| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-29页 |
| ·新城疫和新城疫病毒概述 | 第12-15页 |
| ·壳聚糖季铵盐概述 | 第15-19页 |
| ·黏膜免疫的原理和优势 | 第19-20页 |
| ·黏膜免疫的途径 | 第20-21页 |
| ·消化道 | 第20页 |
| ·呼吸道 | 第20-21页 |
| ·黏膜免疫递送系统 | 第21-25页 |
| ·脂质体 | 第22页 |
| ·免疫刺激复合物 | 第22-23页 |
| ·微米粒和纳米粒 | 第23-25页 |
| ·纳米疫苗的优点 | 第25-26页 |
| ·本试验研究的目的意义及主要内容 | 第26-29页 |
| ·本试验研究的目的意义 | 第26-27页 |
| ·本试验研究的的主要内容 | 第27-29页 |
| 第2章 新城疫病毒的分离与鉴定 | 第29-52页 |
| ·试验材料 | 第29-33页 |
| ·病料 | 第29页 |
| ·标准阳性血清 | 第29页 |
| ·试验动物 | 第29页 |
| ·主要生化与分子生物学试剂 | 第29-30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| ·常用溶液的配制 | 第31-33页 |
| ·试验方法 | 第33-40页 |
| ·病料处理 | 第33页 |
| ·鸡胚成纤维原代细胞培养 | 第33-34页 |
| ·NDV分离株蚀斑纯化 | 第34页 |
| ·新城疫病毒的增值 | 第34-35页 |
| ·鸡胚半数致死量(ELD_(50))测定 | 第35页 |
| ·脑内致病指数(ICPI)测定 | 第35页 |
| ·病毒RNA提取 | 第35-36页 |
| ·引物设计与合成 | 第36页 |
| ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第36页 |
| ·PCR反应 | 第36-37页 |
| ·PCR产物回收与纯化 | 第37-38页 |
| ·连接与转化 | 第38页 |
| ·质粒提取 | 第38-39页 |
| ·酶切鉴定 | 第39页 |
| ·核苷酸序列测定 | 第39页 |
| ·系统发育进化树的构建 | 第39页 |
| ·序列的同源性比较 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-50页 |
| ·病料分离 | 第40页 |
| ·JL-DH/10分离株鸡胚成纤维原代细胞培养 | 第40-42页 |
| ·JL-DH/10株蚀斑纯化蚀斑纯化 | 第42页 |
| ·病毒JL-DH/10增值 | 第42页 |
| ·EID_(50)的测定 | 第42页 |
| ·JL-DH/10株脑内致病指数(ICPI)的测定 | 第42-43页 |
| ·F基因特异性引物PCR扩增 | 第43-44页 |
| ·克隆的筛选与鉴定 | 第44页 |
| ·核苷酸序列测定 | 第44-46页 |
| ·NDV JL-DH/10株F基因核苷酸序列同源性比较 | 第46-47页 |
| ·NDV JL-DH/10株F基因核苷酸遗传进化分析 | 第47-48页 |
| ·NDV JL-DH/10株F蛋白氨基酸同源性比较 | 第48-49页 |
| ·NDV JL-DH/10株F蛋白氨基酸遗传进化分析 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·结论 | 第51-52页 |
| 第3章 新城疫N-2-HACC纳米粒活疫苗的制备及其免疫学性质研究 | 第52-94页 |
| ·试验材料 | 第52-54页 |
| ·病毒 | 第52页 |
| ·病毒载体 | 第52页 |
| ·疫苗 | 第52页 |
| ·试验动物 | 第52页 |
| ·主要生化与分子生物学试剂 | 第52-53页 |
| ·主要仪器设备 | 第53-54页 |
| ·常用溶液的配制 | 第54页 |
| ·试验方法 | 第54-64页 |
| ·新城疫病毒La Sota株的增殖与纯化 | 第54-55页 |
| ·新城疫N-2-HACC纳米粒La Sota系活疫苗(NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs)制备 | 第55页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs制备条件的优化 | 第55-57页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs形态、粒径分布和Zeta电位检测 | 第57页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs包封率(Entrapment Efficiency,EE)、载药量(Loading Capacity,LC)的测定 | 第57-58页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs的体外释放特性 | 第58-59页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs安全性评价 | 第59页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs中病毒含量测定 | 第59-60页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs储存稳定性 | 第60页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs免疫效果评价 | 第60-64页 |
| ·攻毒试验 | 第64页 |
| ·统计学分析 | 第64页 |
| ·结果与分析 | 第64-90页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs制备条件的优化 | 第64-78页 |
| ·优化的NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs制备工艺 | 第78页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs形态、粒径分布、Zeta电位测定 | 第78-80页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs包封率、载药量测定 | 第80-81页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs体外释放试验 | 第81-82页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs安全性评价 | 第82页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs中病毒含量测定 | 第82页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs储存稳定性 | 第82-83页 |
| ·NDV/La Sota-N-2-HACC-NPs免疫效果评价 | 第83-89页 |
| ·攻毒试验 | 第89-90页 |
| ·讨论 | 第90-92页 |
| ·结论 | 第92-94页 |
| 第4章 新城疫N-2-HACC纳米粒灭活疫苗的制备及其免疫效果研究 | 第94-102页 |
| ·试验材料 | 第94-95页 |
| ·病毒 | 第94页 |
| ·病毒载体 | 第94页 |
| ·疫苗 | 第94页 |
| ·试验动物 | 第94页 |
| ·主要生化与分子生物学试剂 | 第94页 |
| ·主要仪器设备 | 第94-95页 |
| ·试验方法 | 第95-97页 |
| ·制苗用毒液的制备 | 第95页 |
| ·半成品检验 | 第95页 |
| ·灭活疫苗的制备 | 第95-96页 |
| ·成品检验 | 第96-97页 |
| ·新城疫N-2-HACC纳米油乳剂灭活疫苗的免疫效果评价 | 第97页 |
| ·结果与分析 | 第97-100页 |
| ·半成品检验 | 第97-98页 |
| ·灭活疫苗的制备 | 第98-99页 |
| ·新城疫N-2-HACC纳米油乳剂灭活疫苗的免疫效果评价 | 第99-100页 |
| ·讨论 | 第100-101页 |
| ·结论 | 第101-102页 |
| 第5章 本论文的主要创新点 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-112页 |
| 附录 | 第112-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第117-118页 |
| 攻读硕士学位期间申请国家发明专利情况 | 第118-119页 |
| 攻读硕士学位期间参与研究课题情况 | 第119-120页 |
