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微流控技术制备siRNA纳米载体的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
第一章 绪论第13-24页
    1.1 基因治疗概述第13-14页
    1.2 RNAi技术及应用第14-15页
        1.2.1 si RNA的传递系统第15页
    1.3 脂质体纳米粒概述第15-18页
        1.3.1 阳离子脂质体第16-17页
        1.3.2 长循环脂质体第17-18页
    1.4 聚乙烯亚氨第18-19页
    1.5 微流控芯片技术第19-22页
        1.5.1 微流控芯片技术的基本概念第19页
        1.5.2 微流控芯片技术的发展历程第19-20页
        1.5.3 微流控芯片技术在生物学领域的应用第20-21页
        1.5.4 微流控芯片国内外研究现状第21-22页
    1.6 立题依据第22-24页
第二章 P/LNPs-MF纳米粒的制备及影响因素的考察第24-39页
    2.1 仪器与材料第25-26页
        2.1.1 仪器设备第25页
        2.1.2 材料试剂第25-26页
    2.2 实验方法第26-30页
        2.2.1 乙醇注入法制备载siRNA的P/LNPs-BM纳米粒第26页
        2.2.2 微流控法制备载si RNA的P/LNPs-MF纳米粒第26-27页
        2.2.3 P/LNPs-MF处方的优化第27-28页
        2.2.4 P/LNPs-MF制备工艺的优化第28页
        2.2.5 P/LNPs-MF纳米粒包裹能力考察第28-29页
        2.2.6 P/LNPs-MF纳米粒稳定性考察第29-30页
    2.3 结果与分析第30-37页
        2.3.1 P/LNPs-MF处方的优化第30-32页
        2.3.2 P/LNPs-MF制备工艺的优化第32-34页
        2.3.3 P/LNPs-MF纳米粒包封能力的分析第34-35页
        2.3.4 P/LNPs-MF纳米粒稳定性考察第35-37页
    2.4 本章小结第37-39页
第三章 P/LNPs-MF纳米粒的体外评价第39-63页
    3.1 仪器与材料第39-40页
        3.1.1 仪器设备第39-40页
        3.1.2 材料试剂第40页
        3.1.3 细胞株第40页
    3.2 实验方法第40-45页
        3.2.1 载siRNA的P/LNPs纳米粒的制备第40-41页
        3.2.2 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的性质表征第41页
        3.2.3 细胞培养及细胞计数第41-42页
        3.2.4 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的MTT测定第42页
        3.2.5 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的转染效率测定第42-43页
        3.2.6 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的靶基因沉默效应测定第43-44页
        3.2.7 统计学分析第44-45页
    3.3 结果与分析第45-61页
        3.3.1 载siRNA的P/LNPs-MF粒径及Zeta电位的分析第45页
        3.3.2 载体安全性分析第45-47页
        3.3.3 抗肿瘤细胞效率分析第47-49页
        3.3.4 流式细胞术入胞效率分析第49-53页
        3.3.5 激光共聚焦转染效率分析第53-57页
        3.3.6 qRT-PCR分析第57-59页
        3.3.7 Western bolt检测蛋白的表达第59-61页
    3.4 本章小结第61-63页
第四章 P/LNPs-MF纳米粒的体内评价第63-78页
    4.1 仪器与材料第63-64页
        4.1.1 仪器设备第63-64页
        4.1.2 材料试剂第64页
        4.1.3 细胞株第64页
        4.1.4 实验动物第64页
    4.2 实验方法第64-67页
        4.2.1 载siRNA的P/LNPs纳米粒的制备第64-65页
        4.2.2 人肝癌HepG-2 细胞裸鼠移植瘤模型的建立第65页
        4.2.3 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的体内药代动力学研究第65-66页
        4.2.4 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的肿瘤抑制研究第66页
        4.2.5 病理切片分析第66页
        4.2.6 体内基因沉默效率考察第66-67页
    4.3 结果与分析第67-76页
        4.3.1 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的体内药代动力学研究第67-69页
        4.3.2 肿瘤体积变化趋势第69-70页
        4.3.3 瘤重第70页
        4.3.4 肝重第70-71页
        4.3.5 体重第71-72页
        4.3.6 qRT-PCR分析第72-73页
        4.3.7 Western blot分析第73页
        4.3.8 血清参数评价第73-76页
        4.3.9 病理切片分析第76页
    4.4 本章小结第76-78页
第五章 全文总结第78-80页
参考文献第80-87页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第87-89页
致谢第89页

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