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pTAC7调控拟南芥叶绿基因表达的机理研究

中文摘要第3-4页
abstract第4页
1 引言第7-19页
    1.1 叶绿体的结构功能及发育第7-9页
        1.1.1 叶绿体的结构和功能第7-8页
        1.1.2 叶绿体的发育第8-9页
    1.2 叶绿体基因组及叶绿体基因表达调控第9-14页
        1.2.1 叶绿体基因组第9-11页
        1.2.2 叶绿体基因的表达调控第11-14页
    1.3 叶绿体蛋白质组学的研究第14-16页
        1.3.1 叶绿体蛋白质组学第14-15页
        1.3.2 蛋白质的转运及定位第15-16页
    1.4 TAC复合物的研究第16-19页
2 材料与方法第19-36页
    2.1 材料第19-21页
        2.1.1 植物材料第19页
        2.1.2 工具酶及试剂第19页
        2.1.3 菌株和质粒第19-20页
        2.1.4 抗生素使用浓度第20页
        2.1.5 培养基配方第20-21页
    2.2 方法第21-36页
        2.2.1 植株的种植、转化及突变苗的筛选第21-22页
        2.2.2 鉴定T-DNA插入突变体第22-23页
        2.2.3 pTAC7 基因融合GFP基因的载体构建第23页
        2.2.4 pTAC7 基因融合 4xMYC基因的载体构建第23页
        2.2.5 质粒的提取和感受态的制备及转化第23-27页
        2.2.6 蛋白质免疫共沉淀(Co-IP)第27-28页
        2.2.7 Blue Native PAGE第28-31页
        2.2.8 DNA和RNA的抽提第31-32页
        2.2.9 RNA反转录为cDNA第32页
        2.2.10 蛋白质免疫杂交实验第32-33页
        2.2.11 叶绿体蛋白各组分的分离第33-35页
        2.2.12 实验所需引物设计第35-36页
3 实验结果第36-54页
    3.1 通过酵母筛库的方法确定与pTAC7 相互作用的蛋白第36-39页
        3.1.1 pGBKT7-pTAC7 为诱饵蛋白筛选拟南芥幼苗cDNA文库第36-38页
        3.1.2 pTAC7 与CSP41A/B的相互作用验证第38-39页
    3.2 pTAC7:GFP/MYC能够互补ptac7 突变体第39-40页
    3.3 pTAC7 的定位第40-43页
        3.3.1 pTAC7 的亚细胞定位第40-41页
        3.3.2 pTAC7 的叶绿体精细定位定位第41-43页
    3.4 质谱鉴定与pTAC7 形成复合物的蛋白第43-54页
        3.4.1 IP分析标签植株的材料处理第43-44页
        3.4.2 质谱结果第44-52页
        3.4.3 Blue-Native证明pTAC7 存在于PEP复合物中第52-54页
4 讨论第54-57页
    4.1 pTAC7 是PEP复合物的必需组分第54-55页
    4.2 相互作用蛋白的筛选第55-57页
附录第57-61页
致谢第61-62页
参考文献第62-67页
附件第67页

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