摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 小麦遗传转化 | 第11-13页 |
1.1.1 基因枪法 | 第11-12页 |
1.1.2 农杆菌介导法 | 第12-13页 |
1.2 影响转化的因素 | 第13-14页 |
1.2.1 外植体的选择 | 第13页 |
1.2.2 组织培养条件 | 第13-14页 |
1.3 筛选标记基因 | 第14-15页 |
1.3.1 草丁膦N-乙酰转移酶基因 | 第14页 |
1.3.2 磷酸甘露糖异构酶基因 | 第14-15页 |
1.4 高光效相关基因 | 第15-16页 |
1.5 抗赤霉病相关基因 | 第16-18页 |
1.5.1 抗菌肽 | 第16页 |
1.5.2 病程相关蛋白基因 | 第16-17页 |
1.5.3 靶基因RNAi片段 | 第17页 |
1.5.4 抗体融合蛋白 | 第17-18页 |
1.6 多基因共转化及最小表达框 | 第18页 |
1.7 启动子的选择 | 第18-19页 |
1.8 研究目的及意义 | 第19-21页 |
2 实验材料与方法 | 第21-31页 |
2.1 实验材料 | 第21-24页 |
2.1.1 实验主要仪器设备 | 第21页 |
2.1.2 受体材料及菌株 | 第21页 |
2.1.3 菌株培养所用培养基 | 第21页 |
2.1.4 相关试剂及配制 | 第21-22页 |
2.1.5 PCR及RT-PCR试剂 | 第22页 |
2.1.6 试剂盒和限制性内切酶 | 第22页 |
2.1.7 赤霉病接种和鉴定相关培养基配制 | 第22页 |
2.1.8 引物 | 第22-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-30页 |
2.2.1 转化片段的制备 | 第24-25页 |
2.2.2 转化受体的制备 | 第25页 |
2.2.3 DNA包被 | 第25-26页 |
2.2.4 基因枪轰击、愈伤组织的再生及筛选 | 第26-27页 |
2.2.5 转基因小麦叶片DNA的提取 | 第27页 |
2.2.6 转基因小麦的PCR鉴定 | 第27-28页 |
2.2.7 转基因小麦的RT-PCR鉴定 | 第28-29页 |
2.2.8 田间赤霉病抗性鉴定 | 第29-30页 |
2.2.9 小麦田间产量鉴定 | 第30页 |
2.3 统计分析 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-50页 |
3.1 最小表达框的制备 | 第31页 |
3.2 Bar为筛选标记基因的转基因小麦 | 第31-45页 |
3.2.1 基因枪介导的小麦遗传转化和抗性植株的获得 | 第31-32页 |
3.2.2 转DEF和UECH42基因的高世代材料 | 第32-39页 |
3.2.3 转DEF和UECH42基因的低世代材料 | 第39-41页 |
3.2.4 襄麦76转CMPS-DEF基因的鉴定 | 第41-43页 |
3.2.5 襄麦76转BLF和HVCHI基因的鉴定 | 第43-45页 |
3.3 Pmi为筛选标记基因的转基因小麦 | 第45-50页 |
3.3.1 基因枪介导的小麦遗传转化和抗性植株的获得 | 第45-46页 |
3.3.2 襄麦76转BLF和HVCHI基因的鉴定 | 第46-47页 |
3.3.3 襄麦76转CHS3b和CYP51基因的鉴定 | 第47-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
4.1 启动子 | 第50-51页 |
4.2 最小表达框转化技术 | 第51页 |
4.3 转基因植株的遗传多样性 | 第51-52页 |
4.4 转基因植株的表型分析 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-62页 |
致谢 | 第62页 |