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海滨锦葵耐盐生理特性及脯氨酸代谢相关基因的研究

致谢第4-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-8页
符号说明第13-16页
1 绪论第16-37页
    1.1 研究背景第16页
    1.2 盐胁迫对植物的影响第16-18页
        1.2.1 渗透胁迫第17页
        1.2.2 离子毒害第17页
        1.2.3 氧化胁迫第17-18页
    1.3 植物对盐胁迫的生理响应机制第18-26页
        1.3.1 植物避盐的机理第18-19页
        1.3.2 植物耐盐的机理第19-26页
    1.4 植物耐盐相关基因的研究进展第26-32页
        1.4.1 渗透调节物质合成相关基因第26-30页
        1.4.2 离子转运和区域化相关基因第30-31页
        1.4.3 抗氧化酶相关基因第31-32页
        1.4.4 信号传导及转录调控相关基因第32页
        1.4.5 植物耐盐基因工程展望第32页
    1.5 耐盐植物海滨锦葵研究进展第32-35页
        1.5.1 生物学特性第33页
        1.5.2 营养成分及利用价值第33-34页
        1.5.3 耐盐特性研究现状第34-35页
    1.6 本研究的目的意义及技术路线第35-37页
        1.6.1 研究意义和内容第35-36页
        1.6.2 技术路线第36-37页
2 海滨锦葵耐盐的生理生化特性研究第37-57页
    2.1 材料与方法第37-41页
        2.1.1 试验材料第37页
        2.1.2 幼苗培养和胁迫处理第37-38页
        2.1.3 叶绿素含量的测定第38页
        2.1.4 叶片光合参数和叶绿素荧光参数的测定第38-39页
        2.1.5 脯氨酸含量的测定第39页
        2.1.6 Na+、K+离子含量的测定第39页
        2.1.7 丙二醛含量的测定第39页
        2.1.8 相对电导率的测定第39-40页
        2.1.9 抗氧化酶活性的测定第40-41页
        2.1.10 数据分析第41页
    2.2 结果与分析第41-51页
        2.2.1 盐胁迫对海滨锦葵生长参数的影响第41-44页
        2.2.2 盐胁迫对海滨锦葵叶绿素含量的影响第44页
        2.2.3 盐胁迫对海滨锦葵叶片光合参数的影响第44-45页
        2.2.4 盐胁迫对海滨锦葵叶片叶绿素荧光参数的影响第45-46页
        2.2.5 盐胁迫对海滨锦葵叶片脯氨酸含量的影响第46-47页
        2.2.6 盐胁迫对海滨锦葵Na+、K+离子含量的影响第47-48页
        2.2.7 盐胁迫对海滨锦葵叶片丙二醛含量及相对电导率的影响第48-49页
        2.2.8 盐胁迫对海滨锦葵抗氧化酶活性的影响第49-51页
    2.3 讨论第51-55页
        2.3.1 盐胁迫对海滨锦葵幼苗生长的影响第51页
        2.3.2 盐胁迫对海滨锦葵幼苗叶绿素含量、光合特性及叶绿素荧光参数的影响第51-53页
        2.3.3 盐胁迫对海滨锦葵幼苗渗透调节物质的影响第53-54页
        2.3.4 盐胁迫对海滨锦葵幼苗膜系统的影响第54页
        2.3.5 盐胁迫对海滨锦葵幼苗抗氧化酶的影响第54-55页
        2.3.6 盐胁迫对海滨锦葵幼苗Na+、K+离子含量的影响第55页
    2.4 本章小结第55-57页
3 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的克隆与表达分析第57-76页
    3.1 材料与方法第57-66页
        3.1.1 植物材料及培养第57页
        3.1.2 菌株及质粒载体第57-58页
        3.1.3 主要试剂及仪器第58页
        3.1.4 海滨锦葵总RNA提取第58-59页
        3.1.5 海滨锦葵c DNA第一链的合成及RACE模板的制备第59-60页
        3.1.6 引物设计第60页
        3.1.7 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因c DNA序列的克隆第60-61页
        3.1.8 目的DNA片段的回收第61-62页
        3.1.9 目的DNA与克隆载体的连接第62页
        3.1.10 大肠杆菌感受态的制备及转化第62-63页
        3.1.11 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因c DNA全长序列的获得和分析第63-64页
        3.1.12 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的表达分析第64-66页
    3.2 结果与分析第66-73页
        3.2.1 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的核苷酸序列分析第66-67页
        3.2.2 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的氨基酸序列分析第67-71页
        3.2.3 盐胁迫对海滨锦葵脯氨酸积累的影响第71-72页
        3.2.4 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的表达分析第72-73页
    3.3 讨论第73-75页
        3.3.1 盐胁迫促进海滨锦葵幼苗中的脯氨酸积累第73页
        3.3.2 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的克隆与分析第73-74页
        3.3.3 盐胁迫条件下海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的表达模式第74-75页
    3.4 本章小结第75-76页
4 海滨锦葵Kv P5CS基因表达载体的构建及转基因研究第76-93页
    4.1 材料与方法第76-82页
        4.1.1 植物材料、菌株及质粒载体第76页
        4.1.2 主要试剂及仪器第76-77页
        4.1.3 海滨锦葵总RNA提取第77页
        4.1.4 海滨锦葵c DNA第一链的合成第77页
        4.1.5 Kv P5CS基因的扩增与克隆载体构建第77页
        4.1.6 植物表达载体p BI121-P5CS的构建第77-79页
        4.1.7 表达载体p BI121-Kv P5CS转化农杆菌LBA4404感受态细胞第79-80页
        4.1.8 根癌农杆菌介导的烟草转化(叶盘法)第80页
        4.1.9 转基因烟草的基因组DNA鉴定第80-81页
        4.1.10 转基因烟草的RT-PCR分析第81页
        4.1.11 转基因烟草T0代的荧光定量分析第81页
        4.1.12 转基因烟草T1代的遗传分析第81页
        4.1.13 转基因烟草T1代的耐盐性分析第81-82页
    4.2 结果与分析第82-91页
        4.2.1 重组表达载体p BI121-Kv P5CS的构建及鉴定第82-84页
        4.2.2 重组表达载体p BI121-Kv P5CS转化农杆菌LBA4404第84页
        4.2.3 转Kv P5CS基因T0代烟草的获得与鉴定第84-86页
        4.2.4 转Kv P5CS基因T0代烟草的荧光定量检测第86页
        4.2.5 转基因烟草T1代的遗传稳定性分析第86-87页
        4.2.6 转基因烟草T1代的耐盐性分析第87-91页
    4.3 讨论第91页
    4.4 本章小结第91-93页
5 结论与展望第93-96页
    5.1 本研究的主要结论第93-94页
    5.2 本研究的创新点第94页
    5.3 研究展望第94-96页
参考文献第96-116页
附录第116-127页
作者简介第127-128页
攻读学位期间发表的学术论文目录第128页

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