| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-27页 |
| ·动物性食品兽药残留现状 | 第15页 |
| ·兽药残留危害 | 第15-17页 |
| ·毒性作用 | 第15-16页 |
| ·过敏反应 | 第16页 |
| ·诱导细菌耐药性 | 第16页 |
| ·对环境的影响 | 第16-17页 |
| ·氯霉素概况及危害 | 第17-18页 |
| ·理化性状 | 第17页 |
| ·抗菌作用 | 第17-18页 |
| ·代谢及残留危害 | 第18页 |
| ·氯霉素残留检测方法 | 第18-22页 |
| ·微生物法 | 第18-19页 |
| ·棉签法 | 第18-19页 |
| ·杯碟法 | 第19页 |
| ·色谱法 | 第19-21页 |
| ·高效液相色谱法 | 第19页 |
| ·气相色谱法 | 第19-20页 |
| ·联用技术 | 第20-21页 |
| ·免疫分析 | 第21-22页 |
| ·三类检测方法的优缺点比较 | 第22页 |
| ·小分子人工抗原合成进展 | 第22-24页 |
| ·人工抗原改造 | 第22-23页 |
| ·影响人工抗原质量的因素 | 第23-24页 |
| ·选题意义及拟采用的技术路线图 | 第24-27页 |
| ·选题意义 | 第24-26页 |
| ·技术路线图 | 第26-27页 |
| 第二章 氯霉素多克隆抗体的制备 | 第27-38页 |
| ·试验材料与方法 | 第27-32页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·仪器与设备 | 第27-28页 |
| ·实验动物 | 第28页 |
| ·溶液系统 | 第28页 |
| ·其他材料 | 第28页 |
| ·氯霉素人工抗原的制备与鉴定 | 第28-30页 |
| ·氯霉素免疫抗原与包被抗原的制备 | 第28-29页 |
| ·紫外波长扫描 | 第29页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第29-30页 |
| ·飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)测定偶联率 | 第30页 |
| ·人工抗原蛋白浓度测定 | 第30页 |
| ·兔多抗血清的制备 | 第30-31页 |
| ·兔多抗血清筛选 | 第31-32页 |
| ·兔多抗血清效价测定 | 第31页 |
| ·抗血清亲和性测定 | 第31-32页 |
| ·试验结果 | 第32-36页 |
| ·人工抗原的鉴定 | 第32-35页 |
| ·紫外扫描法 | 第32-33页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第33页 |
| ·MALDI-TOFMS图谱 | 第33-34页 |
| ·人工抗原蛋白浓度测定 | 第34-35页 |
| ·多抗血清检测 | 第35-36页 |
| ·血清效价检测 | 第35页 |
| ·血清亲和性试验 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 氯霉素兔单克隆抗体的制备及ELISA方法的建立 | 第38-66页 |
| ·材料与方法 | 第38-47页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要设备 | 第38页 |
| ·细胞 | 第38-39页 |
| ·细胞融合 | 第39页 |
| ·交瘤细胞筛选 | 第39-40页 |
| ·重组抗体技术生产氯霉素单克隆抗体 | 第40-42页 |
| ·ELISA检测方法的建立与优化 | 第42-45页 |
| ·包被抗原最佳浓度 | 第42-43页 |
| ·一抗最佳浓度 | 第43页 |
| ·包被条件的优化 | 第43-44页 |
| ·封闭液的确定 | 第44页 |
| ·洗液中Tween-20含量的确定 | 第44页 |
| ·TBS缓冲液钠离子浓度 | 第44页 |
| ·缓冲液pH | 第44页 |
| ·竞争时间的优化 | 第44-45页 |
| ·HRP-IgG反应时间 | 第45页 |
| ·显色时间 | 第45页 |
| ·TMB存储液与底物缓冲液比例 | 第45页 |
| ·优化后的间接竞争ELISA检测方法 | 第45页 |
| ·CAP单克隆抗体免疫学性质鉴定 | 第45-46页 |
| ·单抗亲和性试验 | 第45页 |
| ·单抗特异性试验 | 第45页 |
| ·氯霉素标准曲线的建立 | 第45-46页 |
| ·CAP回收率的测定 | 第46-47页 |
| ·猪尿样品处理及标准曲线的建立 | 第46页 |
| ·牛奶样品处理及标准曲线的建立 | 第46页 |
| ·蜂蜜样品处理及标准曲线的建立 | 第46页 |
| ·ELISA准确度测定 | 第46-47页 |
| ·ELISA精密度测定 | 第47页 |
| ·试验结果 | 第47-64页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选与克隆 | 第47-48页 |
| ·重组抗体技术生产氯霉素单克隆抗体 | 第48-52页 |
| ·小转检测结果 | 第48-51页 |
| ·大转检测结果 | 第51-52页 |
| ·ELISA条件优化 | 第52-58页 |
| ·最佳包被抗原浓度 | 第52页 |
| ·一抗浓度的确定 | 第52-53页 |
| ·最佳包被条件的确定 | 第53页 |
| ·封闭液种类和浓度 | 第53-54页 |
| ·Tween-20含量 | 第54页 |
| ·Na离子浓度的筛选 | 第54-55页 |
| ·缓冲液体pH的选择 | 第55-56页 |
| ·竞争时间的确定 | 第56页 |
| ·HRP-IgG反应时间的确定 | 第56-57页 |
| ·显色时间的确定 | 第57页 |
| ·TMB存储液与底物缓冲液比例 | 第57-58页 |
| ·优化以后的间接竞争ELISA检测条件 | 第58页 |
| ·单克隆抗体免疫学性质鉴定 | 第58-61页 |
| ·单抗对氯霉素的亲和能力测定 | 第58-59页 |
| ·特异性试验 | 第59-60页 |
| ·氯霉素单克隆抗体间接竞争标准曲线的建立 | 第60-61页 |
| ·CAP回收率试验 | 第61-64页 |
| ·猪尿样品检测结果 | 第61-62页 |
| ·新鲜牛奶样品检测结果 | 第62-63页 |
| ·蜂蜜样品检测结果 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| 第四章 结论与展望 | 第66-70页 |
| ·人工抗原的合成及鉴定 | 第66页 |
| ·多抗血清检测及脾细胞筛选 | 第66页 |
| ·氯霉素兔单克隆抗体的制备 | 第66-67页 |
| ·ELISA检测条件优化及标准曲线制作 | 第67页 |
| ·CAP回收率试验 | 第67-68页 |
| ·创新性 | 第68-69页 |
| ·研究展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 作者简历 | 第75页 |