| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 HCV及其相关的疾病研究进展 | 第13-27页 |
| 1.1 丙型肝炎的流行病学 | 第13-14页 |
| 1.1.1 全球丙型肝炎流行情况 | 第13页 |
| 1.1.2 中国丙型肝炎流行情况 | 第13页 |
| 1.1.3 丙型肝炎传播方式 | 第13-14页 |
| 1.2 HCV的致病机制 | 第14-15页 |
| 1.2.1 HCV的慢性感染 | 第14-15页 |
| 1.2.2 肝组织纤维化和肝硬化 | 第15页 |
| 1.2.3 肝衰竭 | 第15页 |
| 1.2.4 肝细胞癌 | 第15页 |
| 1.3 HCV的分型 | 第15-16页 |
| 1.4 HCV的理化性质,基因组结构及其编码产物 | 第16-18页 |
| 1.4.1 HCV的理化性质 | 第16-17页 |
| 1.4.2 基因组结构及其编码产物 | 第17页 |
| 1.4.3 5’末端非编码区(5'UTR) | 第17-18页 |
| 1.4.4 3’末端非编码区(3'UTR) | 第18页 |
| 1.5 HCV蛋白及其功能 | 第18-22页 |
| 1.5.1 Core蛋白 | 第18-19页 |
| 1.5.2 F蛋白 | 第19页 |
| 1.5.3 结构蛋白E1,E2,p7 | 第19-20页 |
| 1.5.4 NS2蛋白 | 第20页 |
| 1.5.5 NS3蛋白 | 第20页 |
| 1.5.6 NS4蛋白 | 第20-21页 |
| 1.5.7 NS5蛋白 | 第21-22页 |
| 1.6 HCV的生活史 | 第22-24页 |
| 1.6.1 吸附和进入 | 第22-23页 |
| 1.6.2 蛋白前体的翻译和加工 | 第23页 |
| 1.6.3 RNA复制 | 第23-24页 |
| 1.6.4 病毒粒子的组装和释放 | 第24页 |
| 1.7 HCV与细胞的相互作用 | 第24-26页 |
| 1.7.1 病毒与细胞免疫反应 | 第24-26页 |
| 1.8 研究HCV的模型系统 | 第26-27页 |
| 1.8.1 动物模型 | 第26页 |
| 1.8.2 HCV体外细胞培养体系 | 第26-27页 |
| 第二章 人白细胞介素27研究进展 | 第27-33页 |
| 2.1 白细胞介素27的命名与发现史 | 第27页 |
| 2.2 白细胞介素27的基本结构及表达 | 第27-29页 |
| 2.2.1 EBI3的结构 | 第27-28页 |
| 2.2.2 EBI3的表达 | 第28页 |
| 2.2.3 p28的结构 | 第28页 |
| 2.2.4 p28的表达 | 第28-29页 |
| 2.3 白细胞介素27受体的结构及其表达 | 第29-30页 |
| 2.4 白细胞介素27的功能 | 第30-33页 |
| 2.4.1 IL-27促进Th1型细胞免疫应答 | 第30-31页 |
| 2.4.2 IL-27对免疫反应的抑制作用 | 第31-32页 |
| 2.4.3 IL-27对肿瘤的抑制作用 | 第32页 |
| 2.4.4 IL-27抗病毒复制的作用 | 第32-33页 |
| 第三章 丙肝患者IL-27水平的检测 | 第33-37页 |
| 3.1 材料 | 第33页 |
| 3.1.1 研究对象 | 第33页 |
| 3.1.2 试剂盒 | 第33页 |
| 3.2 方法 | 第33-34页 |
| 3.2.1 标本的收集与保存 | 第33-34页 |
| 3.2.2 HCV RNA的荧光定量PCR测定 | 第34页 |
| 3.2.3 血清IL-27的检测 | 第34页 |
| 3.2.4 统计学处理 | 第34页 |
| 3.3 结果 | 第34-35页 |
| 3.3.1 慢性丙肝患者和正常对照组IL-27水平的检测 | 第34-35页 |
| 3.3.2 IL-27水平和病毒载量,转氨酶的关系 | 第35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 HCV上调IL-27水平的机制初探 | 第37-59页 |
| 4.1 实验材料 | 第37-38页 |
| 4.1.1 载体,菌株,细胞和病毒 | 第37页 |
| 4.1.2 试剂及主要的酶系统 | 第37-38页 |
| 4.1.3 细菌培养相关试剂及其配制 | 第38页 |
| 4.1.4 细胞培养的相关试剂及其配制略 | 第38页 |
| 4.2 实验方法 | 第38-49页 |
| 4.2.1 HCV编码蛋白的真核表达载体的构建 | 第38页 |
| 4.2.2 IL-27启动子质粒和IL-27/EBI3启动子截短突变体的构建 | 第38-43页 |
| 4.2.3 转染哺乳动物细胞的高纯质粒的提取 | 第43-44页 |
| 4.2.4 哺乳动物细胞培养及转染 | 第44-46页 |
| 4.2.5 细胞系的总RNA提取以及RT-PCR反应 | 第46-49页 |
| 4.2.6 IL-27水平的检测(见第三章) | 第49页 |
| 4.3 结果 | 第49-58页 |
| 4.3.1 HCV编码蛋白的真核表达载体的构建 | 第49页 |
| 4.3.2 IL-27/EBI3启动子截短突变体的构建 | 第49-50页 |
| 4.3.3 HCV对IL-27启动子的活性影响 | 第50-51页 |
| 4.3.4 HCV对IL-27 mRNA水平的影响 | 第51页 |
| 4.3.5 HCV对IL-27蛋白表达水平的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.6 NF-κB通路在HCV激活IL-27 EBB亚基启动子过程中的作用 | 第52-53页 |
| 4.3.7 HCV NS3蛋白对IL-27 EBI3亚基启动子激活的影响 | 第53-56页 |
| 4.3.8 HCV NS5A蛋白对IL-27 p28亚基启动子激活的影响 | 第56-58页 |
| 4.4 讨论 | 第58-59页 |
| 第五章 IL-27对HCV复制的影响 | 第59-64页 |
| 5.1 实验材料 | 第59-60页 |
| 5.1.1 载体,菌株,细胞和病毒 | 第59页 |
| 5.1.2 试剂及主要的酶系统 | 第59页 |
| 5.1.3 试剂盒 | 第59-60页 |
| 5.2 方法 | 第60页 |
| 5.2.1 哺乳动物细胞培养及转染(见第四章) | 第60页 |
| 5.2.2 HCV RNA检测(见第三章) | 第60页 |
| 5.2.3 IL-27蛋白抑制HCV复制试验 | 第60页 |
| 5.3 结果 | 第60-62页 |
| 5.4 讨论 | 第62-64页 |
| 研究总结与创新点 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-88页 |
| 附录 博士研究生期间发表及待发表的论文 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
