| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 课题研究背景与意义 | 第12-13页 |
| 1.1.1 研究背景 | 第12-13页 |
| 1.1.2 研究意义 | 第13页 |
| 1.2 微囊藻毒素简介 | 第13-15页 |
| 1.2.1 MCs的产生 | 第13-14页 |
| 1.2.2 MCs的结构特点 | 第14-15页 |
| 1.2.3 MCs的毒性 | 第15页 |
| 1.3 碳纳米管材料去除MCs研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 微生物去除MCs研究进展 | 第16-18页 |
| 1.5 酶降解MCs分子机理研究进展 | 第18-19页 |
| 1.6 重组蛋白纯化研究进展 | 第19-20页 |
| 1.7 USTB-05 菌株的简介 | 第20-21页 |
| 1.8 USTB-05 菌降解MCs基因简介 | 第21页 |
| 1.9 研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 USTB-05 降解微囊藻毒素特性研究 | 第22-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 试剂药品 | 第22-23页 |
| 2.1.2 MC-LR标准品 | 第23页 |
| 2.1.3 菌的来源 | 第23页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-27页 |
| 2.2.1 高效液相色谱仪分析测定条件 | 第23-24页 |
| 2.2.2 MC-LR的定量测定 | 第24页 |
| 2.2.3 菌种培养基及培养条件 | 第24-25页 |
| 2.2.4 MCs提取提纯 | 第25页 |
| 2.2.5 USTB-05 菌降解MC-LR的实验 | 第25页 |
| 2.2.6 USTB-05 菌无细胞提取液提取 | 第25-26页 |
| 2.2.7 USTB-05 菌蛋白浓度测定 | 第26-27页 |
| 2.2.8 不同浓度酶降解MC-LR | 第27页 |
| 2.2.9 碳纳米管对酶的吸附 | 第27页 |
| 2.2.10 碳纳米管加载USTB-05 酶降解MC-LR | 第27页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第27-31页 |
| 2.3.1 USTB-05 菌降解MC-LR特性分析 | 第27-28页 |
| 2.3.2 不同浓度USTB-05 粗酶降解MC-LR的效果 | 第28-29页 |
| 2.3.3 不同规格的碳纳米管对蛋白酶的吸附作用 | 第29-30页 |
| 2.3.4 不同规格的碳纳米管加载蛋白酶降解MC-LR效果 | 第30-31页 |
| 2.4 本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 降解基因克隆表达与蛋白酶的纯化 | 第32-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 3.1.1 试剂药品 | 第32-33页 |
| 3.1.2 菌和载体的来源 | 第33页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-39页 |
| 3.2.1 试剂的配制 | 第33-34页 |
| 3.2.2 引物设计 | 第34页 |
| 3.2.3 PCR扩增 | 第34-35页 |
| 3.2.4 DNA凝胶电泳 | 第35页 |
| 3.2.5 目的片段的回收 | 第35-36页 |
| 3.2.6 PCR产物及质粒双酶切 | 第36页 |
| 3.2.7 重组质粒的构建 | 第36页 |
| 3.2.8 连接产物转化至感受态细胞 | 第36-37页 |
| 3.2.9 重组菌目的蛋白电泳检测 | 第37-38页 |
| 3.2.10 重组菌目的蛋白诱导表达 | 第38-39页 |
| 3.2.11 重组菌扩大培养及目的蛋白纯化 | 第39页 |
| 3.2.12 重组菌蛋白浓度及纯度测定 | 第39页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第39-47页 |
| 3.3.1 目的基因PCR电泳验证 | 第39-41页 |
| 3.3.2 重组菌目的蛋白诱导表达 | 第41-42页 |
| 3.3.3 重组菌目的蛋白纯化 | 第42-45页 |
| 3.3.4 重组菌蛋白浓度及纯度测定 | 第45-47页 |
| 3.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 重组菌降解微囊藻毒素特性研究 | 第48-56页 |
| 4.1 实验材料 | 第48页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第48页 |
| 4.1.2 仪器 | 第48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-50页 |
| 4.2.1 菌种培养基及培养条件 | 第48页 |
| 4.2.2 重组菌无细胞提取液提取 | 第48-49页 |
| 4.2.3 菌降解MC-LR实验 | 第49页 |
| 4.2.4 重组菌诱导实验 | 第49-50页 |
| 4.2.5 不同浓度蛋白酶降解MC-LR | 第50页 |
| 4.2.6 碳纳米管对蛋白酶的吸附实验 | 第50页 |
| 4.2.7 碳纳米管加载蛋白酶降解MC-LR | 第50页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第50-55页 |
| 4.3.1 重组菌降解MC-LR分析 | 第50-51页 |
| 4.3.2 碳纳米管对重组菌降解MC-LR的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.3 诱导剂IPTG对重组菌降解MC-LR的影响 | 第52-53页 |
| 4.3.4 不同浓度重组菌蛋白酶降解MC-LR的效果 | 第53页 |
| 4.3.5 不同规格的碳纳米管对蛋白酶的吸附作用 | 第53-54页 |
| 4.3.6 不同规格的碳纳米管加载蛋白酶降解MC-LR效果 | 第54-55页 |
| 4.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第五章 USTB-05 降解微囊藻毒素酶学途径研究 | 第56-63页 |
| 5.1 实验材料 | 第56页 |
| 5.1.1 实验试剂 | 第56页 |
| 5.1.2 仪器 | 第56页 |
| 5.2 实验方法 | 第56-58页 |
| 5.2.1 重组菌A蛋白酶降解MC-LR实验 | 第56页 |
| 5.2.2 重组菌B蛋白酶降解产物A实验 | 第56-57页 |
| 5.2.3 重组菌C蛋白酶降解产物B和产物A实验 | 第57-58页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第58-62页 |
| 5.3.1 重组菌A蛋白酶降解MC-LR分析 | 第58页 |
| 5.3.2 重组菌B蛋白酶催化降解产物A分析 | 第58-59页 |
| 5.3.3 重组菌C蛋白酶催化降解产物B分析 | 第59-60页 |
| 5.3.4 重组菌C蛋白酶催化降解产物A分析 | 第60-61页 |
| 5.3.5 USTB-05 菌降解MC-LR酶学途径讨论 | 第61-62页 |
| 5.4 本章小结 | 第62-63页 |
| 第六章 结论与展望 | 第63-65页 |
| 6.1 主要结论 | 第63-64页 |
| 6.2 展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录A USTB05A基因序列 | 第71页 |
| 附录B USTB05B基因序列 | 第71-73页 |
| 附录C USTB05C基因序列 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第76-77页 |
