基于胞内蛋白质平衡的酿酒酵母耐热性研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-29页 |
| ·热胁迫 | 第14-15页 |
| ·酵母耐热性研究 | 第15-17页 |
| ·适应性进化 | 第15-16页 |
| ·基因组改组技术 | 第16页 |
| ·自然选育及诱变育种 | 第16-17页 |
| ·整体转录系统工程 | 第17页 |
| ·合成生物学 | 第17页 |
| ·酵母耐热机制 | 第17-20页 |
| ·热休克应答 | 第18页 |
| ·热激蛋白 | 第18-19页 |
| ·海藻糖与酵母热耐受性 | 第19-20页 |
| ·其他胁迫相关物质与酵母耐热性 | 第20页 |
| ·细胞蛋白质质量控制系统 | 第20-23页 |
| ·分子伴侣 | 第21页 |
| ·26S泛素蛋白酶体系统 | 第21-22页 |
| ·细胞自噬系统 | 第22-23页 |
| ·基因线路的设计与组装 | 第23-27页 |
| ·基因元件的设计 | 第23页 |
| ·多种DNA拼接技术 | 第23-26页 |
| ·底盘宿主的改造 | 第26-27页 |
| ·论文选题依据及研究内容 | 第27-29页 |
| ·选题依据 | 第27页 |
| ·研究内容 | 第27-29页 |
| 第2章 材料与方法 | 第29-46页 |
| ·材料 | 第29-33页 |
| ·菌株与质粒 | 第29页 |
| ·药品与试剂 | 第29-30页 |
| ·仪器与设备 | 第30-32页 |
| ·培养基 | 第32页 |
| ·主要溶液 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-46页 |
| ·菌株的活化 | 第33-34页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| ·细胞的转化 | 第35页 |
| ·酿酒酵母基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
| ·质粒的提取 | 第36-37页 |
| ·酿酒酵母RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·RNA的反转录 | 第38-39页 |
| ·PCR | 第39-43页 |
| ·酿酒酵母的高温培养 | 第43-44页 |
| ·热激存活率测定 | 第44页 |
| ·涂布平板法活菌数的测定 | 第44页 |
| ·代谢关键酶酶活性检测 | 第44-45页 |
| ·酿酒酵母的乙醇发酵 | 第45-46页 |
| 第3章 耐热PQC基因元器件的设计及性能验证 | 第46-63页 |
| 引言 | 第46页 |
| ·蛋白质质量控制相关基因的挖掘与整理 | 第46-47页 |
| ·PQC基因元器件的设计与构建 | 第47-55页 |
| ·蛋白质质量控制系统相关基因的克隆 | 第47-52页 |
| ·PQC基因元器件的设计与组装 | 第52-53页 |
| ·单功能耐热工程菌的构建 | 第53-55页 |
| ·工程菌梯度升温发酵与PQC基因元器件的筛选 | 第55-57页 |
| ·耐热工程菌生理特性分析 | 第57-62页 |
| ·耐热工程菌恒定高温培养 | 第57-58页 |
| ·耐热工程菌的热激存活率 | 第58-59页 |
| ·蛋白质质量控制系统相关基因转录水平的考察 | 第59-61页 |
| ·耐热工程菌细胞壁相关合成基因的转录水平 | 第61页 |
| ·耐热工程菌海藻糖合成相关基因的转录水平 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 第4章 多功能耐热PQC基因元器件设计与性能分析 | 第63-76页 |
| 引言 | 第63页 |
| ·多功能耐热工程菌的设计与构建 | 第63-68页 |
| ·启动子与终止子的选择 | 第63-64页 |
| ·多功能PQC基因元器件的组装 | 第64-68页 |
| ·酿酒酵母工程菌耐热性的验证 | 第68-72页 |
| ·耐热工程菌恒定高温培养的热稳定性 | 第68-70页 |
| ·耐热工程菌的细胞活力 | 第70页 |
| ·耐热工程菌的刚果红敏感性 | 第70-72页 |
| ·耐热酿酒酵母工程菌的乙醇发酵 | 第72-74页 |
| ·耐热酿酒酵母生长情况 | 第73-74页 |
| ·耐热酿酒酵母的乙醇产量 | 第74页 |
| ·小结 | 第74-76页 |
| 第5章 结论与展望 | 第76-78页 |
| ·结论 | 第76-77页 |
| ·展望 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-88页 |
| 作者简介 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
