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膜反向斑点杂交技术在结核分枝杆菌耐药突变株检测领域的应用

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-7页
缩写词表第7-11页
第一章 绪论第11-26页
   ·结核分枝杆菌耐药的分子机制第11-17页
     ·结核病现状及结核分枝杆菌耐药性第11-13页
     ·结核分枝杆菌耐药的分子机制第13-15页
     ·结核分枝杆菌耐利福平的分子机制第15-16页
     ·结核分枝杆菌耐异烟肼的分子机制第16-17页
   ·结核分枝杆菌耐药性检测方法的近况第17-24页
     ·常规药敏试验方法第18页
     ·BACTEC 液体培养基法第18-19页
     ·噬菌体生物扩增法(Phage amplified biologically assay,PhaB)第19-20页
     ·DNA 测序法第20-21页
     ·基因芯片法第21页
     ·反向杂交技术第21-24页
   ·本论文的研究意义及技术路线第24-26页
     ·本论文的研究意义第24-25页
     ·本论文的技术路线第25-26页
第二章 膜反向斑点杂交技术检测结核耐药性条件的优化第26-41页
   ·实验材料第26-31页
     ·质粒和菌株第26页
     ·主要药品与试剂第26-27页
     ·主要设备与仪器第27-28页
     ·溶液的配制第28-31页
   ·实验方法第31-34页
     ·质粒的提取第31页
     ·PCR 扩增第31-32页
     ·膜反向斑点杂交过程第32-33页
     ·探针的优化与设计第33页
     ·探针浓度的优化第33页
     ·最适杂交温度的优化第33-34页
     ·杂交时间的优化第34页
     ·洗膜温度的优化第34页
     ·杂交液盐浓度的优化第34页
     ·生物素标记的扩增产物浓度对杂交结果的影响第34页
   ·结果与讨论第34-40页
     ·质粒的电泳鉴定结果第34-35页
     ·PCR 扩增结果第35-36页
     ·探针的优化与设计结果第36页
     ·探针浓度的优化结果第36-37页
     ·最适杂交温度的优化结果第37-38页
     ·杂交时间的优化结果第38页
     ·洗膜温度的优化结果第38-39页
     ·杂交液盐浓度的优化结果第39-40页
   ·小结第40-41页
第三章 膜反向斑点杂交检测结核的耐药性第41-53页
   ·实验材料第41-46页
     ·质粒和菌株第41页
     ·主要药品与试剂第41-42页
     ·主要设备与仪器第42页
     ·溶液配制第42-46页
   ·实验方法第46-48页
     ·引物及寡核苷酸探针的设计与膜的制备第46页
     ·质粒的提取第46-47页
     ·PCR 扩增第47页
     ·膜反向斑点杂交过程第47-48页
   ·实验结果与讨论第48-52页
     ·引物和寡核苷酸探针的设计结果第48页
     ·质粒的电泳鉴定结果第48-49页
     ·PCR 扩增结果第49页
     ·katG 基因引物的PCR 扩增敏感性结果第49-50页
     ·katG 基因PCR-膜反向斑点杂交探针敏感性结果第50-51页
     ·膜反斑点杂检测耐药结核分枝杆菌结果第51-52页
   ·小结第52-53页
结论与展望第53-55页
 结论第53页
 展望第53-55页
参考文献第55-59页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第59-60页
致谢第60-61页
答辩委员会对论文的评定意见第61页

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