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对小菜蛾高毒力Bt菌株的分离、鉴定及菌剂研发

中文摘要第1-4页
Abstract第4-7页
目录第7-13页
第1章 绪论第13-28页
   ·苏云金芽孢杆菌概述第13-18页
     ·苏云金芽孢杆菌的分类第13-14页
     ·苏云金芽孢杆菌cry/cyt基因及晶体毒蛋白的分类第14-15页
     ·苏云金芽孢杆菌的分离研究进展第15-17页
     ·苏云金芽孢杆菌晶体毒蛋白的作用机理第17-18页
   ·利用苏云金芽孢杆菌防治小菜蛾第18-21页
     ·小菜蛾概述第18-19页
     ·杀小菜蛾苏云金芽孢杆菌及其晶体蛋白第19页
     ·小菜蛾对苏云金芽孢杆菌的抗性现状第19-20页
     ·小菜蛾抗药性的研究及监测技术第20-21页
   ·苏云金芽孢杆菌菌剂研究进展第21-26页
     ·苏云金芽孢杆菌制剂杀虫及增效活性成分第21-22页
     ·苏云金杆菌发酵研究第22-25页
     ·苏云金芽孢杆菌杀虫剂的剂型第25-26页
   ·本研究的目的意义及内容第26-28页
     ·研究目的意义第26-27页
     ·技术路线第27-28页
第2章 黑龙江地区小菜种群动态调查及抗性监测第28-40页
   ·材料与试剂第29-30页
   ·试验方法第30-31页
     ·小菜蛾种群动态监测第30页
     ·抗药性监测第30-31页
   ·结果与分析第31-36页
     ·田间小菜蛾成虫发生规律第31-32页
     ·田间小菜蛾卵、幼虫和蛹发生规律第32-34页
     ·小菜蛾对杀虫剂的抗性监测第34-36页
   ·讨论第36-38页
   ·小结第38-40页
第3章 抗Bt及Cry1Ac毒素小菜蛾饲养与汰选第40-48页
   ·材料与试剂第40-41页
     ·小菜蛾种群第40页
     ·汰选药剂第40-41页
   ·操作方法第41-42页
     ·晶体蛋白提取第41页
     ·电泳定量第41页
     ·甘蓝苗小菜蛾饲养第41页
     ·抗性小菜蛾选育第41-42页
     ·室内生物活性测定第42页
   ·结果和分析第42-46页
     ·晶体蛋白提取第42-43页
     ·Cry1Ac毒蛋白对小菜蛾毒力的生物测定结果第43页
     ·成虫的饲养第43页
     ·抗Bt制剂小菜蛾的选育第43-45页
     ·抗Cry1Ac毒蛋白小菜蛾的选育第45-46页
   ·讨论第46-47页
   ·小结第47-48页
第4章 小菜蛾Bt抗性检测引物的获得与验证第48-58页
   ·材料与试剂第48-49页
     ·小菜蛾种群第48-49页
     ·主要试剂第49页
   ·实验方法第49-51页
     ·单头小菜蛾基因组DNA的提取第49页
     ·AFLP分子标记体系的建立第49-50页
     ·聚丙烯酰胺凝胶检测第50页
     ·获得的AFLP标记向SCAR标记的转换第50页
     ·SCAR引物用于检测小菜蛾抗Bt特性第50-51页
   ·结果与分析第51-57页
     ·DNA的浓度与纯度第51页
     ·AFLP选择性扩增的结果第51-54页
     ·抗性标记的获得第54页
     ·AFLP标记向SCAR标记的转换第54-55页
     ·SCAR标记小菜蛾抗敏种群间的验证第55-57页
   ·讨论第57页
   ·小结第57-58页
第5章 苏云金芽孢杆菌的分离与特性研究第58-70页
   ·材料与试剂第58-59页
     ·供试小菜蛾第58页
     ·样品采集第58-59页
     ·染色试剂第59页
     ·仪器设备第59页
   ·研究方法第59-62页
     ·样品前处理第59页
     ·菌株的分离第59-60页
     ·菌株毒力测定第60页
     ·菌株的鉴定第60-62页
   ·结果与分析第62-68页
     ·菌株的分离与初筛第62页
     ·菌株的鉴定结果第62-65页
     ·cry/cyt基因型检测第65-66页
     ·敏感小菜蛾毒力测定结果第66-67页
     ·抗性小菜蛾毒力测定结果第67-68页
   ·讨论第68-69页
   ·小结第69-70页
第6章 cry基因序列克隆与分析第70-84页
   ·材料与试剂第70-71页
     ·供试菌株第70-71页
     ·引物序列第71页
   ·方法操作第71-75页
     ·模板制备第71-72页
     ·反应体系和扩增程序第72-74页
     ·PCR产物胶回收第74页
     ·连接反应第74页
     ·大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备第74页
     ·转化及阳性克隆子的筛选第74页
     ·序列测定及分析第74-75页
   ·结果与分析第75-79页
     ·cry1基因片段的PCR扩增第75页
     ·cry1基因片段的序列测定与分析第75-76页
     ·cry1基因全长的PCR扩增第76页
     ·cry1基因全长的序列测定与分析第76-78页
     ·cry2基因全长的PCR扩增第78-79页
     ·cry2基因全长的序列测定与分析第79页
   ·讨论第79-82页
   ·小结第82-84页
第7章 苏云金芽孢杆菌菌剂研究第84-102页
   ·材料与试剂第84-85页
     ·供试菌株第84页
     ·培养基第84-85页
     ·蛋白质电泳试剂第85页
     ·矿物辅料第85页
   ·操作方法第85-90页
     ·发酵方法第85-86页
     ·影响发酵条件的因素研究第86-87页
     ·菌剂制作方法第87-88页
     ·芽孢数测定第88页
     ·菌剂特性测定第88-90页
     ·生物效价测定第90页
   ·结果与分析第90-100页
     ·影响发酵条件的因素第90-96页
     ·菌剂的制作与测试第96-100页
   ·讨论第100-101页
   ·小结第101-102页
结论第102-104页
参考文献第104-119页
附录第119-128页
致谢第128-130页
攻读学位期间发表的学术论文第130-131页

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