| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-20页 |
| ·蜡梅(Chimonanthus praecox(L.) Link)简介 | 第10页 |
| ·蛋白酶抑制剂的分布及分类 | 第10-11页 |
| ·蛋白酶抑制剂的作用机理 | 第11页 |
| ·蛋白酶抑制剂的应用进展 | 第11-13页 |
| ·蛋白酶抑制剂抗虫基因工程应用进展 | 第11-12页 |
| ·在大肠杆菌中表达的产物的应用 | 第12页 |
| ·在临床医学方面 | 第12-13页 |
| ·作为饲料方面 | 第13页 |
| ·其他作用 | 第13页 |
| ·蛋白酶抑制剂的表达调控 | 第13-20页 |
| ·植物蛋白酶抑制剂抗虫转基因工程表达调控存在的问题 | 第13-15页 |
| ·植物蛋白酶抑制剂抗虫转基因工程表达调控的对策分析 | 第15-20页 |
| 2 引言 | 第20-24页 |
| ·研究背景及意义 | 第20-22页 |
| ·技术路线 | 第22-24页 |
| 3 蜡梅CpKTI的克隆与分子特性 | 第24-38页 |
| ·技术路线 | 第24页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·蜡梅花cDNA文库 | 第24页 |
| ·菌株与载体 | 第24页 |
| ·主要生化试剂及仪器设备 | 第24-25页 |
| ·试验常用溶剂配方 | 第25页 |
| ·基本培养基配方 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-29页 |
| ·EST序列特征分析 | 第26页 |
| ·蜡梅CpKTI基因的cDNA获得 | 第26-29页 |
| ·CpKTI基因cDNA生物信息学分析 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-37页 |
| ·蜡梅CpKTI基因全长的获得与cDNA序列结构特征 | 第29-30页 |
| ·CpKTI基因编码蛋白信息学分析 | 第30-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 4 植物表达载体构建与转基因烟草的获得和分析 | 第38-52页 |
| ·技术路线 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38-40页 |
| ·植物材料 | 第38页 |
| ·菌株和载体 | 第38页 |
| ·主要生化试剂 | 第38页 |
| ·试验常用溶剂配方 | 第38-39页 |
| ·基本培养基配方 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-45页 |
| ·CpKTI基因植物表达载体构建 | 第40-42页 |
| ·基因导入烟草及转化植株的获得 | 第42-43页 |
| ·转基因烟草移栽 | 第43页 |
| ·转基因烟草的检测 | 第43-44页 |
| ·蜡梅CpKTI基因烟草的抗虫试验 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-51页 |
| ·表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·蜡梅CpKTI基因导入烟草及转化植株的获得 | 第46-50页 |
| ·蜡梅CpKTI基因抗虫性检测 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·pCAMBIA2301-CpKTI植物表达载体构建与转基因植物的获得 | 第51页 |
| ·转基因烟草抗虫性分析 | 第51-52页 |
| 5 原核表达载体的构建与蛋白诱导 | 第52-60页 |
| ·技术路线 | 第52页 |
| ·实验材料 | 第52-54页 |
| ·菌株与载体 | 第52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·主要设备 | 第52-53页 |
| ·自配试剂 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-57页 |
| ·目的蛋白引物设计 | 第54-55页 |
| ·原核表达载体构建 | 第55-56页 |
| ·诱导重组载体的融合蛋白表达 | 第56-57页 |
| ·SDS-PAGE检测表达产物 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-59页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第57-58页 |
| ·重组质粒PET-32a(+)-CpKTI在BL21中的诱导表达和检测 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| 6 下一步研究计划 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 缩略词表 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 在学期间发表的文章和参加的课题 | 第72页 |
