摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略词表及其英汉对照 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1 非生物胁迫对植物的影响 | 第11-12页 |
1.1 对植物生长发育的影响 | 第11页 |
1.2 对植物光合作用的影响 | 第11-12页 |
1.3 对植物呼吸作用的影响 | 第12页 |
2 植物抵御非生物胁迫调节机理 | 第12-14页 |
2.1 渗透调节 | 第12-13页 |
2.2 激素调节 | 第13页 |
2.3 抗氧化系统 | 第13-14页 |
2.4 光合途径改变 | 第14页 |
3 植物耐非生物胁迫相关基因 | 第14-20页 |
3.1 渗透调节基因 | 第15-17页 |
3.1.1 脯氨酸合成相关基因 | 第15-16页 |
3.1.2 甜菜碱合成相关基因 | 第16-17页 |
3.1.3 甘露醇合成相关基因 | 第17页 |
3.2 转录因子 | 第17-19页 |
3.3 抗氧化相关基因 | 第19-20页 |
3.4 离子平衡相关基因 | 第20页 |
3.5 保护酶基因 | 第20页 |
4 SABP2研究进展 | 第20-21页 |
5 本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
第二章 大豆GmSABP2的克隆及表达分析 | 第23-35页 |
1 材料与方法 | 第23-29页 |
1.1 植物材料 | 第23页 |
1.2 载体及菌株 | 第23页 |
1.3 主要试剂 | 第23页 |
1.4 大豆GmSABP2的克隆 | 第23-27页 |
1.4.1 大豆幼苗的生长 | 第23页 |
1.4.2 总RNA的提取 | 第23-24页 |
1.4.3 RNA检测 | 第24页 |
1.4.4 反转录获得cDNA | 第24-25页 |
1.4.5 引物设计 | 第25页 |
1.4.6 PCR扩增及胶回收 | 第25-26页 |
1.4.7 PCR产物的连接及转化 | 第26-27页 |
1.4.8 基因的序列分析 | 第27页 |
1.5 大豆GmSABP2的表达特性分析 | 第27-29页 |
1.5.1 植物材料处理 | 第27页 |
1.5.2 总RNA提取 | 第27页 |
1.5.3 RNA检测 | 第27页 |
1.5.4 反转录获得cDNA | 第27-28页 |
1.5.5 引物设计 | 第28-29页 |
1.5.6 实时荧光定量PCR | 第29页 |
2 结果与分析 | 第29-33页 |
2.1 大豆GmSABP2的克隆及序列分析 | 第29-30页 |
2.2 大豆GmSABP2的多序列比对及系统进化分析 | 第30-32页 |
2.3 大豆GmSABP2基因的表达分析 | 第32-33页 |
3 讨论 | 第33-35页 |
第三章 大豆GmSABP2转拟南芥及功能分析 | 第35-49页 |
1 材料与方法 | 第35-42页 |
1.1 植物材料 | 第35页 |
1.2 载体及菌株 | 第35页 |
1.3 主要分子生物学试剂 | 第35页 |
1.4 植物表达载体的构建 | 第35-38页 |
1.4.1 含attB接头的GmSABP2基因的克隆 | 第36-37页 |
1.4.2 BP反应 | 第37页 |
1.4.3 LR反应 | 第37-38页 |
1.5 重组质粒转化根癌农杆菌EHA105 | 第38-39页 |
1.5.1 根癌农杆菌EHA105感受态的制备 | 第38-39页 |
1.5.2 重组质粒转化根癌农杆菌EHA105 | 第39页 |
1.6 GmSABP2基因转化拟南芥 | 第39-41页 |
1.6.1 拟南芥的培养 | 第39页 |
1.6.2 拟南芥的侵染 | 第39-40页 |
1.6.3 T_1代转基因拟南芥的筛选 | 第40页 |
1.6.4 T_1代转基因拟南芥的PCR检测 | 第40-41页 |
1.6.5 转基因拟南芥的纯化 | 第41页 |
1.7 转基因转化拟南芥的抗性分析 | 第41-42页 |
1.7.1 非生物胁迫下种子萌发率的分析 | 第41页 |
1.7.2 非生物胁迫下植株主根长测定 | 第41-42页 |
1.7.3 非生物胁迫下成熟植株的抗性分析 | 第42页 |
2 结果与分析 | 第42-46页 |
2.1 植物表达载体的构建 | 第42-43页 |
2.2 转基因拟南芥植株的获得及PCR检测 | 第43页 |
2.3 转基因拟南芥植株的抗性分析 | 第43-46页 |
2.3.1 非生物胁迫下种子萌发率的分析 | 第43-44页 |
2.3.2 非生物胁迫下主根长的分析 | 第44-45页 |
2.3.3 非生物胁迫下成熟植株的抗性分析 | 第45-46页 |
3 讨论 | 第46-49页 |
全文结论 | 第49-51页 |
本研究创新之处 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
致谢 | 第61页 |