| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 多酚氧化酶概况及酚类降解的研究进展 | 第13-27页 |
| 1 多酚氧化酶的概况 | 第13-19页 |
| 1.1 多酚氧化酶的分布 | 第13-14页 |
| 1.2 多酚氧化酶的性质 | 第14-16页 |
| 1.3 多酚氧化酶机理研究 | 第16页 |
| 1.4 多酚氧化酶的功能研究 | 第16-17页 |
| 1.5 多酚氧化酶基因的研究进展 | 第17-19页 |
| 2 环境污染 | 第19-21页 |
| 2.1 环境污染的现状 | 第19-20页 |
| 2.2 环境治理方法 | 第20-21页 |
| 3 酚类化合物治理的研究现状 | 第21-24页 |
| 3.1 化学法对酚类化合物的治理 | 第21-22页 |
| 3.2 物理法对酚类化合物的治理 | 第22-23页 |
| 3.3 生物法对酚类化合物的治理 | 第23-24页 |
| 4 本课题研究的目的及其内容 | 第24-26页 |
| 4.1 本课题研究的目的 | 第24-25页 |
| 4.2 研究内容 | 第25-26页 |
| 5 本研究的技术路线 | 第26-27页 |
| 第二章 八棱海棠MDPPO2B、MDPPO3B基因的克隆与生物信息学分析 | 第27-43页 |
| 1 材料与方法 | 第28-32页 |
| 1.1 试验材料 | 第28页 |
| 1.2 克隆及测序 | 第28-31页 |
| 1.3 基因的改造 | 第31-32页 |
| 1.4 序列测定 | 第32页 |
| 1.5 DNA序列相似性用DNAman软件比对 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-40页 |
| 2.1 MdPPO2B、MdPPO3B基因的克隆 | 第33页 |
| 2.2 MdPPO2B、MdPPO3B基因的序列分析 | 第33-37页 |
| 2.3 MdPPO2B、MdPPO3B一级结构分析 | 第37-38页 |
| 2.4 MdPPO2B、MdPPO3B二级和三级结构分析 | 第38-40页 |
| 3 讨论 | 第40-43页 |
| 第三章 八棱海棠PPO的甲醇酵母分泌表达和纯化 | 第43-55页 |
| 1 材料与方法 | 第44-50页 |
| 1.1 实验材料 | 第44页 |
| 1.2 实验方法 | 第44-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-52页 |
| 2.1 载体pPIC9K连接 | 第50-51页 |
| 2.2 阳性克隆子的筛选 | 第51页 |
| 2.3 电泳验证和蛋白定量 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| 第四章 八棱海棠多酚氧化酶酶学性质 | 第55-67页 |
| 1 材料与方法 | 第56-58页 |
| 1.1 试验材料 | 第56页 |
| 1.2 试验试剂 | 第56页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第56页 |
| 1.4 试验方法 | 第56-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-64页 |
| 2.1 八棱海棠PPO最适pH值 | 第58-59页 |
| 2.2 八棱海棠PPO最适温度和热稳定性 | 第59-61页 |
| 2.3 金属离子和抑制剂对八棱海棠PPO活力的影响 | 第61-63页 |
| 2.4 PPO两种底物的酶学动力参数 | 第63-64页 |
| 3 讨论 | 第64-67页 |
| 第五章 八棱海棠MdPPO2B、MdPPO3B基因提高拟南芥对酚类物质的抗性 | 第67-87页 |
| 1 材料与方法 | 第68-73页 |
| 1.1 实验材料 | 第68-70页 |
| 1.2 实验方法 | 第70-73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-85页 |
| 2.1 MdPPO2B、MdPPO3B农杆菌双元载体建立 | 第73-75页 |
| 2.2 转基因植株的筛选 | 第75-76页 |
| 2.3 转基因植株PCR检测 | 第76-77页 |
| 2.4 转基因植株在含有酚类平板上的抗性观察 | 第77-80页 |
| 2.5 转基因植株在含有酚类土壤中的苯酚抗性观察 | 第80-83页 |
| 2.6 转基因植株在液体培养系统中的苯酚抗性观察 | 第83-85页 |
| 3 讨论 | 第85-87页 |
| 全文结论 | 第87-89页 |
| 本文创新点 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-105页 |
| 博士期间发表文章 | 第105-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
