| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 缩写词表 | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-18页 |
| 1. 副溶血性弧菌简介 | 第11-16页 |
| ·副溶血性弧菌的危害 | 第11页 |
| ·副溶血性弧菌的鞭毛系统 | 第11-14页 |
| ·鞭毛系统的基因组 | 第11-13页 |
| ·极性鞭毛的结构和组装 | 第13-14页 |
| ·副溶血性弧菌鞭毛的功能 | 第14页 |
| ·副溶血性弧菌的检测方法 | 第14-16页 |
| ·传统检测方法 | 第14-15页 |
| ·PCR检测法 | 第15页 |
| ·基因芯片 | 第15页 |
| ·免疫分析检测 | 第15-16页 |
| 2. 本实验的目的和意义 | 第16-18页 |
| 第二章.副溶血性弧菌flaE基因的克隆及表达载体的构建 | 第18-31页 |
| 1 材料与方法 | 第18-23页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·菌株与质粒 | 第18页 |
| ·主要实验材料 | 第18页 |
| ·主要试剂和培养基 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-23页 |
| ·引物设计与合成 | 第19页 |
| ·PCR扩增 | 第19页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第19页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第19-20页 |
| ·目的片段和克隆载体的连接 | 第20页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH5a | 第20-21页 |
| ·克隆重组子的鉴定 | 第21-22页 |
| ·表达系统的构建 | 第22-23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-30页 |
| ·副溶血性弧菌flaE基因的PCR扩增 | 第23-25页 |
| ·克隆载体的构建及鉴定 | 第25-27页 |
| ·目的片段的序列分析 | 第27-29页 |
| ·表达载体的构建 | 第29-30页 |
| 4. 本章小结 | 第30-31页 |
| 第三章 副溶血性弧菌flaE基因的原核表达、蛋白纯化及其多克隆抗体的制备 | 第31-44页 |
| 1. 材料与方法 | 第31-37页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·菌株与质粒 | 第31页 |
| ·主要实验材料 | 第31页 |
| ·主要实验试剂 | 第31-32页 |
| ·主要设备 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-37页 |
| ·蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·纯化蛋白的含量测定 | 第34-35页 |
| ·FlaE蛋白多克隆抗血清制备 | 第35-36页 |
| ·ELISA检测 | 第36-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-43页 |
| ·大肠杆菌BL21(DE3)中融合蛋白的表达 | 第37-38页 |
| ·融合蛋白的表达形式 | 第38页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第38-39页 |
| ·纯化蛋白的定量 | 第39-40页 |
| ·多克隆抗血清制备及效价测定 | 第40-43页 |
| 4. 本章小结 | 第43-44页 |
| 结果与展望 | 第44-46页 |
| 1. 本实验的主要结论 | 第44页 |
| 2. 本研究主要创新点 | 第44-45页 |
| 3. 展望 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50页 |