摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第13-24页 |
1.1 基因治疗概述 | 第13-14页 |
1.2 RNAi技术及应用 | 第14-15页 |
1.2.1 si RNA的传递系统 | 第15页 |
1.3 脂质体纳米粒概述 | 第15-18页 |
1.3.1 阳离子脂质体 | 第16-17页 |
1.3.2 长循环脂质体 | 第17-18页 |
1.4 聚乙烯亚氨 | 第18-19页 |
1.5 微流控芯片技术 | 第19-22页 |
1.5.1 微流控芯片技术的基本概念 | 第19页 |
1.5.2 微流控芯片技术的发展历程 | 第19-20页 |
1.5.3 微流控芯片技术在生物学领域的应用 | 第20-21页 |
1.5.4 微流控芯片国内外研究现状 | 第21-22页 |
1.6 立题依据 | 第22-24页 |
第二章 P/LNPs-MF纳米粒的制备及影响因素的考察 | 第24-39页 |
2.1 仪器与材料 | 第25-26页 |
2.1.1 仪器设备 | 第25页 |
2.1.2 材料试剂 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-30页 |
2.2.1 乙醇注入法制备载siRNA的P/LNPs-BM纳米粒 | 第26页 |
2.2.2 微流控法制备载si RNA的P/LNPs-MF纳米粒 | 第26-27页 |
2.2.3 P/LNPs-MF处方的优化 | 第27-28页 |
2.2.4 P/LNPs-MF制备工艺的优化 | 第28页 |
2.2.5 P/LNPs-MF纳米粒包裹能力考察 | 第28-29页 |
2.2.6 P/LNPs-MF纳米粒稳定性考察 | 第29-30页 |
2.3 结果与分析 | 第30-37页 |
2.3.1 P/LNPs-MF处方的优化 | 第30-32页 |
2.3.2 P/LNPs-MF制备工艺的优化 | 第32-34页 |
2.3.3 P/LNPs-MF纳米粒包封能力的分析 | 第34-35页 |
2.3.4 P/LNPs-MF纳米粒稳定性考察 | 第35-37页 |
2.4 本章小结 | 第37-39页 |
第三章 P/LNPs-MF纳米粒的体外评价 | 第39-63页 |
3.1 仪器与材料 | 第39-40页 |
3.1.1 仪器设备 | 第39-40页 |
3.1.2 材料试剂 | 第40页 |
3.1.3 细胞株 | 第40页 |
3.2 实验方法 | 第40-45页 |
3.2.1 载siRNA的P/LNPs纳米粒的制备 | 第40-41页 |
3.2.2 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的性质表征 | 第41页 |
3.2.3 细胞培养及细胞计数 | 第41-42页 |
3.2.4 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的MTT测定 | 第42页 |
3.2.5 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的转染效率测定 | 第42-43页 |
3.2.6 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的靶基因沉默效应测定 | 第43-44页 |
3.2.7 统计学分析 | 第44-45页 |
3.3 结果与分析 | 第45-61页 |
3.3.1 载siRNA的P/LNPs-MF粒径及Zeta电位的分析 | 第45页 |
3.3.2 载体安全性分析 | 第45-47页 |
3.3.3 抗肿瘤细胞效率分析 | 第47-49页 |
3.3.4 流式细胞术入胞效率分析 | 第49-53页 |
3.3.5 激光共聚焦转染效率分析 | 第53-57页 |
3.3.6 qRT-PCR分析 | 第57-59页 |
3.3.7 Western bolt检测蛋白的表达 | 第59-61页 |
3.4 本章小结 | 第61-63页 |
第四章 P/LNPs-MF纳米粒的体内评价 | 第63-78页 |
4.1 仪器与材料 | 第63-64页 |
4.1.1 仪器设备 | 第63-64页 |
4.1.2 材料试剂 | 第64页 |
4.1.3 细胞株 | 第64页 |
4.1.4 实验动物 | 第64页 |
4.2 实验方法 | 第64-67页 |
4.2.1 载siRNA的P/LNPs纳米粒的制备 | 第64-65页 |
4.2.2 人肝癌HepG-2 细胞裸鼠移植瘤模型的建立 | 第65页 |
4.2.3 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的体内药代动力学研究 | 第65-66页 |
4.2.4 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的肿瘤抑制研究 | 第66页 |
4.2.5 病理切片分析 | 第66页 |
4.2.6 体内基因沉默效率考察 | 第66-67页 |
4.3 结果与分析 | 第67-76页 |
4.3.1 载siRNA的P/LNPs-MF纳米粒的体内药代动力学研究 | 第67-69页 |
4.3.2 肿瘤体积变化趋势 | 第69-70页 |
4.3.3 瘤重 | 第70页 |
4.3.4 肝重 | 第70-71页 |
4.3.5 体重 | 第71-72页 |
4.3.6 qRT-PCR分析 | 第72-73页 |
4.3.7 Western blot分析 | 第73页 |
4.3.8 血清参数评价 | 第73-76页 |
4.3.9 病理切片分析 | 第76页 |
4.4 本章小结 | 第76-78页 |
第五章 全文总结 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-87页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第87-89页 |
致谢 | 第89页 |