| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词表 | 第6-11页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒简介 | 第11页 |
| 1.2 PRRS的临床症状和病理变化 | 第11-13页 |
| 1.3 PRRSV的理化性质 | 第13-14页 |
| 1.4 PRRSV在国内的流行 | 第14-15页 |
| 1.5 PRRSV的基因组结构 | 第15-17页 |
| 1.6 PRRSV的复制和相关蛋白 | 第17-18页 |
| 1.7 PRRSV的细胞嗜性 | 第18-19页 |
| 1.8 PRRSV的基因型变化 | 第19-20页 |
| 1.9 研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-34页 |
| 2.1 材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 样品 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株、毒株、单抗及载体 | 第21页 |
| 2.1.3 细胞及细胞培养基 | 第21页 |
| 2.1.4 细菌培养基 | 第21页 |
| 2.1.5 酶类及相关试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.6 实验动物 | 第23页 |
| 2.1.7 主要仪器和设备 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-32页 |
| 2.2.1 引物的设计和合成 | 第24-25页 |
| 2.2.2 总RNA的提取 | 第25页 |
| 2.2.3 反转录cDNA的合成 | 第25-26页 |
| 2.2.4 PCR扩增 | 第26页 |
| 2.2.5 分离毒株的PCR鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.6 间接免疫荧光检测（IFA） | 第27页 |
| 2.2.7 病毒全基因组各片段的PCR扩增 | 第27-28页 |
| 2.2.8 PCR产物的回收及纯化 | 第28页 |
| 2.2.9 PCR回收产物与载体连接 | 第28-29页 |
| 2.2.10 感受态细胞的制备 | 第29页 |
| 2.2.11 连接产物转化DH5α感受态细胞 | 第29页 |
| 2.2.12 PCR阳性菌液的序列测定 | 第29-30页 |
| 2.2.13 分离毒株全基因组的序列测定及分析 | 第30-31页 |
| 2.2.14 分离的PRRSV同30株参比序列ORF5基因相似性分析 | 第31-32页 |
| 2.3 PRRSV抗体水平的检测 | 第32-34页 |
| 2.3.1 试剂准备 | 第32页 |
| 2.3.2 洗涤液的准备 | 第32页 |
| 2.3.3 操作步骤 | 第32-33页 |
| 2.3.4 结果判定 | 第33页 |
| 2.3.5 检测结果分析 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-46页 |
| 3.1 河源某规模化场感染PRRSV后的情况 | 第34-36页 |
| 3.1.1 临床症状 | 第34页 |
| 3.1.2 剖检变化 | 第34-35页 |
| 3.1.3 生产成绩 | 第35-36页 |
| 3.2 病毒的RT-PCR鉴定 | 第36页 |
| 3.3 病毒的分离 | 第36-37页 |
| 3.4 IFA检测结果 | 第37-38页 |
| 3.5 PRRSV ORF5的序列测定 | 第38页 |
| 3.6 ORF5基因序列的同源性分析 | 第38-40页 |
| 3.7 HYHC1株与HYHC2株ORF5基因序列的进化关系分析 | 第40-41页 |
| 3.8 ORF5基因氨基酸位点变异分析 | 第41-43页 |
| 3.9 采取的防控措施 | 第43-44页 |
| 3.10 该场目前的生产成绩 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| 4.1 毒株分离和序列分析 | 第46-47页 |
| 4.1.1 病毒分离 | 第46-47页 |
| 4.1.2 序列分析 | 第47页 |
| 4.2 PRRSV的综合防控 | 第47-50页 |
| 4.2.1 选址和布局 | 第47页 |
| 4.2.2 消毒与无害化处理 | 第47-48页 |
| 4.2.3 疫苗和药物的使用 | 第48页 |
| 4.2.4 饲养管理 | 第48页 |
| 4.2.5 疫病净化 | 第48-49页 |
| 4.2.6 生物安全 | 第49-50页 |
| 全文总结 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |