| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩略词与符号表 | 第8-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 叶色突变体的来源 | 第13页 |
| 1.2 叶色突变体的表型与叶绿素含量的关系 | 第13-14页 |
| 1.3 叶色突变体的表型与叶绿体的结构 | 第14页 |
| 1.4 叶色变异的遗传方式 | 第14-15页 |
| 1.5 叶色突变的分子机制 | 第15-17页 |
| 1.5.1 叶绿素生物合成途径受阻 | 第15页 |
| 1.5.2 叶绿素降解途径受阻 | 第15-16页 |
| 1.5.3 叶绿体的分化和发育受阻 | 第16页 |
| 1.5.4 质核信号传导途径受阻 | 第16-17页 |
| 1.5.5 叶绿体蛋白转运受阻 | 第17页 |
| 1.6 叶绿体基因组的结构与表达调控 | 第17-21页 |
| 1.6.1 叶绿体基因组的结构 | 第17-18页 |
| 1.6.2 叶绿体基因的转录 | 第18-19页 |
| 1.6.3 叶绿体基因的转录后加工 | 第19-21页 |
| 1.6.3.1 RNA加工 | 第19页 |
| 1.6.3.2 RNA编辑 | 第19页 |
| 1.6.3.3 RNA剪接 | 第19-21页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-39页 |
| 2.1 供试植物材料 | 第22-23页 |
| 2.2 材料种植 | 第23页 |
| 2.3 主要试剂 | 第23页 |
| 2.4 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.5 叶绿素含量的测定 | 第24页 |
| 2.6 透射电子显微镜观察样品的制作 | 第24-25页 |
| 2.7 GUS活性组织化学染色 | 第25页 |
| 2.8 引物的设计与合成 | 第25-30页 |
| 2.8.1 AL2基因的RT-PCR引物 | 第26页 |
| 2.8.2 AL2基因的qRT-PCR引物 | 第26-27页 |
| 2.8.3 叶绿体内含有I型和II型内含子基因的qRT-PCR引物 | 第27页 |
| 2.8.4 水稻CBGs的qRT-PCR引物 | 第27-28页 |
| 2.8.5 水稻PEP的qRT-PCR引物 | 第28-29页 |
| 2.8.6 水稻NEP的qRT-PCR引物 | 第29-30页 |
| 2.8.7 水稻NECGs的q RT-PCR引物 | 第30页 |
| 2.9 水稻总DNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.10 水稻原生质体GFP蛋白的瞬时表达 | 第31-36页 |
| 2.10.1 引物设计 | 第31-32页 |
| 2.10.2 PCR扩增及产物纯化 | 第32页 |
| 2.10.3 双酶切 | 第32-33页 |
| 2.10.4 连接 | 第33页 |
| 2.10.5 质粒DNA转化大肠杆菌 | 第33页 |
| 2.10.6 转化子的鉴定 | 第33-34页 |
| 2.10.7 质粒DNA的制备和纯化 | 第34页 |
| 2.10.8 水稻原生质体的游离 | 第34-35页 |
| 2.10.9 质粒DNA转化原生质体 | 第35页 |
| 2.10.10 蛋白的亚细胞定位及观察 | 第35-36页 |
| 2.11 水稻总RNA的提取 | 第36页 |
| 2.12 反转录第一链的合成 | 第36-37页 |
| 2.13 内参基因actin的检测 | 第37页 |
| 2.14 基因表达的RT-PCR分析 | 第37-38页 |
| 2.14.1 PCR反应 | 第37页 |
| 2.14.2 电泳及凝胶成像系统检测 | 第37-38页 |
| 2.15 基因表达的qRT-PCR分析 | 第38页 |
| 2.15.1 qRT-PCR反应 | 第38页 |
| 2.15.2 基因表达的相对定量 | 第38页 |
| 2.16 进化树的构建 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-54页 |
| 3.1 叶色突变体al2的表型 | 第39-40页 |
| 3.2 叶色突变体al2的叶绿体超微结构 | 第40-41页 |
| 3.3 水稻基因AL2候选基因的分析 | 第41-42页 |
| 3.4 水稻基因AL2的功能验证 | 第42-45页 |
| 3.4.1 水稻基因AL2的功能互补 | 第42-44页 |
| 3.4.2 水稻基因AL2的敲除 | 第44-45页 |
| 3.5 水稻基因AL2的表达模式 | 第45-49页 |
| 3.5.1 水稻基因AL2的启动子与GUS的融合表达 | 第45-46页 |
| 3.5.2 水稻基因AL2在不同组织器官的表达量 | 第46-47页 |
| 3.5.3 水稻AL2-GFP融合蛋白的亚细胞定位 | 第47-49页 |
| 3.6 水稻AL2基因参与叶绿体基因内含子的剪接 | 第49-52页 |
| 3.6.1 水稻AL2同源蛋白的进化关系 | 第49-51页 |
| 3.6.2 突变体al2中含有叶绿体I型和II型内含子基因的表达 | 第51-52页 |
| 3.7 叶绿体相关基因的表达 | 第52-54页 |
| 4 讨论与结论 | 第54-57页 |
| 4.1 讨论 | 第54-55页 |
| 4.1.1 AL2可能参与叶绿体基因I型、IIA型和IIB型内含子的剪接 | 第54-55页 |
| 4.1.2 AL2是协同部分叶绿体相关基因的表达来调控叶绿体发育的 | 第55页 |
| 4.2 结论 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-69页 |
| 附录A 相关载体构建所用引物 | 第69-70页 |
| 附录B 水稻木村B水培营养液（1000×） | 第70-71页 |
| 附录C 水稻AL2蛋白序列（948AA） | 第71页 |
