| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第1章 绪论 | 第14-36页 |
| 1.1 生物的适应性 | 第14-18页 |
| 1.1.1 生物的适应性——生物的基本特征 | 第14页 |
| 1.1.2 生物适应性的两个层次——“宏适应”和“微适应” | 第14-16页 |
| 1.1.3 生物在形态、行为与生理等方面的适应性表现 | 第16-18页 |
| 1.2 免疫适应性 | 第18-22页 |
| 1.2.1 免疫适应性 | 第18页 |
| 1.2.2 人类“免疫适应性”的实践经验开启了对免疫的探索 | 第18-19页 |
| 1.2.3 免疫适应性的特殊形式——人类“适应性免疫”的发现 | 第19-20页 |
| 1.2.4 免疫适应性在所用生物中都存在 | 第20-22页 |
| 1.3 免疫适应性在不同生物中的表现形式 | 第22-34页 |
| 1.3.1 细菌的免疫适应性——CRISPR-Cas防御系统 | 第22-24页 |
| 1.3.2 植物的免疫适应性——RNAi | 第24-27页 |
| 1.3.3 无脊椎动物的免疫适应性——机制暂不明了 | 第27-31页 |
| 1.3.4 脊椎动物的免疫适应性——淋巴细胞及抗体分子 | 第31-34页 |
| 1.3.5 免疫适应性——多种多样“适应性免疫” | 第34页 |
| 1.4 本研究的研究目的及意义 | 第34-36页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第36-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第36-39页 |
| 2.1.1 实验动物与菌株 | 第36页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第36-38页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第38-39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-54页 |
| 2.2.1 长牡蛎免疫刺激及样品收集 | 第39-41页 |
| 2.2.2 长牡蛎血细胞总数检测 | 第41页 |
| 2.2.3 长牡蛎不同类型血细胞的观察、检测及分选 | 第41-42页 |
| 2.2.4 长牡蛎血细胞吞噬能力的测定 | 第42-43页 |
| 2.2.5 长牡蛎血细胞包囊化活性的检测 | 第43页 |
| 2.2.6 长牡蛎血细胞凋亡水平的测定 | 第43-44页 |
| 2.2.7 长牡蛎血细胞溶酶体活性的测定 | 第44页 |
| 2.2.8 长牡蛎血细胞胞内ROS水平、NO含量的测定 | 第44-45页 |
| 2.2.9 长牡蛎血细胞胞内葡萄糖含量的测定 | 第45页 |
| 2.2.10 长牡蛎血细胞胞内乳酸含量及NAD+/NADH水平的测定 | 第45-46页 |
| 2.2.11 长牡蛎血细胞胞内组蛋白甲基化、乙酰化修饰水平的测定 | 第46-47页 |
| 2.2.12 长牡蛎组织总RNA的提取及cDNA的合成 | 第47-48页 |
| 2.2.13 荧光实时定量PCR检测 | 第48-49页 |
| 2.2.14 Western-blot实验检测 | 第49-50页 |
| 2.2.15 基因克隆与序列分析 | 第50-51页 |
| 2.2.16 真核表达载体的构建和转染 | 第51-52页 |
| 2.2.17 转录组学实验及数据分析 | 第52页 |
| 2.2.18 数据统计分析 | 第52-54页 |
| 第3章 实验结果 | 第54-96页 |
| 3.1 长牡蛎不同类型血细胞的鉴定及功能分析 | 第54-61页 |
| 3.1.1 不同类型血细胞的分离与鉴定 | 第54-56页 |
