摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
1.1 中国肉牛产业现状 | 第12页 |
1.2 肉牛育种与分子标记 | 第12-14页 |
1.2.1 肉牛育种概况 | 第12-13页 |
1.2.2 分子标记概述 | 第13页 |
1.2.3 本研究使用的分子标记辅助选择 | 第13页 |
1.2.4 分子标记在肉牛育种中的应用 | 第13-14页 |
1.3 实时荧光定量PCR技术 | 第14-15页 |
1.4 启动子研究进展 | 第15-17页 |
1.5 PNPLA3基因的研究现状 | 第17-19页 |
1.6 研究的目的及意义 | 第19-21页 |
第二章 黄牛PNPLA3基因遗传变异及其遗传效应研究 | 第21-35页 |
2.1 试验材料与方法 | 第21-26页 |
2.1.1 试验材料 | 第21-22页 |
2.1.2 试验方法 | 第22-26页 |
2.2 结果与分析 | 第26-32页 |
2.2.1 黄牛基因组DNA的检测 | 第26页 |
2.2.2 牛PNPLA3基因SNP位点检测 | 第26-27页 |
2.2.3 牛PNPLA3基因SNP位点分型 | 第27-29页 |
2.2.4 牛PNPLA3基因SNP位点群体遗传学分析 | 第29-30页 |
2.2.5 牛PNPLA3基因SNP位点连锁不平衡与单倍型分析 | 第30-31页 |
2.2.6 秦川牛PNPLA3基因SNP位点与生长性状的关联分析 | 第31-32页 |
2.2.7 秦川牛PNPLA3基因组合单倍型与生长性状的关联分析 | 第32页 |
2.3 讨论 | 第32-34页 |
2.3.1 关于牛PNPLA3基因多态位点的群体遗传学分析 | 第32-33页 |
2.3.2 关于PNPLA3基因多态位点的连锁不平衡与单倍型分析 | 第33页 |
2.3.3 关于牛PNPLA3基因多态位点与生长性状的关联分析 | 第33-34页 |
2.4 小结 | 第34-35页 |
第三章 秦川牛PNPLA3基因组织表达规律研究 | 第35-42页 |
3.1 材料与方法 | 第35-37页 |
3.1.1 试验材料 | 第35页 |
3.1.2 试验方法 | 第35-37页 |
3.2 结果与分析 | 第37-40页 |
3.2.1 总RNA质量检测 | 第37页 |
3.2.2 引物特异性检测 | 第37页 |
3.2.3 秦川牛PNPLA3基因组织表达谱 | 第37-40页 |
3.2.4 遗传变异对秦川牛PNPLA3基因表达的影响 | 第40页 |
3.3 讨论 | 第40-41页 |
3.4 小结 | 第41-42页 |
第四章 秦川牛PNPLA3基因启动子荧光素酶报告载体的构建及活性检测 | 第42-49页 |
4.1 试验材料 | 第42页 |
4.1.1 载体,菌株,细胞系 | 第42页 |
4.1.2 主要试剂与仪器 | 第42页 |
4.2 秦川牛 PNPLA3 基因启动子不同截短体荧光素酶报告载体的构建 | 第42-45页 |
4.2.1 引物的设计与合成 | 第42-43页 |
4.2.2 启动子不同截短体的克隆 | 第43页 |
4.2.3 启动子不同截短体荧光素酶表达载体的构建 | 第43-45页 |
4.3 秦川牛 PNPLA3 基因启动子活性区域筛选 | 第45-46页 |
4.3.1 HEK 293T细胞培养 | 第45页 |
4.3.2 pGL-3 重组质粒系列与pRL-TK共转染 293T细胞 | 第45-46页 |
4.3.3 荧光素酶报告基因活性测定 转染后,在显微镜下观察细胞生长情况及汇 | 第46页 |
4.4 结果与分析 | 第46-47页 |
4.4.1 秦川牛PNPLA3基因启动子不同截短体pGL-3 载体构建结果 | 第46页 |
4.4.2 秦川牛PNPLA3基因启动子活性分析的结果 | 第46-47页 |
4.5 讨论 | 第47-48页 |
4.6 小结 | 第48-49页 |
试验结论与创新点 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-59页 |
附录 | 第59-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
个人简介 | 第69页 |