| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 猪细小病毒的研究进展 | 第13-37页 |
| (一) 猪细小病毒1型 | 第13-26页 |
| 1 PPV1病原学特性 | 第13-21页 |
| ·病毒分类 | 第13-14页 |
| ·病毒形态与理化特性 | 第14页 |
| ·PPV1分子生物学研究进展 | 第14-17页 |
| ·抗原性 | 第17页 |
| ·PPV1致病性与组织嗜性 | 第17-19页 |
| ·PPV1体外培养特性 | 第19页 |
| ·PPV1流行病学特性 | 第19-21页 |
| 2 PPV1诊断方法 | 第21-23页 |
| ·病毒分离 | 第21页 |
| ·血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验 | 第21页 |
| ·中和试验(SN) | 第21页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第21-22页 |
| ·乳胶凝集试验(LAT) | 第22页 |
| ·胶体金标记技术(SECGA) | 第22页 |
| ·聚合酶链式反应检测技术(PCR) | 第22页 |
| ·核酸探针技术 | 第22-23页 |
| ·免疫荧光技术(IFA) | 第23页 |
| 3 PPV1疫苗研究 | 第23-26页 |
| ·弱毒疫苗 | 第23-24页 |
| ·灭活疫苗 | 第24-25页 |
| ·基因工程疫苗 | 第25-26页 |
| (二) 猪细小病毒2型 | 第26页 |
| (三) 猪细小病毒3型 | 第26-27页 |
| (四) 猪细小病毒4型 | 第27-28页 |
| (五) 猪类博卡病毒 | 第28-29页 |
| (六) 猪博卡病毒 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-37页 |
| 第二章 新型猪细小病毒的分子流行病学调查 | 第37-55页 |
| 摘要 | 第37-38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·病料 | 第38-39页 |
| ·试剂 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-41页 |
| ·DNA的提取 | 第39页 |
| ·PCR检测 | 第39-40页 |
| ·序列测定 | 第40-41页 |
| 2 结果 | 第41-45页 |
| ·PCR结果 | 第41-44页 |
| ·PPV2感染情况 | 第41-42页 |
| ·PPV3感染情况 | 第42页 |
| ·PPV4感染情况 | 第42页 |
| ·PBo-likeV感染情况 | 第42-43页 |
| ·PBoV感染情况 | 第43-44页 |
| ·测序结果 | 第44-45页 |
| ·PPV2变异程度 | 第44-45页 |
| ·PPV3变异程度 | 第45页 |
| ·PPV4变异程度 | 第45页 |
| ·PBo-likeV变异程度 | 第45页 |
| ·PBoV变异程度 | 第45页 |
| 3 讨论 | 第45-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| ABSTRACT | 第54-55页 |
| 第三章 猪细小病毒3型VP2蛋白的原核表达与免疫特性研究 | 第55-73页 |
| 摘要 | 第55页 |
| 1 材料与方法 | 第55-63页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·实验动物 | 第55-56页 |
| ·主要试剂 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-63页 |
| ·重组质粒的构建 | 第56-59页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第59页 |
| ·重组质粒的转化 | 第59页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第59-61页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第61-62页 |
| ·小鼠免疫试验 | 第62-63页 |
| 2 试验结果 | 第63-70页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第63-65页 |
| ·目的基因的扩增 | 第63页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第63-65页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第65页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第65-68页 |
| ·重组蛋白的表达鉴定 | 第65-66页 |
| ·重组蛋白表达条件的优化 | 第66-68页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第68-69页 |
| ·抗体效价测定 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-72页 |
| ABSTRACT | 第72-73页 |
| 第四章 猪细小病毒3型VP2蛋白的真核表达与免疫特性研究 | 第73-95页 |
| 摘要 | 第73-74页 |
| 1 材料与方法 | 第74-83页 |
| ·材料 | 第74-75页 |
| ·实验动物 | 第74页 |
| ·主要试剂 | 第74-75页 |
| ·方法 | 第75-83页 |
| ·重组质粒的构建 | 第75-77页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第77-78页 |
| ·重组Bacmid的构建与鉴定 | 第78-79页 |
| ·重组杆状病毒的获得与扩增 | 第79-80页 |
| ·重组蛋白在Sf9细胞中的表达和鉴定 | 第80-81页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第81页 |
| ·免疫特性的研究 | 第81-83页 |
| 2 试验结果 | 第83-90页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第83-84页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第83-84页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第84页 |
| ·重组Bacmid的PCR鉴定 | 第84-86页 |
| ·重组蛋白的表达与鉴定 | 第86-87页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第87-89页 |
| ·真核蛋白免疫原性的研究 | 第89-90页 |
| ·抗体效价的测定 | 第89页 |
| ·细胞因子浓度的测定 | 第89-90页 |
| 3 讨论 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-94页 |
| ABSTRACT | 第94-95页 |
| 第五章 猪细小病毒3型间接ELISA抗体检测方法的建立和应用 | 第95-111页 |
| 摘要 | 第95页 |
| 1 材料与方法 | 第95-98页 |
| ·材料 | 第95-96页 |
| ·抗原与抗体 | 第95-96页 |
| ·试剂与仪器 | 第96页 |
| ·间接ELISA方法的建立及条件优化 | 第96-98页 |
| ·标准阴阳性血清的筛选 | 第96页 |
| ·抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的筛选 | 第96页 |
| ·最佳抗原包被条件的筛选 | 第96-97页 |
| ·最佳封闭液的筛选 | 第97页 |
| ·最佳封闭条件的筛选 | 第97页 |
| ·最佳一抗作用条件的筛选 | 第97页 |
| ·二抗最佳作用浓度的筛选 | 第97页 |
| ·二抗最佳作用条件的筛选 | 第97页 |
| ·最佳底物显色条件的筛选 | 第97页 |
| ·临界值的确定 | 第97-98页 |
| ·特异性试验 | 第98页 |
| ·重复性试验 | 第98页 |
| ·批内重复性试验 | 第98页 |
| ·批间重复性试验 | 第98页 |
| ·临床样品的检测 | 第98页 |
| 2 结果 | 第98-105页 |
| ·间接ELISA最佳反应条件的确定 | 第98-103页 |
| ·最佳抗原包被浓度和待检血清最佳稀释度的确定 | 第98-99页 |
| ·抗原最佳包被条件的确定 | 第99页 |
| ·最佳封闭液的确定 | 第99-100页 |
| ·最佳封闭条件的确定 | 第100页 |
| ·最佳血清作用条件的确定 | 第100-101页 |
| ·HRP-SPA最佳稀释度的确定 | 第101页 |
| ·HRP-SPA最佳反应条件的确定 | 第101-102页 |
| ·TMB最佳显色条件的确定 | 第102页 |
| ·临界值的确定 | 第102-103页 |
| ·特异性试验 | 第103页 |
| ·重复性试验 | 第103-104页 |
| ·批内重复性试验 | 第103-104页 |
| ·批间重复性试验 | 第104页 |
| ·临床血清样品的检测 | 第104-105页 |
| 3 讨论 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-109页 |
| ABSTRACT | 第109-111页 |
| 全文总结 | 第111-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
