| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 符号与缩略语说明 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-33页 |
| 1 百菌清及其降解特性研究 | 第15-21页 |
| 1.1 百菌清概述 | 第15页 |
| 1.2 百菌清的环境残留及危害 | 第15-16页 |
| 1.3 百菌清生物降解研究进展 | 第16-21页 |
| 2 枯草芽孢杆菌WB800作为基因工程菌的应用进展 | 第21-22页 |
| 3 菌株发酵产酶研究 | 第22-24页 |
| 3.1 液态发酵产酶研究 | 第22-23页 |
| 3.2 固态发酵产酶研究 | 第23-24页 |
| 4 酶降解蔬菜中农药残留的研究进展 | 第24页 |
| 5 本课题的研究意义及主要研究内容 | 第24-27页 |
| 5.1 研究意义 | 第24-25页 |
| 5.2 主要研究内容与技术路线 | 第25-27页 |
| 参考文献 | 第27-33页 |
| 第二章 百菌清水解脱氯酶(Chd)在重组枯草芽孢杆菌中的分泌表达 | 第33-47页 |
| 1 材料与方法 | 第33-39页 |
| 1.1 材料 | 第33-34页 |
| 1.2 实验方法 | 第34-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-42页 |
| 2.1 百菌清水解脱氯酶基因的PCR扩增 | 第39-40页 |
| 2.2 穿梭表达载体pP_(43)Chd的构建及鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3 Chd在WB800 (pP_(43)Chd)的重组表达和分泌 | 第41页 |
| 2.4 Chd在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中表达的SDS-PAGE分析 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-43页 |
| 4 本章小结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 第三章 重组枯草芽孢杆菌WB800 (pP43Chd)产Chd液态发酵条件优化 | 第47-75页 |
| 1 材料与方法 | 第47-56页 |
| 1.1 材料 | 第47-48页 |
| 1.2 实验方法 | 第48-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-70页 |
| 2.1 百菌清农药标准曲线的绘制 | 第56-57页 |
| 2.2 Bradford法蛋白定量标准曲线的绘制 | 第57页 |
| 2.3 WB800 (pP_(43)Chd)生长曲线、产酶曲线绘制及最佳种龄的确定 | 第57-58页 |
| 2.4 WB800 (pP_(43)Chd)中质粒的稳定性验证 | 第58-59页 |
| 2.5 单因素实验结果 | 第59-64页 |
| 2.6 PB实验 | 第64-65页 |
| 2.7 BBD实验结果 | 第65-68页 |
| 2.8 最优化条件验证实验 | 第68页 |
| 2.9 Chd蛋白表达量的初步确定 | 第68-69页 |
| 2.10 重组枯草芽孢杆菌WB800 (pP_(43)Chd)发酵优化前后产Chd酶曲线 | 第69页 |
| 2.11 Chd粗酶产品的制备 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70页 |
| 4 本章小结 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-75页 |
| 第四章 重组枯草芽孢杆菌WB800 (pP_(43)Chd)产Chd固态发酵条件优化 | 第75-91页 |
| 1 材料与方法 | 第75-79页 |
| 1.1 材料 | 第75-76页 |
| 1.2 实验方法 | 第76-79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-87页 |
| 2.1 培养基组分及发酵条件优化 | 第79-83页 |
| 2.2 固体基质物理因素优化 | 第83-86页 |
| 2.3 最优条件的固态发酵实验 | 第86-87页 |
| 3 讨论 | 第87页 |
| 4 本章小结 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-91页 |
| 第五章 Chd降解蔬菜表面百菌清农药残留研究 | 第91-99页 |
| 1 材料与方法 | 第91-93页 |
| 1.1 材料 | 第91-92页 |
| 1.2 实验方法 | 第92-93页 |
| 2 结果与分析 | 第93-96页 |
| 2.1 蔬菜中百菌清残留的测定 | 第93-94页 |
| 2.2 Chd酶解液中百菌清含量的测定 | 第94-95页 |
| 2.3 酶解过程中残余Chd酶液酶活随时间变化曲线 | 第95-96页 |
| 3 讨论 | 第96页 |
| 4 本章小结 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-99页 |
| 第六章 全文总结 | 第99-101页 |
| 1 全文研究内容总结、讨论与展望 | 第99-100页 |
| 2 本论文研究的主要创新点 | 第100-101页 |
| 附录一 文中所用培养基及试剂配方 | 第101-103页 |
| 附录二 枯草芽孢杆菌普通化学感受态制备 | 第103-105页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第105-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
