |
| 3.5.6 过表达KlacY菌株与出发菌株2,3-丁二醇及副产物产量的比较 | 第57-59页 |
| 4 结论 | 第59-60页 |
| 5 展望 | 第60-61页 |
| 6 参考文献 | 第61-67页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第67-68页 |
| 8 致谢 | 第68页 |
