中文摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4页 |
1 引言 | 第7-19页 |
1.1 叶绿体的结构功能及发育 | 第7-9页 |
1.1.1 叶绿体的结构和功能 | 第7-8页 |
1.1.2 叶绿体的发育 | 第8-9页 |
1.2 叶绿体基因组及叶绿体基因表达调控 | 第9-14页 |
1.2.1 叶绿体基因组 | 第9-11页 |
1.2.2 叶绿体基因的表达调控 | 第11-14页 |
1.3 叶绿体蛋白质组学的研究 | 第14-16页 |
1.3.1 叶绿体蛋白质组学 | 第14-15页 |
1.3.2 蛋白质的转运及定位 | 第15-16页 |
1.4 TAC复合物的研究 | 第16-19页 |
2 材料与方法 | 第19-36页 |
2.1 材料 | 第19-21页 |
2.1.1 植物材料 | 第19页 |
2.1.2 工具酶及试剂 | 第19页 |
2.1.3 菌株和质粒 | 第19-20页 |
2.1.4 抗生素使用浓度 | 第20页 |
2.1.5 培养基配方 | 第20-21页 |
2.2 方法 | 第21-36页 |
2.2.1 植株的种植、转化及突变苗的筛选 | 第21-22页 |
2.2.2 鉴定T-DNA插入突变体 | 第22-23页 |
2.2.3 pTAC7 基因融合GFP基因的载体构建 | 第23页 |
2.2.4 pTAC7 基因融合 4xMYC基因的载体构建 | 第23页 |
2.2.5 质粒的提取和感受态的制备及转化 | 第23-27页 |
2.2.6 蛋白质免疫共沉淀(Co-IP) | 第27-28页 |
2.2.7 Blue Native PAGE | 第28-31页 |
2.2.8 DNA和RNA的抽提 | 第31-32页 |
2.2.9 RNA反转录为cDNA | 第32页 |
2.2.10 蛋白质免疫杂交实验 | 第32-33页 |
2.2.11 叶绿体蛋白各组分的分离 | 第33-35页 |
2.2.12 实验所需引物设计 | 第35-36页 |
3 实验结果 | 第36-54页 |
3.1 通过酵母筛库的方法确定与pTAC7 相互作用的蛋白 | 第36-39页 |
3.1.1 pGBKT7-pTAC7 为诱饵蛋白筛选拟南芥幼苗cDNA文库 | 第36-38页 |
3.1.2 pTAC7 与CSP41A/B的相互作用验证 | 第38-39页 |
3.2 pTAC7:GFP/MYC能够互补ptac7 突变体 | 第39-40页 |
3.3 pTAC7 的定位 | 第40-43页 |
3.3.1 pTAC7 的亚细胞定位 | 第40-41页 |
3.3.2 pTAC7 的叶绿体精细定位定位 | 第41-43页 |
3.4 质谱鉴定与pTAC7 形成复合物的蛋白 | 第43-54页 |
3.4.1 IP分析标签植株的材料处理 | 第43-44页 |
3.4.2 质谱结果 | 第44-52页 |
3.4.3 Blue-Native证明pTAC7 存在于PEP复合物中 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
4.1 pTAC7 是PEP复合物的必需组分 | 第54-55页 |
4.2 相互作用蛋白的筛选 | 第55-57页 |
附录 | 第57-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
附件 | 第67页 |