| 中文摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-5页 |
| 中文文摘 | 第5-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| 1 多酚氧化酶概述 | 第12-16页 |
| ·多酚氧化酶的结构特点 | 第12页 |
| ·多酚氧化酶的分布和分类 | 第12-13页 |
| ·多酚氧化酶的催化机理 | 第13-14页 |
| ·多酚氧化酶的提取技术 | 第14-15页 |
| ·多酚氧化酶活力的测定 | 第15-16页 |
| 2 多酚氧化酶分离和酶学性质 | 第16-19页 |
| ·多酚氧化酶分离纯化的方法 | 第16-17页 |
| ·多酚氧化酶的酶学性质 | 第17-18页 |
| ·多酚氧化酶的同工酶 | 第18-19页 |
| 3 多酚氧化酶的生理功能 | 第19-20页 |
| ·使高等植物组织发生褐变 | 第19页 |
| ·与植物抗病作用有关 | 第19页 |
| ·参与β-花青素的生物合成 | 第19页 |
| ·与绿色植物光合作用有关 | 第19页 |
| ·其他生理功能 | 第19-20页 |
| 4 多酚氧化酶的应用 | 第20-21页 |
| ·多酚氧化酶在食品领域的应用 | 第20页 |
| ·多酚氧化酶在医药领域的应用 | 第20-21页 |
| ·多酚氧化酶在的其他方面的应用 | 第21页 |
| 5 微生物多酚氧化酶应用 | 第21页 |
| 6 多酚氧化酶与茶多酚 | 第21-22页 |
| 7 研究的主要内容和意义 | 第22-26页 |
| ·本研究的主要内容 | 第22-23页 |
| ·技术路线 | 第23-26页 |
| 第二章 茶叶中产多酚氧化酶真菌的筛选和鉴定 | 第26-38页 |
| ·前言 | 第26页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·菌种 | 第26页 |
| ·主要药品及设备 | 第26-27页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-30页 |
| ·茶叶内生真菌菌的活化 | 第28页 |
| ·产多酚氧化酶内生真菌菌株初筛 | 第28页 |
| ·液体发酵复筛 | 第28-29页 |
| ·菌株形态观察 | 第29页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第29页 |
| ·PCR反应体系和扩增条件 | 第29-30页 |
| ·系统发育树的构建 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-35页 |
| ·菌株的初筛 | 第30-31页 |
| ·液体发酵复筛 | 第31-33页 |
| ·CSN-13形态观察 | 第33页 |
| ·菌株的ITS测序及系统发育树构建 | 第33-35页 |
| ·小结与讨论 | 第35-38页 |
| 第三章 菌株CSN-13产多酚氧化酶培养条件优化 | 第38-56页 |
| ·前言 | 第38页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·菌种 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-40页 |
| ·菌种活化 | 第39页 |
| ·发酵培养基优化 | 第39页 |
| ·发酵条件优化 | 第39-40页 |
| ·Plackett-Burman设计和响应面设计优化 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-53页 |
| ·发酵培养基优化 | 第40-43页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第40页 |
| ·麸皮浓度对产酶的影响 | 第40-41页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第41页 |
| ·硝酸铵浓度对产酶的影响 | 第41-42页 |
| ·茶水对产酶的影响 | 第42页 |
| ·茶水浓度对产酶的影响 | 第42-43页 |
| ·发酵条件优化 | 第43-45页 |
| ·培养时间对菌株CSN-13产多酚氧化酶的影响 | 第43页 |
| ·发酵温度对产酶的影响 | 第43-44页 |
| ·初始pH对产酶的影响 | 第44页 |
| ·转速对产酶的影响 | 第44-45页 |
| ·培养基和发酵条件优化后菌株CSN-13产多酚氧化酶的动态变化 | 第45页 |
| ·Plackett-Burman设计和响应面设计优化 | 第45-53页 |
| ·Plackett-Burman设计法筛选影响液体发酵产多酚氧化酶的显著因子 | 第45-47页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第47-48页 |
| ·Box-Behnken响应面实验设计与结果 | 第48-53页 |
| ·响应面优化法最优配方的验证 | 第53页 |
| ·小结与讨论 | 第53-56页 |
| 第四章 多酚氧化酶的分离、纯化和酶学性质研究 | 第56-70页 |
| ·前言 | 第56页 |
| ·材料 | 第56-58页 |
| ·菌种 | 第56页 |
| ·主要药品及设备 | 第56-57页 |
| ·主要试剂的配制 | 第57-58页 |
| ·方法 | 第58-61页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第58-59页 |
| ·多酚氧化酶酶活测定 | 第59页 |
| ·多酚氧化酶的分离纯化 | 第59-60页 |
| ·粗酶液的提取 | 第59页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第59-60页 |
| ·DEAE-纤维素阴离子交换柱层析 | 第60页 |
| ·葡聚糖G-150凝胶柱层析 | 第60页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第60页 |
| ·多酚氧化酶酶学性质的研究 | 第60-61页 |
| ·反应进程曲线 | 第60-61页 |
| ·最适pH值 | 第61页 |
| ·最适温度 | 第61页 |
| ·最适底物浓度 | 第61页 |
| ·金属离子对多酚氧化酶的影响 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-67页 |
| ·硫酸铵分级沉淀的确定 | 第61-62页 |
| ·DEAE-纤维素阴离子交换层析 | 第62页 |
| ·葡聚糖G-150凝胶柱层析 | 第62-63页 |
| ·多酚氧化酶各步纯化结果 | 第63-64页 |
| ·多酚氧化酶催化反应的进程曲线 | 第64-65页 |
| ·多酚氧化酶的最适pH | 第65页 |
| ·多酚氧化酶的最适温度 | 第65-66页 |
| ·底物浓度对酶活力的影响 | 第66页 |
| ·金属离子对多酚氧化酶活性的影响 | 第66-67页 |
| ·小结与讨论 | 第67-70页 |
| 第五章 菌株CSN-13多酚氧化酶对茶多酚生物转化的初步研究 | 第70-82页 |
| ·前言 | 第70页 |
| ·材料 | 第70-72页 |
| ·菌种 | 第70页 |
| ·主要药品及设备 | 第70-71页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第71-72页 |
| ·方法 | 第72-73页 |
| ·茶多酚对菌株CSN-13生长的影响 | 第72页 |
| ·菌株CSN-13发酵液对茶汤的“转化”作用 | 第72页 |
| ·HPLC分析 | 第72-73页 |
| ·菌株CSN-13在固体培养基上培养及优化 | 第73页 |
| ·结果与分析 | 第73-79页 |
| ·茶多酚对菌株CSN-13生长的影响 | 第73页 |
| ·菌株CSN-13粗酶液对茶汤的“转化”作用 | 第73-74页 |
| ·粗酶液转化茶多酚的HPLC分析 | 第74-77页 |
| ·菌株CSN-13在固体培养基上培养以及优化 | 第77-78页 |
| ·固体发酵所产粗酶液对茶多酚的转化效果 | 第78-79页 |
| ·小结与讨论 | 第79-82页 |
| 第六章 结论与展望 | 第82-86页 |
| ·结论 | 第82-83页 |
| ·问题及展望 | 第83-86页 |
| 参考文献 | 第86-94页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 索引 | 第98-100页 |
| 个人简历 | 第100-104页 |