| 3.1.2 不同类型血细胞吞噬、包囊化免疫活性的分析 | 第56-58页 |
| 3.1.3 不同类型血细胞胞内杀菌活性物质的分析 | 第58-59页 |
| 3.1.4 不同类型血细胞内免疫相关基因表达的分析 | 第59-61页 |
| 3.2 灿烂弧菌两次刺激后长牡蛎血细胞的变化 | 第61-68页 |
| 3.2.1 灿烂弧菌刺激后血细胞总数的变化 | 第61-62页 |
| 3.2.2 灿烂弧菌刺激后不同类型血细胞比例的变化 | 第62-64页 |
| 3.2.3 灿烂弧菌刺激后血细胞免疫活性的变化 | 第64-68页 |
| 3.3 灿烂弧菌两次刺激后长牡蛎血细胞的转录学分析 | 第68-80页 |
| 3.3.1 血细胞差异表达基因的筛选 | 第68-73页 |
| 3.3.2 血细胞差异表达基因参与的主要生命过程及信号通路 | 第73-76页 |
| 3.3.3 血细胞吞噬相关基因的变化分析 | 第76-78页 |
| 3.3.4 血细胞吞噬相关差异表达基因的验证 | 第78-80页 |
| 3.4 灿烂弧菌连续刺激后长牡蛎血细胞的能量代谢变化 | 第80-87页 |
| 3.4.1 血细胞能量代谢相关基因的表达变化 | 第80-82页 |
| 3.4.2 血细胞糖酵解水平变化 | 第82-84页 |
| 3.4.3 mTOR-HIFα 通路在调节血细胞能量代谢中的作用 | 第84-87页 |
| 3.5 灿烂弧菌连续刺激后长牡蛎血细胞的组蛋白修饰变化 | 第87-96页 |
| 3.5.1 血细胞组蛋白甲基化、乙酰化修饰水平变化 | 第87-89页 |
| 3.5.2 血细胞组蛋白甲基转移酶、乙酰基转移酶的鉴定 | 第89-96页 |
| 第4章 讨论 | 第96-116页 |
| 4.1 长牡蛎不同类型细胞的鉴定及免疫活性分析 | 第97-102页 |
| 4.1.1 颗粒细胞是血细胞中发挥免疫功能的主要细胞类群 | 第98-101页 |
| 4.1.2 免疫相关基因主要在颗粒细胞在表达 | 第101-102页 |
| 4.2 颗粒细胞在免疫适应中发挥重要作用 | 第102-106页 |
| 4.2.1 免疫适应中血细胞总数和颗粒细胞比例显著增加 | 第103-104页 |
| 4.2.2 免疫适应中粒细胞免疫活性显著增强 | 第104-106页 |
| 4.3 组学筛选长牡蛎免疫适应中的关键分子及过程 | 第106-110页 |
| 4.3.1 免疫适应中血细胞内基因表达表现出“记忆特征” | 第106-108页 |
| 4.3.2 免疫适应中差异基因涉及代谢、内吞关键生命过程 | 第108-109页 |
| 4.3.3 免疫适应中血细胞吞噬和抗凋亡相关基因表达显著增强 | 第109-110页 |
| 4.4 能量代谢在免疫适应中发挥调节作用 | 第110-113页 |
| 4.4.1 免疫适应中血细胞代谢方式发生变化，无氧糖酵解显著增强 | 第111-112页 |
| 4.4.2 免疫适应中mTOR信号在调节能量代谢上发挥重要作用 | 第112-113页 |
| 4.5 组蛋白修饰在免疫适应中发挥调节作用 | 第113-116页 |
| 4.5.1 免疫致敏后血细胞组蛋白修饰水平发生显著变化 | 第114-116页 |
| 第5章 结论 | 第116-118页 |
| 5.1 发现了长牡蛎粒细胞发挥主要免疫功能，是免疫适应中的核心细胞类群 | 第116页 |
| 5.2 探明了血细胞吞噬和抗凋亡过程在长牡蛎免疫适应中发挥关键作用 | 第116-117页 |
| 5.3 发现了mTOR调节无氧糖酵解是长牡蛎免疫适应中的关键能量代谢通路 | 第117页 |
| 5.4 初步揭示了组蛋白修饰在长牡蛎免疫适应中可能发挥调节作用 | 第117-118页 |
| 参考文献 | 第118-132页 |
| 致谢 | 第132-134页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第134-137页 |
