摘要 | 第8-10页 |
中英文对照及缩写表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-24页 |
1. 动物miRNA的生物学特征 | 第11-14页 |
1.1 miRNA的发现与命名 | 第11-12页 |
1.1.1 miRNA的发现 | 第11页 |
1.1.2 miRNA的命名 | 第11-12页 |
1.2 miRNA的生成及作用机制 | 第12-14页 |
1.2.1 miRNA生物学加工过程 | 第12-13页 |
1.2.2 miRNA调控基因表达的机制 | 第13-14页 |
2 脂肪组织形成的过程 | 第14-16页 |
3 miRNA在脂肪生成中的作用 | 第16-18页 |
3.1 促进脂肪细胞分化的miRNA | 第16-17页 |
3.2 抑制脂肪细胞分化的miRNA | 第17-18页 |
4 本研究的目的、意义和内容 | 第18-19页 |
参考文献 | 第19-24页 |
第二章 广灵大尾羊不同部位脂肪组织miRNA高通量测序及生物信息学分析 | 第24-42页 |
1 材料与方法 | 第24-31页 |
1.1 试验动物 | 第24-25页 |
1.2 试验试剂、仪器及耗材 | 第25页 |
1.3 试验所用溶液的配制 | 第25-26页 |
1.4 试验方法 | 第26-29页 |
1.4.1 总RNA的提取流程及其质量检测 | 第26页 |
1.4.2 构建绵羊脂肪组织小RNA文库 | 第26-29页 |
1.4.3 构建小RNA文库所需的引物 | 第29页 |
1.5 生物信息学分析 | 第29-31页 |
1.5.1 绵羊保守miRNAs的鉴定 | 第29页 |
1.5.2 统计不同部位脂肪组织中特异表达的miRNA | 第29-30页 |
1.5.3 绵羊新miRNAs的预测 | 第30页 |
1.5.4 Stem-loop qRT-PCR验证 | 第30-31页 |
2 结果 | 第31-37页 |
2.1 总RNA样品的提取及完整性检测结果 | 第31-32页 |
2.2 Solexa测序结果 | 第32-33页 |
2.3 小RNA的分类注释结果 | 第33-34页 |
2.4 保守miRNA鉴定 | 第34-36页 |
2.5 预测的绵羊新miRNAs | 第36-37页 |
2.6 Stem-loop RT-PCR验证结果 | 第37页 |
3 讨论 | 第37-39页 |
4 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-42页 |
第三章 miRNAs的表达研究及功能预测 | 第42-61页 |
1 材料与方法 | 第42-47页 |
1.1 试验动物和样品采集 | 第42-43页 |
1.2 试验试剂、仪器 | 第43-44页 |
1.2.1 主要试验试剂 | 第43页 |
1.2.2 主要试验仪器 | 第43-44页 |
1.3 试验方法 | 第44-46页 |
1.3.1 总RNA的提取及质量检测 | 第44页 |
1.3.2 miRNA特异性反转录茎环引物的设计 | 第44页 |
1.3.3 荧光定量PCR引物设计 | 第44-45页 |
1.3.4 反转录 | 第45页 |
1.3.5 荧光定量PCR反应条件的优化 | 第45-46页 |
1.4 数据处理 | 第46页 |
1.5 miRNA靶基因预测、KEGG通路分析 | 第46-47页 |
2 结果 | 第47-55页 |
2.1 总RNA提取质量及引物特异性 | 第47页 |
2.2 品种、性别、月龄和组织对miRNA表达的影响 | 第47-49页 |
2.3 二因素互作对miRNA表的影响 | 第49-52页 |
2.4 miRNA靶基因预测结果与KEGG通路 | 第52-55页 |
3 讨论 | 第55-58页 |
3.1 品种对miRNA表达的影响 | 第55页 |
3.2 性别miRNA表达的影响 | 第55-56页 |
3.3 组织miRNA表达的影响 | 第56-57页 |
3.4 季节和营养对miRNA表达的影响 | 第57页 |
3.5 miRNAs潜在的生物学功能 | 第57-58页 |
4 小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-61页 |
全文结论 | 第61-62页 |
创新与特色 | 第62-63页 |
进一步的研究内容 | 第63-64页 |
附录 | 第64-66页 |
Abstract | 第66-67页 |
致谢 | 第68页 |