致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
符号说明 | 第13-16页 |
1 绪论 | 第16-37页 |
1.1 研究背景 | 第16页 |
1.2 盐胁迫对植物的影响 | 第16-18页 |
1.2.1 渗透胁迫 | 第17页 |
1.2.2 离子毒害 | 第17页 |
1.2.3 氧化胁迫 | 第17-18页 |
1.3 植物对盐胁迫的生理响应机制 | 第18-26页 |
1.3.1 植物避盐的机理 | 第18-19页 |
1.3.2 植物耐盐的机理 | 第19-26页 |
1.4 植物耐盐相关基因的研究进展 | 第26-32页 |
1.4.1 渗透调节物质合成相关基因 | 第26-30页 |
1.4.2 离子转运和区域化相关基因 | 第30-31页 |
1.4.3 抗氧化酶相关基因 | 第31-32页 |
1.4.4 信号传导及转录调控相关基因 | 第32页 |
1.4.5 植物耐盐基因工程展望 | 第32页 |
1.5 耐盐植物海滨锦葵研究进展 | 第32-35页 |
1.5.1 生物学特性 | 第33页 |
1.5.2 营养成分及利用价值 | 第33-34页 |
1.5.3 耐盐特性研究现状 | 第34-35页 |
1.6 本研究的目的意义及技术路线 | 第35-37页 |
1.6.1 研究意义和内容 | 第35-36页 |
1.6.2 技术路线 | 第36-37页 |
2 海滨锦葵耐盐的生理生化特性研究 | 第37-57页 |
2.1 材料与方法 | 第37-41页 |
2.1.1 试验材料 | 第37页 |
2.1.2 幼苗培养和胁迫处理 | 第37-38页 |
2.1.3 叶绿素含量的测定 | 第38页 |
2.1.4 叶片光合参数和叶绿素荧光参数的测定 | 第38-39页 |
2.1.5 脯氨酸含量的测定 | 第39页 |
2.1.6 Na+、K+离子含量的测定 | 第39页 |
2.1.7 丙二醛含量的测定 | 第39页 |
2.1.8 相对电导率的测定 | 第39-40页 |
2.1.9 抗氧化酶活性的测定 | 第40-41页 |
2.1.10 数据分析 | 第41页 |
2.2 结果与分析 | 第41-51页 |
2.2.1 盐胁迫对海滨锦葵生长参数的影响 | 第41-44页 |
2.2.2 盐胁迫对海滨锦葵叶绿素含量的影响 | 第44页 |
2.2.3 盐胁迫对海滨锦葵叶片光合参数的影响 | 第44-45页 |
2.2.4 盐胁迫对海滨锦葵叶片叶绿素荧光参数的影响 | 第45-46页 |
2.2.5 盐胁迫对海滨锦葵叶片脯氨酸含量的影响 | 第46-47页 |
2.2.6 盐胁迫对海滨锦葵Na+、K+离子含量的影响 | 第47-48页 |
2.2.7 盐胁迫对海滨锦葵叶片丙二醛含量及相对电导率的影响 | 第48-49页 |
2.2.8 盐胁迫对海滨锦葵抗氧化酶活性的影响 | 第49-51页 |
2.3 讨论 | 第51-55页 |
2.3.1 盐胁迫对海滨锦葵幼苗生长的影响 | 第51页 |
2.3.2 盐胁迫对海滨锦葵幼苗叶绿素含量、光合特性及叶绿素荧光参数的影响 | 第51-53页 |
2.3.3 盐胁迫对海滨锦葵幼苗渗透调节物质的影响 | 第53-54页 |
2.3.4 盐胁迫对海滨锦葵幼苗膜系统的影响 | 第54页 |
2.3.5 盐胁迫对海滨锦葵幼苗抗氧化酶的影响 | 第54-55页 |
2.3.6 盐胁迫对海滨锦葵幼苗Na+、K+离子含量的影响 | 第55页 |
2.4 本章小结 | 第55-57页 |
3 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的克隆与表达分析 | 第57-76页 |
3.1 材料与方法 | 第57-66页 |
3.1.1 植物材料及培养 | 第57页 |
3.1.2 菌株及质粒载体 | 第57-58页 |
3.1.3 主要试剂及仪器 | 第58页 |
3.1.4 海滨锦葵总RNA提取 | 第58-59页 |
3.1.5 海滨锦葵c DNA第一链的合成及RACE模板的制备 | 第59-60页 |
3.1.6 引物设计 | 第60页 |
