| 摘要 | 第1-4页 |
| abstract | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-17页 |
| ·骨髓间充质干细胞概述 | 第10-14页 |
| ·骨髓间充质干细胞研究进展 | 第10-11页 |
| ·骨髓间充质干细胞生物学特征及分离 | 第11页 |
| ·骨髓间充质干细胞的特异性分化 | 第11-13页 |
| ·骨髓间充质干细胞的应用前景及存在的问题 | 第13-14页 |
| ·端粒及端粒酶 | 第14页 |
| ·端粒逆转录酶和细胞永生化概述 | 第14-16页 |
| ·本研究的意义和主要内容 | 第16-17页 |
| 2 实验一 TERT真核表达载体的构建 | 第17-34页 |
| ·实验材料 | 第17-18页 |
| ·生物材料 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·溶液配制 | 第17-18页 |
| ·实验仪器、设备及耗材 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-26页 |
| ·TERT基因的PCR扩增 | 第18-20页 |
| ·目的片段的连接、转化及测序 | 第20-21页 |
| ·TERT表达载体的构建 | 第21-24页 |
| ·TERT表达载体转染BMSCs及细胞的筛选 | 第24-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-32页 |
| ·TERT基因的RT-PCR全长扩增 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的测序与序列比对 | 第27-28页 |
| ·TERT表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·TERT表达载体转染BMSCs及细胞的筛选 | 第30-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| ·端粒、端粒酶 | 第32页 |
| ·载体构建 | 第32-33页 |
| ·基因转染 | 第33-34页 |
| 3 实验二 TERT-BMSCs细胞的生物学特性鉴定及诱导分化 | 第34-43页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·实验试剂 | 第34页 |
| ·溶液配制 | 第34页 |
| ·实验仪器、设备及耗材 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-38页 |
| ·TERT-BMSCs的传代培养 | 第34-35页 |
| ·生长曲线的测定 | 第35页 |
| ·TERT-BMSCs干细胞转录因子的RT-PCR检测 | 第35-36页 |
| ·TERT-BMSCs的诱导分化及鉴定 | 第36-37页 |
| ·TERT-BMSCs软琼脂克隆实验 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-42页 |
| ·TERT-BMSCs传代培养鉴定 | 第38页 |
| ·TERT-BMSCs的生长曲线的测定 | 第38-39页 |
| ·RT-PCR检测TERT-BMSCs干细胞转录因子的表达 | 第39页 |
| ·TERT-BMSCs诱导分化及鉴定结果 | 第39-41页 |
| ·TERT-BMSCs软琼脂克隆检测结果 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 4 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录(一) | 第49-53页 |
| 附录(二) | 第53-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
