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三角褐指藻叶绿体定点整合表达载体的构建及遗传转化

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
目录第6-9页
1 前言第9-28页
   ·植物叶绿体基因组第9-13页
     ·叶绿体基因组的结构特征第9-10页
     ·叶绿体基因组DNA编码的基因第10-11页
     ·叶绿体基因的表达调控第11-13页
   ·叶绿体转化技术的研究第13-25页
     ·叶绿体技术的建立与发展第13-14页
     ·叶绿体基因组转化的原理第14-15页
     ·叶绿体基因组转化的优势第15-17页
     ·叶绿体基因组转化的方法第17-20页
     ·叶绿体基因组转化的筛选标记第20-24页
     ·叶绿体基因组转化的应用第24-25页
   ·三角褐指藻的研究现状第25-26页
     ·海洋硅藻的起源、繁殖方式及生态作用第25-26页
     ·三角褐指藻的形态特征、繁殖方式及研究价值第26页
   ·本研究的目的及意义第26-27页
   ·本研究的创新点第27-28页
2 三角褐指藻叶绿体基因组定点整合表达载体的构建第28-53页
   ·材料与方法第28-32页
     ·实验藻种第28页
     ·主要试剂第28-29页
     ·主要实验仪器第29-30页
     ·培养基的配制第30-31页
     ·其他试剂的配制第31-32页
   ·实验方法第32-43页
     ·藻的培养第32页
     ·三角褐指藻总DNA的提取第32-33页
     ·叶绿体同源重组片段的扩增和克隆第33-37页
     ·氯霉素乙酰转移酶基因(CAT)表达盒的扩增第37-38页
     ·绿色荧光蛋白基因基因(GFP)表达盒的扩增第38-39页
     ·三角褐指藻叶绿体基因组定点整合表达载体pPtC-GFP的构建第39-43页
   ·结果与分析第43-50页
     ·同源重组片段rns-trnI的扩增和克隆第43页
     ·同源重组片段trnA-rn1的扩增和克隆第43-44页
     ·氯霉素乙酰转移酶基因(CAT)表达盒的扩增和克隆第44-45页
     ·绿色荧光蛋白基因(GFP)表达盒的扩增和克隆第45页
     ·三角褐指藻叶绿体基因组定点整合表达载体pPtC-GFP的构建第45-50页
   ·讨论第50-53页
3 电穿孔技术转化三角褐指藻第53-63页
   ·实验材料第53-54页
     ·藻种及质粒第53页
     ·主要实验试剂第53页
     ·主要培养基和试剂的配制第53-54页
     ·主要实验仪器第54页
   ·实验方法第54-56页
     ·电穿孔法转化三角褐指藻第54页
     ·氯霉素筛选阳性藻株并扩大培养第54-55页
     ·激光共聚焦扫描显微镜观察第55页
     ·氯霉素乙酰转移酶(CAT)基因表达盒在阳性藻株中的扩增第55-56页
   ·结果与分析第56-60页
     ·阳性藻株经过氯霉素筛选后的生长状况第56-57页
     ·激光扫描共聚焦显微镜检测三角褐指藻细胞GFP基因表达第57-59页
     ·阳性藻株中氯霉素乙酰转移酶(CAT)基因表达盒的扩增第59-60页
   ·讨论第60-63页
参考文献第63-73页
在校期间发表论文第73-74页
致谢第74页

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