摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第11-21页 |
1.1 微生物降解环境污染物尼古丁的研究进展 | 第11-15页 |
1.1.1 尼古丁的危害 | 第11-13页 |
1.1.2 尼古丁的微生物代谢途径 | 第13-15页 |
1.2 微生物代谢尼古丁途径中钼酶的研究进展 | 第15-17页 |
1.2.1 节杆菌吡啶途径中钼酶 | 第15-16页 |
1.2.2 假单胞菌吡咯途径中钼酶 | 第16-17页 |
1.3 微生物钼辅因子合成的研究进展 | 第17-19页 |
1.4 微生物钼酸盐转运途径的研究进展 | 第19-21页 |
第二章 菌株S16尼古丁代谢途径钼辅因子相关基因的挖掘 | 第21-36页 |
2.1 引言 | 第21页 |
2.2 材料与方法 | 第21-29页 |
2.2.1 实验材料 | 第21-24页 |
2.2.2 实验方法 | 第24-29页 |
2.3 结果与讨论 | 第29-35页 |
2.3.1 原宿主中Spm蛋白的表达检测 | 第29-30页 |
2.3.2 多个候选基因的敲除结果 | 第30-32页 |
2.3.3 敲除株的生长状态与功能初筛 | 第32-35页 |
2.4 本章总结 | 第35-36页 |
第三章 3-琥珀酰吡啶转化有关基因的转录水平分析 | 第36-50页 |
3.1 引言 | 第36页 |
3.2 材料与方法 | 第36-42页 |
3.2.1 实验材料 | 第36-38页 |
3.2.2 实验方法 | 第38-42页 |
3.3 结果与讨论 | 第42-49页 |
3.3.1 MoaE(pps_4397)氨基酸序列分析结果 | 第42-44页 |
3.3.2 总RNA提取结果 | 第44-45页 |
3.3.3 引物最适温度确定及扩增效率检测 | 第45-48页 |
3.3.4 RT-qPCR结果 | 第48-49页 |
3.4 本章小结 | 第49-50页 |
第四章 尼古丁代谢途径中钼蝶呤合成酶功能研究 | 第50-69页 |
4.1 引言 | 第50页 |
4.2 材料与方法 | 第50-54页 |
4.2.1 实验材料 | 第50-52页 |
4.2.2 实验方法 | 第52-54页 |
4.3 结果与讨论 | 第54-68页 |
4.3.1 回补株S16dmoaE(pME6032-moaE)的构建 | 第54-55页 |
4.3.2 敲除株S16dmoaE及其回补株的生长情况 | 第55-58页 |
4.3.3 制作尼古丁与SP浓度-峰面积标准曲线 | 第58-61页 |
4.3.4 HPLC检测休止细胞降解尼古丁 | 第61-65页 |
4.3.5 回补突变株验证MoaE的关键位点 | 第65-68页 |
4.4 本章总结 | 第68-69页 |
第五章 钼酸盐转运基因的初步研究 | 第69-79页 |
5.1 引言 | 第69页 |
5.2 材料与方法 | 第69-72页 |
5.2.1 实验材料 | 第69-70页 |
5.2.2 实验方法 | 第70-72页 |
5.3 结果与讨论 | 第72-78页 |
5.3.1 敲除株S16dpps_3311的生长情况 | 第72-75页 |
5.3.2 S16dpps_3311不同条件休止细胞反应比较 | 第75-76页 |
5.3.3 ICP-MS结果分析 | 第76-78页 |
5.4 本章总结 | 第78-79页 |
结论与展望 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
攻读硕士研究生期间发表论文 | 第88页 |