摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 绪论 | 第12-29页 |
·概述 | 第12-13页 |
·结核病致病机理与机体免疫 | 第13-15页 |
·结核病致病机理 | 第13-14页 |
·机体免疫机制 | 第14-15页 |
·结核疫苗研究进展 | 第15-17页 |
·基因治疗研究概况 | 第17-20页 |
·基因治疗策略与途径 | 第17-18页 |
·基因治疗的基本步骤与载体 | 第18-19页 |
·基因治疗存在的缺陷与发展前景 | 第19-20页 |
·RAN干扰技术在结核病中的应用 | 第20-23页 |
·腺相关病毒(AAV) | 第23-26页 |
·AAV Helper free 系统 | 第24-25页 |
·rAAV在基因治疗中的应用与前景 | 第25-26页 |
·本论文的研究意义及技术路线 | 第26-29页 |
·本论文的研究意义 | 第26-27页 |
·本论文的技术路线 | 第27-29页 |
第二章 PAAV-SIMCL-1-PVAE与PAAV-SIEGFP-EGFP重组病毒载体构建 | 第29-49页 |
·实验材料 | 第29-33页 |
·质粒和菌株 | 第29页 |
·主要药品与试剂 | 第29-30页 |
·主要设备与仪器 | 第30-31页 |
·溶液配制 | 第31-33页 |
·实验方法 | 第33-43页 |
·pAAV-siMcl-1-pVAE的构建 | 第33-39页 |
·pAAV-siEGFP-EGFP的构建 | 第39-43页 |
·结果与讨论 | 第43-48页 |
·重组腺相关病毒载体的电泳鉴定 | 第43-44页 |
·重组腺相关病毒载体的PCR鉴定 | 第44-47页 |
·重组腺相关病毒载体的测序结果 | 第47-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
第三章 重组腺相关病毒的组装 | 第49-61页 |
·实验材料 | 第49-51页 |
·质粒和细胞 | 第49页 |
·主要药品与耗材 | 第49页 |
·主要设备与仪器 | 第49-50页 |
·溶液配制 | 第50-51页 |
·实验方法 | 第51-54页 |
·质粒的大量制备 | 第51-52页 |
·细胞的培养 | 第52-53页 |
·重组病毒的组装 | 第53-54页 |
·重组病毒的收集 | 第54页 |
·结果与讨论 | 第54-60页 |
·质粒大量提取的电泳鉴定 | 第54-57页 |
·AAV-293 细胞生长曲线的测定 | 第57-58页 |
·重组病毒的组装结果 | 第58-60页 |
·小结 | 第60-61页 |
第四章 重组腺相关病毒的滴度测定以及病毒介导的外源基因表达 | 第61-66页 |
·实验材料 | 第61-62页 |
·细胞 | 第61页 |
·主要试剂与耗材 | 第61页 |
·主要设备与仪器 | 第61页 |
·溶液配制 | 第61-62页 |
·实验方法 | 第62-63页 |
·细胞的培养 | 第62页 |
·重组病毒的浓缩 | 第62页 |
·病毒介导的外源基因表达检测 | 第62-63页 |
·结果与讨论 | 第63-65页 |
·荧光显微镜检测外源基因在宿主细胞内的表达 | 第63-64页 |
·重组腺相关病毒的滴度检测 | 第64-65页 |
·小结 | 第65-66页 |
结论与展望 | 第66-67页 |
结论 | 第66页 |
展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-70页 |
附录 | 第70-72页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
附件 | 第74页 |