中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
目录 | 第7-13页 |
第1章 绪论 | 第13-28页 |
·苏云金芽孢杆菌概述 | 第13-18页 |
·苏云金芽孢杆菌的分类 | 第13-14页 |
·苏云金芽孢杆菌cry/cyt基因及晶体毒蛋白的分类 | 第14-15页 |
·苏云金芽孢杆菌的分离研究进展 | 第15-17页 |
·苏云金芽孢杆菌晶体毒蛋白的作用机理 | 第17-18页 |
·利用苏云金芽孢杆菌防治小菜蛾 | 第18-21页 |
·小菜蛾概述 | 第18-19页 |
·杀小菜蛾苏云金芽孢杆菌及其晶体蛋白 | 第19页 |
·小菜蛾对苏云金芽孢杆菌的抗性现状 | 第19-20页 |
·小菜蛾抗药性的研究及监测技术 | 第20-21页 |
·苏云金芽孢杆菌菌剂研究进展 | 第21-26页 |
·苏云金芽孢杆菌制剂杀虫及增效活性成分 | 第21-22页 |
·苏云金杆菌发酵研究 | 第22-25页 |
·苏云金芽孢杆菌杀虫剂的剂型 | 第25-26页 |
·本研究的目的意义及内容 | 第26-28页 |
·研究目的意义 | 第26-27页 |
·技术路线 | 第27-28页 |
第2章 黑龙江地区小菜种群动态调查及抗性监测 | 第28-40页 |
·材料与试剂 | 第29-30页 |
·试验方法 | 第30-31页 |
·小菜蛾种群动态监测 | 第30页 |
·抗药性监测 | 第30-31页 |
·结果与分析 | 第31-36页 |
·田间小菜蛾成虫发生规律 | 第31-32页 |
·田间小菜蛾卵、幼虫和蛹发生规律 | 第32-34页 |
·小菜蛾对杀虫剂的抗性监测 | 第34-36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
·小结 | 第38-40页 |
第3章 抗Bt及Cry1Ac毒素小菜蛾饲养与汰选 | 第40-48页 |
·材料与试剂 | 第40-41页 |
·小菜蛾种群 | 第40页 |
·汰选药剂 | 第40-41页 |
·操作方法 | 第41-42页 |
·晶体蛋白提取 | 第41页 |
·电泳定量 | 第41页 |
·甘蓝苗小菜蛾饲养 | 第41页 |
·抗性小菜蛾选育 | 第41-42页 |
·室内生物活性测定 | 第42页 |
·结果和分析 | 第42-46页 |
·晶体蛋白提取 | 第42-43页 |
·Cry1Ac毒蛋白对小菜蛾毒力的生物测定结果 | 第43页 |
·成虫的饲养 | 第43页 |
·抗Bt制剂小菜蛾的选育 | 第43-45页 |
·抗Cry1Ac毒蛋白小菜蛾的选育 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
·小结 | 第47-48页 |
第4章 小菜蛾Bt抗性检测引物的获得与验证 | 第48-58页 |
·材料与试剂 | 第48-49页 |
·小菜蛾种群 | 第48-49页 |
·主要试剂 | 第49页 |
·实验方法 | 第49-51页 |
·单头小菜蛾基因组DNA的提取 | 第49页 |
·AFLP分子标记体系的建立 | 第49-50页 |
·聚丙烯酰胺凝胶检测 | 第50页 |
·获得的AFLP标记向SCAR标记的转换 | 第50页 |
·SCAR引物用于检测小菜蛾抗Bt特性 | 第50-51页 |
·结果与分析 | 第51-57页 |
·DNA的浓度与纯度 | 第51页 |
·AFLP选择性扩增的结果 | 第51-54页 |
·抗性标记的获得 | 第54页 |
·AFLP标记向SCAR标记的转换 | 第54-55页 |
·SCAR标记小菜蛾抗敏种群间的验证 | 第55-57页 |
·讨论 | 第57页 |
·小结 | 第57-58页 |
第5章 苏云金芽孢杆菌的分离与特性研究 | 第58-70页 |
·材料与试剂 | 第58-59页 |
·供试小菜蛾 | 第58页 |
·样品采集 | 第58-59页 |
·染色试剂 | 第59页 |
·仪器设备 | 第59页 |
·研究方法 | 第59-62页 |
·样品前处理 | 第59页 |
·菌株的分离 | 第59-60页 |
·菌株毒力测定 | 第60页 |
·菌株的鉴定 | 第60-62页 |
·结果与分析 | 第62-68页 |
·菌株的分离与初筛 | 第62页 |
·菌株的鉴定结果 | 第62-65页 |
·cry/cyt基因型检测 | 第65-66页 |
·敏感小菜蛾毒力测定结果 | 第66-67页 |
·抗性小菜蛾毒力测定结果 | 第67-68页 |
·讨论 | 第68-69页 |
·小结 | 第69-70页 |
第6章 cry基因序列克隆与分析 | 第70-84页 |
·材料与试剂 | 第70-71页 |
·供试菌株 | 第70-71页 |
·引物序列 | 第71页 |
·方法操作 | 第71-75页 |
·模板制备 | 第71-72页 |
·反应体系和扩增程序 | 第72-74页 |
·PCR产物胶回收 | 第74页 |
·连接反应 | 第74页 |
·大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备 | 第74页 |
·转化及阳性克隆子的筛选 | 第74页 |
·序列测定及分析 | 第74-75页 |
·结果与分析 | 第75-79页 |
·cry1基因片段的PCR扩增 | 第75页 |
·cry1基因片段的序列测定与分析 | 第75-76页 |
·cry1基因全长的PCR扩增 | 第76页 |
·cry1基因全长的序列测定与分析 | 第76-78页 |
·cry2基因全长的PCR扩增 | 第78-79页 |
·cry2基因全长的序列测定与分析 | 第79页 |
·讨论 | 第79-82页 |
·小结 | 第82-84页 |
第7章 苏云金芽孢杆菌菌剂研究 | 第84-102页 |
·材料与试剂 | 第84-85页 |
·供试菌株 | 第84页 |
·培养基 | 第84-85页 |
·蛋白质电泳试剂 | 第85页 |
·矿物辅料 | 第85页 |
·操作方法 | 第85-90页 |
·发酵方法 | 第85-86页 |
·影响发酵条件的因素研究 | 第86-87页 |
·菌剂制作方法 | 第87-88页 |
·芽孢数测定 | 第88页 |
·菌剂特性测定 | 第88-90页 |
·生物效价测定 | 第90页 |
·结果与分析 | 第90-100页 |
·影响发酵条件的因素 | 第90-96页 |
·菌剂的制作与测试 | 第96-100页 |
·讨论 | 第100-101页 |
·小结 | 第101-102页 |
结论 | 第102-104页 |
参考文献 | 第104-119页 |
附录 | 第119-128页 |
致谢 | 第128-130页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第130-131页 |