| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 前言(综述) | 第8-23页 |
| 1.1 拟南芥油菜素甾醇的生物学功能 | 第8-11页 |
| 1.1.1 油菜素甾醇与光信号的关系 | 第8页 |
| 1.1.2 油菜素甾醇与生长发育的关系 | 第8-10页 |
| 1.1.3 油菜素甾醇与生物胁迫和非生物胁迫的关系 | 第10-11页 |
| 1.2 拟南芥油菜素甾醇的信号通路 | 第11-13页 |
| 1.3 GSK3的概述 | 第13-16页 |
| 1.3.1 拟南芥GSK3参与多种生物学过程 | 第13-14页 |
| 1.3.2 拟南芥GSK3在功能上存在着冗余性和特异性 | 第14-15页 |
| 1.3.3 拟南芥GSK3与逆境胁迫有着很密切的关系 | 第15-16页 |
| 1.3.4 拟南芥GSK3与脱落酸信号的关系 | 第16页 |
| 1.4 脱落酸 | 第16-18页 |
| 1.4.1 脱落酸与植株逆境响应的关系 | 第16页 |
| 1.4.2 脱落酸与植物生长发育的关系 | 第16-17页 |
| 1.4.3 脱落酸与生物胁迫的关系 | 第17页 |
| 1.4.4 脱落酸与表观遗传的关系 | 第17-18页 |
| 1.5 脱落酸信号通路 | 第18-19页 |
| 1.6 SnRK2亚家族Ⅲ的成员的激活 | 第19-21页 |
| 1.7 脱落酸信号和油菜素甾醇通路的相互作用 | 第21-22页 |
| 1.8 研究思路和技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 材料和方法 | 第23-45页 |
| 2.1 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23-24页 |
| 2.1.2 菌株 | 第24页 |
| 2.1.3 载体 | 第24-25页 |
| 2.1.4 试剂盒 | 第25页 |
| 2.1.5 主要化学试剂 | 第25页 |
| 2.2 方法 | 第25-45页 |
| 2.2.1 拟南芥总RNA提取方法 | 第25-26页 |
| 2.2.2 cDNA第一链的合成 | 第26-27页 |
| 2.2.3 拟南芥在土上的培养条件 | 第27页 |
| 2.2.4 拟南芥在培养基上的培养条件 | 第27页 |
| 2.2.5 脱落酸对主根伸长的抑制实验 | 第27-28页 |
| 2.2.6 脱落酸对萌发率的影响 | 第28页 |
| 2.2.7 Bikinin对脱落酸诱导的下游基因的影响 | 第28页 |
| 2.2.8 烟草的生长条件 | 第28-29页 |
| 2.2.9 瞬时表达 | 第29页 |
| 2.2.10 KOD酶扩增基因 | 第29-30页 |
| 2.2.11 DNA凝胶回收 | 第30页 |
| 2.2.12 酶切 | 第30页 |
| 2.2.13 连接 | 第30-31页 |
| 2.2.14 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
| 2.2.15 转化大肠杆菌细胞 | 第31页 |
| 2.2.16 菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第31-32页 |
| 2.2.17 质粒抽提 | 第32页 |
| 2.2.18 菌种保存 | 第32-33页 |
| 2.2.19 重组蛋白质的诱导表达 | 第33页 |
| 2.2.20 蛋白质纯化 | 第33-34页 |
| 2.2.21 活性植物蛋白质的提取 | 第34-35页 |
| 2.2.22 GST pull down/半体内pull down | 第35页 |
| 2.2.23 放射自显影检测体外磷酸化反应 | 第35-36页 |
| 2.2.24 BES1的体外磷酸化反应 | 第36-37页 |
| 2.2.25 免疫沉淀(FLAG beads) | 第37页 |
| 2.2.26 免疫沉淀(MYC beads) | 第37页 |
| 2.2.27 免疫激酶反应(Immuno Kinase Assay) | 第37-38页 |
| 2.2.28 胶内磷酸化反应(In-gel Kinase Assay) | 第38-39页 |
| 2.2.29 Western Blot | 第39-41页 |
| 2.2.30 农杆菌感受态制备 | 第41页 |
| 2.2.31 农杆菌电击转化 | 第41-42页 |
| 2.2.32 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第42页 |
| 2.2.33 质谱样品制备及磷酸化肽段的富集 | 第42-43页 |
| 2.2.34 Nanoflow LC-ESI-MS/MS | 第43页 |
| 2.2.35 质谱数据分析 | 第43-44页 |
| 2.2.36 SnRK2 RNAi材料的获得 | 第44-45页 |
| 第三章 结果 | 第45-79页 |
| 3.1 质谱鉴定到SnRK2.2是BIN2的潜在的相互作用蛋白质 | 第45-46页 |
| 3.2 验证BIN2与亚家族Ⅲ SnRK2s之间的相互作用 | 第46-48页 |
| 3.3 BIN2能磷酸化SnRK2.2与SnRK2.3,不能够磷酸化SnRK2.6 | 第48-49页 |
| 3.4 SnRK2s在体外不能磷酸化BIN2,也不影响BIN2对BES1的磷酸化 | 第49-51页 |
| 3.5 BIN2在脱落酸信号通路中起着正向调节的作用 | 第51-61页 |
| 3.6 BIN2磷酸化SnRK2.2和SnRK2.3并增强它们的激酶活性 | 第61-71页 |
| 3.7 BIN2在ABA信号中的正向调节作用依赖于亚家族Ⅲ SnRK2 | 第71-79页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第79-87页 |
| 4.1 讨论 | 第79-85页 |
| 4.1.1 拟南芥GSK3在脱落酸(ABA)信号传递中起着正向调节的作用 | 第79页 |
| 4.1.2 GSK3参与SnRK2.2和SnRK2.3的激活,并连接ABA信号和一些非生物胁迫信号 | 第79-80页 |
| 4.1.3 油菜素甾醇信号和脱落酸(ABA)信号之间存在着复杂的相互调控方式 | 第80-83页 |
| 4.1.4 BIN2通过磷酸化SnRK2.3 T180位点来反式激活SnRK2.3 | 第83-85页 |
| 4.2 结论与展望 | 第85-87页 |
| 4.2.1 研究特色与创新之处 | 第85页 |
| 4.2.2 结论 | 第85-86页 |
| 4.2.3 展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-103页 |
| 附录一：引物 | 第103-105页 |
| 附录二：常用试剂配方 | 第105-109页 |
| 缩略词表 | 第109-112页 |
| 参加学术会议 | 第112页 |
| 其它说明 | 第112-113页 |
| 在读期间发表论文 | 第113页 |
| 奖惩情况 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-116页 |
