| 摘要 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 动物胚胎体外生产技术 | 第10页 |
| 1.2 肿瘤与胚胎的代谢相似性 | 第10-13页 |
| 1.2.1 能量代谢 | 第11页 |
| 1.2.2 葡萄糖代谢 | 第11-12页 |
| 1.2.3 氨基酸代谢 | 第12-13页 |
| 1.2.4 代谢调控方式的相似性 | 第13页 |
| 1.3 集落刺激因子对生殖活动调控的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.3.1 生殖道中CSFs的分布 | 第13-14页 |
| 1.3.2 集落刺激因子对生殖活动及功能的调控 | 第14-15页 |
| 1.3.3 集落刺激因子的应用 | 第15-16页 |
| 1.4 GM-CSF对哺乳动物附植前胚胎发育的影响 | 第16-19页 |
| 1.4.1 GM-CSF作用于附植前的胚胎对其后期发育情况的影响 | 第17页 |
| 1.4.2 GM-CSF对囊胚发育的调节 | 第17-18页 |
| 1.4.3 GM-CSF参与胚胎细胞的抗凋亡作用 | 第18页 |
| 1.4.4 GM-CSF对胚胎细胞多能性和分化的影响 | 第18-19页 |
| 1.4.5 GM-CSF调控胚胎发育的性别差异 | 第19页 |
| 1.4.6 GM-CSF影响胚胎发育(囊胚发育)的模型 | 第19页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 不同浓度GM-CSF对胚胎发育能力的影响 | 第21-30页 |
| 2.1 试验材料及仪器 | 第21-25页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第21页 |
| 2.1.3 主要药品及试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要试剂及培养液配制 | 第22-25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-26页 |
| 2.2.1 卵母细胞的采集 | 第25页 |
| 2.2.2 成熟卵母细胞的体外受精 | 第25-26页 |
| 2.2.3 胚胎体外培养 | 第26页 |
| 2.2.4 试验设计 | 第26页 |
| 2.2.5 数据统计 | 第26页 |
| 2.3 试验结果 | 第26-28页 |
| 不同浓度GM-CSF对牛体外培养胚胎发育(囊胚率)的影响 | 第26-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 GM-CSF对牛胚胎内源ROS、囊胚细胞数及凋亡率的影响 | 第30-38页 |
| 3.1 试验材料及仪器 | 第30页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第30页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第30页 |
| 3.1.3 主要药品及试剂 | 第30页 |
| 3.1.4 主要溶液及培养液配制 | 第30页 |
| 3.2 试验方法 | 第30-32页 |
| 3.2.1 卵母细胞的采集 | 第30页 |
| 3.2.2 成熟卵母细胞的体外受精 | 第30页 |
| 3.2.3 胚胎体外培养 | 第30页 |
| 3.2.4 胚胎内源性活性氧簇(ROS)检测 | 第30-31页 |
| 3.2.5 TUNEL检测囊胚细胞凋亡水平及细胞总数 | 第31-32页 |
| 3.2.6 试验设计 | 第32页 |
| 3.2.7 数据统计 | 第32页 |
| 3.3 试验结果 | 第32-35页 |
| 3.3.1 GM-CSF对囊胚内源性ROS水平的影响 | 第32-34页 |
| 3.3.2 GM-CSF对囊胚内细胞总数及凋亡率的影响 | 第34-35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-38页 |
| 第四章 GM-CSF对牛囊胚相关基因转录水平表达量的影响 | 第38-51页 |
| 4.1 试验材料及仪器 | 第38页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第38页 |
| 4.1.2 主要仪器设备 | 第38页 |
| 4.1.3 主要药品及试剂 | 第38页 |
| 4.1.4 主要溶液及培养液配制 | 第38页 |
| 4.2 试验方法 | 第38-43页 |
| 4.2.1 卵母细胞的采集 | 第38页 |
| 4.2.2 成熟卵母细胞的体外受精 | 第38页 |
| 4.2.3 胚胎体外培养 | 第38页 |
| 4.2.4 囊胚RNA提取及cDNA合成 | 第38-40页 |
| 4.2.5 荧光定量PCR检测相关基因的表达 | 第40-43页 |
| 4.3 试验结果 | 第43-47页 |
| 4.3.1 样品总RNA提取及普通PCR检测 | 第43页 |
| 4.3.2 qRT-PCR标准曲线的建立 | 第43-45页 |
| 4.3.3 GM-CSF对囊胚基因表达水平的影响 | 第45-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-51页 |
| 第五章 全文结论 | 第51-52页 |
| 后期研究设想 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| Abstract | 第62-63页 |
| 致谢 | 第64页 |