3.1.7 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因c DNA序列的克隆 | 第60-61页 |
3.1.8 目的DNA片段的回收 | 第61-62页 |
3.1.9 目的DNA与克隆载体的连接 | 第62页 |
3.1.10 大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第62-63页 |
3.1.11 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因c DNA全长序列的获得和分析 | 第63-64页 |
3.1.12 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的表达分析 | 第64-66页 |
3.2 结果与分析 | 第66-73页 |
3.2.1 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的核苷酸序列分析 | 第66-67页 |
3.2.2 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的氨基酸序列分析 | 第67-71页 |
3.2.3 盐胁迫对海滨锦葵脯氨酸积累的影响 | 第71-72页 |
3.2.4 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的表达分析 | 第72-73页 |
3.3 讨论 | 第73-75页 |
3.3.1 盐胁迫促进海滨锦葵幼苗中的脯氨酸积累 | 第73页 |
3.3.2 海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的克隆与分析 | 第73-74页 |
3.3.3 盐胁迫条件下海滨锦葵脯氨酸代谢相关基因的表达模式 | 第74-75页 |
3.4 本章小结 | 第75-76页 |
4 海滨锦葵Kv P5CS基因表达载体的构建及转基因研究 | 第76-93页 |
4.1 材料与方法 | 第76-82页 |
4.1.1 植物材料、菌株及质粒载体 | 第76页 |
4.1.2 主要试剂及仪器 | 第76-77页 |
4.1.3 海滨锦葵总RNA提取 | 第77页 |
4.1.4 海滨锦葵c DNA第一链的合成 | 第77页 |
4.1.5 Kv P5CS基因的扩增与克隆载体构建 | 第77页 |
4.1.6 植物表达载体p BI121-P5CS的构建 | 第77-79页 |
4.1.7 表达载体p BI121-Kv P5CS转化农杆菌LBA4404感受态细胞 | 第79-80页 |
4.1.8 根癌农杆菌介导的烟草转化(叶盘法) | 第80页 |
4.1.9 转基因烟草的基因组DNA鉴定 | 第80-81页 |
4.1.10 转基因烟草的RT-PCR分析 | 第81页 |
4.1.11 转基因烟草T0代的荧光定量分析 | 第81页 |
4.1.12 转基因烟草T1代的遗传分析 | 第81页 |
4.1.13 转基因烟草T1代的耐盐性分析 | 第81-82页 |
4.2 结果与分析 | 第82-91页 |
4.2.1 重组表达载体p BI121-Kv P5CS的构建及鉴定 | 第82-84页 |
4.2.2 重组表达载体p BI121-Kv P5CS转化农杆菌LBA4404 | 第84页 |
4.2.3 转Kv P5CS基因T0代烟草的获得与鉴定 | 第84-86页 |
4.2.4 转Kv P5CS基因T0代烟草的荧光定量检测 | 第86页 |
4.2.5 转基因烟草T1代的遗传稳定性分析 | 第86-87页 |
4.2.6 转基因烟草T1代的耐盐性分析 | 第87-91页 |
4.3 讨论 | 第91页 |
4.4 本章小结 | 第91-93页 |
5 结论与展望 | 第93-96页 |
5.1 本研究的主要结论 | 第93-94页 |
5.2 本研究的创新点 | 第94页 |
5.3 研究展望 | 第94-96页 |
参考文献 | 第96-116页 |
附录 | 第116-127页 |
作者简介 | 第127-128页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第128页 |