| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 禽流感的历史和现状 | 第12-13页 |
| 1.2 禽流感病毒的形态结构和基因组特点 | 第13-14页 |
| 1.3 禽流感病毒基因编码主要糖蛋白功能 | 第14-15页 |
| 1.3.1 HA功能 | 第14页 |
| 1.3.2 NA功能 | 第14-15页 |
| 1.4 禽流感病毒进化与变异 | 第15页 |
| 1.5 禽流感病毒检测方法的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.5.1 病原学检测方法 | 第15页 |
| 1.5.2 血清学检测方法 | 第15-16页 |
| 1.5.3 分子生物学检测方法 | 第16页 |
| 1.6 单克隆抗体技术的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.6.1 单克隆抗体的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.6.2 杂交瘤技术的基本原理 | 第17页 |
| 1.7 研究目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 H7、N1、N9亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备 | 第19-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 免疫质粒和病毒 | 第19页 |
| 2.1.2 实验用动物及细胞 | 第19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-23页 |
| 2.2.1 免疫原的制备 | 第19-20页 |
| 2.2.2 动物免疫 | 第20-21页 |
| 2.2.3 杂交瘤细胞株的建立 | 第21-22页 |
| 2.2.4 阳性杂交瘤细胞筛选 | 第22页 |
| 2.2.5 阳性杂交瘤细胞克隆化及冻存和复苏 | 第22-23页 |
| 2.2.6 单克隆抗体的大量制备 | 第23页 |
| 2.3 实验结果 | 第23-26页 |
| 2.3.1 NA基因PCR扩增 | 第23页 |
| 2.3.2 真核表达重组质粒pCAGGS-NA的PCR和双酶切鉴定 | 第23-24页 |
| 2.3.3 质粒转染 293T的IFA检测 | 第24-25页 |
| 2.3.4 阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第25-26页 |
| 2.3.5 单克隆抗体细胞株建立 | 第26页 |
| 2.4 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 H7亚型单克隆抗体生物学特性分析 | 第28-37页 |
| 3.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-30页 |
| 3.2.1 间接ELISA条件的摸索 | 第28页 |
| 3.2.2 抗体亚类鉴定 | 第28-29页 |
| 3.2.3 杂交瘤细胞上清和腹水ELISA效价值测定 | 第29页 |
| 3.2.4 特异性实验 | 第29页 |
| 3.2.5 广谱性实验 | 第29-30页 |
| 3.2.6 H7亚型单克隆抗体IFA检测 | 第30页 |
| 3.2.7 H7亚型单克隆抗体Western blot检测结果 | 第30页 |
| 3.3 实验结果 | 第30-35页 |
| 3.3.1 间接ELISA最佳包被浓度的确定 | 第30-31页 |
| 3.3.2 单抗亚类鉴定 | 第31页 |
| 3.3.3 杂交瘤细胞上清和腹水ELISA效价值测定 | 第31页 |
| 3.3.4 特异性检测 | 第31页 |
| 3.3.5 23 株H7亚型病毒分离株的遗传演化分析 | 第31-32页 |
| 3.3.6 H7亚型单克隆抗体对不同H7亚型病毒的交叉反应性实验 | 第32-33页 |
| 3.3.7 H7亚型单克隆抗体对不同H7亚型病毒的中和能力 | 第33-34页 |
| 3.3.8 IFA检测 | 第34-35页 |
| 3.3.9 单抗Western blot检测 | 第35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 N1、N9亚型单克隆抗体生物学特性分析 | 第37-44页 |
| 4.1 实验材料 | 第37页 |
| 4.2 实验方法 | 第37页 |
| 4.2.1 抗体亚类分析 | 第37页 |
| 4.2.2 杂交瘤细胞上清效价测定 | 第37页 |
| 4.2.3 腹水ELISA效价值测定 | 第37页 |
| 4.2.4 N1、N9亚型单抗IFA检测 | 第37页 |
| 4.3 实验结果 | 第37-42页 |
| 4.3.1 抗体亚类鉴定 | 第37页 |
| 4.3.2 杂交瘤细胞上清效价的测定结果 | 第37-38页 |
| 4.3.3 腹水效价的测定结果 | 第38-39页 |
| 4.3.4 N1亚型单抗IFA检测结果 | 第39-40页 |
| 4.3.5 N9亚型单抗IFA检测结果 | 第40-42页 |
| 4.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第五章 全文结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简历 | 第51页 |
