英汉缩略语名词对照 | 第7-11页 |
中文摘要 | 第11-17页 |
英文摘要 | 第17-24页 |
前言 | 第25-27页 |
第一部分 B-Myb在结肠癌样本中的表达分析 | 第27-46页 |
1 材料与方法 | 第27-41页 |
1.1 材料 | 第27-36页 |
1.1.1 结肠样本及结肠癌细胞 | 第27页 |
1.1.2 主要试剂 | 第27-33页 |
1.1.3 PCR引物 | 第33-34页 |
1.1.5 主要溶液的配制 | 第34-36页 |
1.2 方法 | 第36-41页 |
1.2.1 细胞复苏和培养 | 第36页 |
1.2.2 细胞传代 | 第36页 |
1.2.3 细胞冻存 | 第36页 |
1.2.4 引物设计 | 第36页 |
1.2.5 qRT-PCR | 第36-38页 |
1.2.6 Western blot | 第38-40页 |
1.2.7 免疫组织化学染色 | 第40-41页 |
1.2.8 统计学分析 | 第41页 |
2 结果 | 第41-44页 |
2.1 B-Myb在结肠癌组织中mRNA表达水平的检测 | 第41-42页 |
2.2 B-Myb在结肠癌细胞中表达水平的检测 | 第42页 |
2.3 B-Myb在结肠癌组织中蛋白表达水平的检测 | 第42-43页 |
2.4 B-Myb的表达水平与结肠癌患者临床病理特征的相关性 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
第二部分 B-Myb在结肠癌发生发展过程中的作用 | 第46-79页 |
1 材料与方法 | 第46-62页 |
1.1 材料 | 第46-53页 |
1.1.1 细胞株 | 第46页 |
1.1.2 实验裸鼠 | 第46页 |
1.1.3 细菌株 | 第46页 |
1.1.4 质粒 | 第46-48页 |
1.1.5 病毒液 | 第48-49页 |
1.1.6 主要试剂 | 第49-50页 |
1.1.7 PCR引物 | 第50-51页 |
1.1.9 主要溶液的配制 | 第51-53页 |
1.2 方法 | 第53-62页 |
1.2.1 细胞复苏和培养 | 第53页 |
1.2.2 细胞传代 | 第53页 |
1.2.3 细胞冻存 | 第53-54页 |
1.2.4 细胞计数 | 第54页 |
1.2.5 稳定过表达B-Myb的结肠癌细胞株构建 | 第54-55页 |
1.2.6 引物设计 | 第55页 |
1.2.7 siRNA转染 | 第55页 |
1.2.8 稳定敲降B-Myb的结肠癌细胞株构建 | 第55-56页 |
1.2.9 qRT-PCR | 第56-57页 |
1.2.10 Western blot | 第57-59页 |
1.2.11 细胞增殖分析 | 第59页 |
1.2.12 细胞周期检测 | 第59页 |
1.2.13 Annexin-V/PI双染法流式检测凋亡 | 第59页 |
1.2.14 免疫荧光实验 | 第59-60页 |
1.2.15 划痕实验 | 第60页 |
1.2.16 Transwell迁移实验 | 第60-61页 |
1.2.17 Transwell侵袭实验 | 第61页 |
1.2.18 克隆形成实验 | 第61页 |
1.2.19 裸鼠成瘤实验 | 第61-62页 |
1.2.20 统计学分析 | 第62页 |
2 结果 | 第62-76页 |
2.1 过表达及敲降B-Myb细胞株的鉴定 | 第62-63页 |
2.2 B-Myb促进结肠癌细胞增殖 | 第63-65页 |
2.3 B-Myb促进结肠癌细胞周期进程 | 第65-70页 |
2.4 B-Myb抑制结肠癌细胞凋亡 | 第70-71页 |
2.5 B-Myb增强结肠癌细胞的运动能力 | 第71-74页 |
2.6 B-Myb促进结肠癌在体内的肿瘤形成 | 第74-76页 |
2.6.1 B-Myb促进结肠癌细胞的克隆形成 | 第74-75页 |
2.6.2 B-Myb促进结肠癌在体内的肿瘤形成 | 第75-76页 |
3 讨论 | 第76-79页 |
第三部分 B-Myb在结肠癌发生发展中的分子机制研究 | 第79-105页 |
1 材料与方法 | 第79-92页 |
1.1 材料 | 第79-84页 |
1.1.1 细胞株 | 第79页 |
1.1.2 细菌株 | 第79页 |
1.1.3 主要试剂 | 第79-81页 |
1.1.4 PCR引物 | 第81-82页 |
1.1.5 主要仪器 | 第82页 |
1.1.6 主要溶液的配制 | 第82-84页 |
1.2 方法 | 第84-92页 |
1.2.1 细胞复苏和培养 | 第84-85页 |
1.2.2 细胞传代 | 第85页 |
1.2.3 细胞冻存 | 第85页 |
1.2.4 引物设计 | 第85页 |
1.2.5 qRT-PCR | 第85-86页 |
1.2.6 Western blot | 第86-88页 |
1.2.7 划痕实验 | 第88页 |
1.2.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第88-89页 |
1.2.9 RNA-seq分析 | 第89页 |
1.2.10 B-Myb删除体及点突变体的质粒构建、转化及提取 | 第89-92页 |
1.2.11 转染 | 第92页 |
1.2.12 统计学分析 | 第92页 |
2 结果 | 第92-101页 |
2.1 RNA-seq分析 | 第92-96页 |
2.2 靶基因及通路的验证 | 第96-99页 |
2.3 删除体及突变体的构建及其在结肠癌细胞中的功能检测 | 第99-101页 |
2.3.1 B-Myb删除体及突变体的设计 | 第99-100页 |
2.3.2 B-Myb删除体及突变体构建后的确认 | 第100-101页 |
2.3.3 B-Myb删除体及突变体对结肠癌细胞侧向迁移影响的检测 | 第101页 |
3 讨论 | 第101-105页 |
全文总结 | 第105-107页 |
1 B-Myb在结肠癌样本中的表达分析 | 第105页 |
2 B-Myb在结肠癌发生发展过程中的作用 | 第105-106页 |
3 B-Myb在结肠癌发生发展中的分子机制研究 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-112页 |
文献综述 B-Myb在肿瘤发生发展中的作用 | 第112-121页 |
参考文献 | 第118-121页 |
致谢 | 第121-122页 |
研究生在读期间发表论文 | 第122页 |