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雷竹SVP-like、SOC1-like基因的克隆及功能分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 引言第10-22页
   ·研究的背景及意义第10页
   ·植物成花转变的研究第10-14页
     ·自主开花途径第11-12页
     ·春化途径第12页
     ·赤霉素途径第12-13页
     ·光周期途径第13-14页
   ·植物SVP及其同源基因的研究第14-18页
     ·SVP基因的结构第14-15页
     ·SVP基因的表达及功能第15-16页
     ·影响SVP基因表达的因素第16-18页
   ·植物SOC1及其同源基因的研究第18-20页
     ·SOC1/AGL20基因的结构第18页
     ·SOC1/ALG20及其同源基因的功能第18-19页
     ·SOC1/ALG20基因的表达调节第19-20页
   ·竹子成花分子机理的研究第20-21页
   ·研究的技术路线图第21-22页
2 雷竹PvSVP1、PvSVP2基因的功能研究第22-70页
   ·材料第22页
   ·试剂第22-23页
   ·质粒和菌种第23页
   ·实验方法第23-43页
     ·RNA的提取第23页
     ·RNA的反转录第23-24页
     ·雷竹总DNA的提取第24页
     ·引物的设计与基因克隆第24-25页
     ·目的条带序列确定第25-27页
     ·质粒提取第27-28页
     ·荧光定量PCR第28页
     ·过表达载体的构建第28-30页
     ·农杆菌的转化第30-31页
     ·拟南芥的遗传转化第31-32页
     ·转基因拟南芥中开花相关基因的表达量分析第32页
     ·水稻的遗传转化第32-33页
     ·转基因水稻中开花相关基因的表达量分析第33-34页
     ·PvSVP1启动子活性的分析第34-37页
     ·PvSVP1、PvSVP2亚细胞定位第37-40页
     ·酵母双杂交第40-41页
     ·双荧光互补实验(BIFC)第41页
     ·PvSVP1和PvSVP2蛋白的原核表达与纯化第41-43页
   ·结果与分析第43-67页
     ·雷竹总RNA的提取第43-44页
     ·PvSVP1、PvSVP2基因的克隆第44-47页
     ·PvSVP1、PvSVP2基因的序列比对与进化分析第47-48页
     ·PvSVP1、PvSVP2基因的时空表达第48-49页
     ·雷竹中两个SVP-like基因过表达转化野生型拟南芥第49-53页
     ·雷竹中PvSVP1基因过表达转化水稻第53-55页
     ·PvSVP1启动子活性的分析第55-59页
     ·PvSVP1、PvSVP2的亚细胞定位第59-61页
     ·PvSVP1、PvSVP2与PvAP1、PvSEP3、PvVRN1、PvMADS56蛋白之间的相互作用第61-64页
     ·PvSVP1、PvSVP2蛋白的小量诱导与纯化第64-67页
   ·小结与讨论第67-70页
3 雷竹PvMADS56基因的功能研究第70-96页
   ·材料第70页
   ·试剂第70-71页
   ·质粒和菌种第71页
   ·实验方法第71-78页
     ·RNA的提取第71页
     ·RNA的反转录第71页
     ·雷竹总DNA的提取第71页
     ·引物设计与基因克隆第71页
     ·目的条带序列的确定第71-72页
     ·质粒提取第72页
     ·荧光定量PCR第72页
     ·过表达载体的构建第72-73页
     ·转化农杆菌第73页
     ·拟南芥的遗传转化第73-74页
     ·转基因拟南芥中开花相关基因的表达量分析第74页
     ·水稻的遗传转化第74页
     ·转基因水稻的验证第74页
     ·PvMADS56启动子的克隆及表达载体的构建第74-75页
     ·PvMADS56启动子活性的分析第75-76页
     ·PvMADS56亚细胞定位第76页
     ·酵母双杂交第76-77页
     ·PvSVP1和PvSVP2蛋白的原核表达第77-78页
   ·结果与分析第78-93页
     ·PvMADS56基因的克隆第78-79页
     ·PvMADS56基因的生物信息学分析第79-81页
     ·PvMADS56基因的同源比对与进化分析第81-82页
     ·PvMADS56基因的时空表达分析第82-83页
     ·PvMADS56基因表达载体的构建第83-84页
     ·PvMADS56基因转化拟南芥第84-87页
     ·35S::PvMADS56转基因植株中开花相关基因的RT-qPCR分析第87-88页
     ·PvMADS56基因转化水稻第88页
     ·PvMADS56启动子活性的分析第88-90页
     ·PvMADS56的亚细胞定位第90-91页
     ·PvMADS56与PvAP1、PvSEP3的蛋白相互作用第91-92页
     ·PvMADS56蛋白的原核表达与纯化第92-93页
   ·小结与讨论第93-96页
4 全文结论与讨论第96页
5 展望第96-98页
参考文献第98-109页
附录第109-114页
个人简介第114页
成果清单第114-116页
导师简介第116-118页
致谢第118页

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