| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 符号说明 | 第15-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-38页 |
| 1.1 引言 | 第16页 |
| 1.2 荧光适体传感器 | 第16-22页 |
| 1.2.1 适体(目标识别元素) | 第16-18页 |
| 1.2.2 荧光(信号输出方式) | 第18页 |
| 1.2.3 荧光适体传感器的现状 | 第18-22页 |
| 1.2.3.1 标记型 | 第19-21页 |
| 1.2.3.2 免标记型 | 第21-22页 |
| 1.3 信号扩增策略 | 第22-32页 |
| 1.3.1 酶介导的核酸扩增技术 | 第22-28页 |
| 1.3.2 基于DNA纳米结构的扩增技术 | 第28-32页 |
| 1.4 腺苷 | 第32-36页 |
| 1.4.1 腺苷的检测意义 | 第32-33页 |
| 1.4.2 腺苷的传统检测方法 | 第33页 |
| 1.4.3 腺苷的适体传感器 | 第33-36页 |
| 1.4.4 腺苷面临的问题 | 第36页 |
| 1.5 本论文的研究内容 | 第36-38页 |
| 第二章 基于外切酶Ⅲ辅助的DNA循环和杂交链反应构建的免标记双重放大的腺苷传感器 | 第38-63页 |
| 2.1 引言 | 第38-39页 |
| 2.2 实验部分 | 第39-42页 |
| 2.2.1 试剂 | 第39-41页 |
| 2.2.2 仪器与装置 | 第41-42页 |
| 2.3 实验步骤 | 第42-43页 |
| 2.3.1 高温高压灭菌 | 第42页 |
| 2.3.2 链霉亲和素化磁球-探针的制备 | 第42页 |
| 2.3.3 Exo Ⅲ辅助的DNA循环和HCR | 第42-43页 |
| 2.3.4 插入染料及荧光测量 | 第43页 |
| 2.4 腺苷适体传感器的设计原理 | 第43-44页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第44-62页 |
| 2.5.1 体系的荧光图谱及设计的可行性 | 第44-46页 |
| 2.5.2 HCR中序列设计的优化 | 第46-48页 |
| 2.5.3 反应条件的优化 | 第48-53页 |
| 2.5.3.1 Exo Ⅲ浓度的优化 | 第48-49页 |
| 2.5.3.2 H1和H2浓度的优化 | 第49-51页 |
| 2.5.3.3 NMM浓度的优化 | 第51-52页 |
| 2.5.3.4 反应时间的优化 | 第52-53页 |
| 2.5.4 适体传感器的分析检测 | 第53-55页 |
| 2.5.5 适体传感器的方法学验证 | 第55-58页 |
| 2.5.5.1 精密度和重现性的考察 | 第55-56页 |
| 2.5.5.2 选择性考察 | 第56-57页 |
| 2.5.5.3 回收率实验 | 第57-58页 |
| 2.5.6 实际尿样分析 | 第58-62页 |
| 2.5.6.1 尿样中腺苷的校准曲线 | 第58-59页 |
| 2.5.6.2 尿样中该适体传感器的方法学验证 | 第59-61页 |
| 2.5.6.3 尿样中腺苷的检测 | 第61-62页 |
| 2.6 结论 | 第62-63页 |
| 第三章 基于聚合切刻循环和发卡结构催化自组装构建的免标记荧光适体传感器用于检测腺苷 | 第63-89页 |
| 3.1 引言 | 第63-64页 |
| 3.2 实验部分 | 第64-66页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第64-65页 |
| 3.2.2 仪器与装置 | 第65-66页 |
| 3.3 实验步骤 | 第66-68页 |
| 3.3.1 高温高压灭菌 | 第66页 |
| 3.3.2 实验方法 | 第66-67页 |
| 3.3.3 CHA过程的凝胶电泳实验 | 第67-68页 |
| 3.4 腺苷适体传感器的设计原理 | 第68-72页 |
| 3.4.1 实验原理的设计 | 第68-69页 |
| 3.4.2 发卡结构HP、H1和H2的设计 | 第69-71页 |
| 3.4.3 CHA过程的电泳验证 | 第71-72页 |
| 3.5 结果与讨论 | 第72-88页 |
| 3.5.1 整体实验的荧光图谱 | 第72-73页 |
| 3.5.2 发卡探针HP序列设计的优化 | 第73-74页 |
| 3.5.3 反应条件的优化 | 第74-79页 |
| 3.5.3.1 聚合切刻反应时间的优化 | 第74-75页 |
| 3.5.3.2 H1浓度的优化 | 第75-76页 |
| 3.5.3.3 H2/H1比例的优化 | 第76-77页 |
| 3.5.3.4 CHA反应时间的优化 | 第77-78页 |
| 3.5.3.5 NMM浓度的优化 | 第78-79页 |
| 3.5.4 适体传感器的分析检测 | 第79-81页 |
| 3.5.5 适体传感器的方法学验证 | 第81-83页 |
| 3.5.5.1 精密度和重现性考察 | 第81-82页 |
| 3.5.5.2 选择性考察 | 第82页 |
| 3.5.5.3 回收率考察 | 第82-83页 |
| 3.5.6 实际尿样分析 | 第83-87页 |
| 3.5.6.1 尿样中腺苷的校准曲线 | 第83-85页 |
| 3.5.6.2 尿样中该适体传感器的方法学验证 | 第85-86页 |
| 3.5.6.3 尿样中腺苷的检测 | 第86-87页 |
| 3.5.7 与现有方法的比较 | 第87-88页 |
| 3.6 结论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 硕士期间发表论文 | 第108-109页 |
| 附件 | 第109页 |