致谢 | 第5-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
第一部分 文献综述 | 第9-21页 |
1 马立克病病毒研究进展 | 第9-13页 |
1.1 马立克病 | 第9-10页 |
1.2 马立克病病毒及其致病机制 | 第10-13页 |
2 microRNA研究进展 | 第13-14页 |
2.1 micro RNA的发现 | 第13页 |
2.2 micro RNA的生物合成与作用机制 | 第13页 |
2.3 micro RNA的功能 | 第13-14页 |
3 马立克病病毒编码的microRNA | 第14-18页 |
3.1 马立克病病毒micro RNA的发现 | 第14-15页 |
3.2 马立克病病毒micro RNA的调控机制 | 第15-16页 |
3.3 马立克病病毒micro RNA的功能 | 第16-18页 |
4 本研究的目的意义 | 第18-21页 |
第二部分 研究内容 | 第21-47页 |
第一章 miR-M12-5p/3p宿主靶基因预测 | 第21-25页 |
1 引言 | 第21页 |
2 材料与方法 | 第21-22页 |
2.1 本地数据库基因来源 | 第21页 |
2.2 靶基因预测方法 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22页 |
4 讨论 | 第22-25页 |
第二章 mi R-M12-5p/3p宿主靶基因筛选与鉴定 | 第25-41页 |
1 引言 | 第25页 |
2 材料与方法 | 第25-34页 |
2.1 主要仪器 | 第25页 |
2.2 主要试剂 | 第25-26页 |
2.3 质粒菌种 | 第26页 |
2.4 引物设计与合成 | 第26页 |
2.5 载体构建 | 第26-33页 |
2.6 双萤光素酶报告基因检测 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-38页 |
3.1 PCR扩增结果 | 第34-35页 |
3.2 靶基因报告载体构建结果 | 第35页 |
3.3 DLRA初步筛选结果 | 第35-37页 |
3.4 mi RNA/mRNA结合位点突变验证结果 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-41页 |
第三章 mi R-M12-5p/3p宿主靶基因的体内验证 | 第41-47页 |
1 引言 | 第41页 |
2 材料与方法 | 第41-42页 |
2.1 主要仪器 | 第41页 |
2.2 试验材料 | 第41页 |
2.3 引物设计与合成 | 第41页 |
2.4 病毒培养 | 第41-42页 |
2.5 实时荧光定量PCR | 第42页 |
3 结果与分析 | 第42-45页 |
3.1 病毒培养 | 第42页 |
3.2 qRT-PCR方法建立与特异性分析 | 第42-43页 |
3.3 mi R-M12-5p/3p表达对候选靶基因的抑制 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
全文总结 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
ABSTRACT | 第57-58页 |
附录 | 第59页 |