| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 缩略语词汇表 | 第15-17页 |
| 1 绪论 | 第17-21页 |
| 2 AH5抗肝癌活性的研究 | 第21-41页 |
| 2.1 引言 | 第21-25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.2.1 细胞株 | 第25页 |
| 2.2.2 化合物 | 第25页 |
| 2.2.3 试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-31页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第26-27页 |
| 2.3.2 MTT法测AH5细胞毒性 | 第27页 |
| 2.3.3 细胞周期分布检测 | 第27页 |
| 2.3.4 DAPI染色 | 第27-28页 |
| 2.3.5 Annexin V-PI双染检测细胞凋亡 | 第28页 |
| 2.3.6 Western blot蛋白含量分析 | 第28-31页 |
| 2.3.6.1 试剂配制 | 第28-29页 |
| 2.3.6.2 细胞总蛋白提取 | 第29页 |
| 2.3.6.3 蛋白定量 | 第29页 |
| 2.3.6.4 Western blot蛋白分析 | 第29-31页 |
| 2.4 实验结果 | 第31-38页 |
| 2.4.1 AH5抑制肝癌细胞增殖 | 第31-33页 |
| 2.4.2 AH5诱导肝癌细胞周期阻滞 | 第33-34页 |
| 2.4.3 AH5影响调控G2/M期的相关蛋白表达 | 第34-35页 |
| 2.4.4 AH5诱导肝癌细胞凋亡 | 第35-37页 |
| 2.4.5 AH5活化caspase-3,caspase-9凋亡蛋白的表达 | 第37-38页 |
| 2.5 结论及讨论 | 第38-41页 |
| 3 AH5诱导HepG2细胞G2/M期阻滞和凋亡的机制研究 | 第41-63页 |
| 3.1 引言 | 第41-46页 |
| 3.2 实验材料 | 第46页 |
| 3.2.1 细胞株 | 第46页 |
| 3.2.2 化合物 | 第46页 |
| 3.2.3 试剂 | 第46页 |
| 3.2.4 仪器 | 第46页 |
| 3.3 实验方法 | 第46-50页 |
| 3.3.1 MTT法细胞存活率测定 | 第46-47页 |
| 3.3.2 流式细胞术测细胞周期分布 | 第47页 |
| 3.3.3 凋亡试剂盒检测细胞凋亡 | 第47页 |
| 3.3.4 JC-1测线粒体膜电势 | 第47页 |
| 3.3.5 免疫荧光染色 | 第47-48页 |
| 3.3.6 RNA提取和实时定量PCR | 第48-50页 |
| 3.3.6.1 RNA提取 | 第48页 |
| 3.3.6.2 cDNA合成 | 第48-49页 |
| 3.3.6.3 实时定量荧光PCR | 第49-50页 |
| 3.3.7 亚细胞蛋白分离提取 | 第50页 |
| 3.3.8 Western blot蛋白含量测定 | 第50页 |
| 3.4 实验结果 | 第50-59页 |
| 3.4.1 AH5影响HepG2细胞p53、p21 mRNA及蛋白的表达 | 第50-52页 |
| 3.4.2 PFT-α抑制AH5诱导的G2/M期阻滞 | 第52-53页 |
| 3.4.3 AH5上调HepG2细胞p53、Bax mRNA及蛋白的表达 | 第53-54页 |
| 3.4.4 AH5诱导线粒体膜电势降低,细胞色素c释放 | 第54-55页 |
| 3.4.5 AH5诱导线粒体中p53累积和Bax移位 | 第55-57页 |
| 3.4.6 抑制剂PFT-α和PFT-μ对AH5促凋亡活性的影响 | 第57-59页 |
| 3.5 结论及讨论 | 第59-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第72页 |
