| 硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 英文縮略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-22页 |
| ·牛腺病毒3型简述 | 第14页 |
| ·病毒粒子结构 | 第14-15页 |
| ·BAV-3核衣壳蛋白 | 第15-18页 |
| ·六邻体蛋白 | 第15-16页 |
| ·五邻体蛋白 | 第16-17页 |
| ·纤突蛋白 | 第17-18页 |
| ·BAV-3次要表面蛋白 | 第18-19页 |
| ·BAV-3最新研究进展 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第20-22页 |
| 第二章 牛腺病毒3型六邻体蛋白的截短表达、单抗制备及初步应用 | 第22-31页 |
| 摘要 | 第22页 |
| ·材料与方法 | 第22-26页 |
| ·细胞、病毒株、质粒及实验动物 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·牛腺病毒3型基因组DNA的提取及引物设计 | 第22-23页 |
| ·牛腺病毒3型六邻体蛋白基因表达载体的构建与鉴定 | 第23页 |
| ·重组六邻体蛋白诱导表达、纯化及复性 | 第23页 |
| ·MAb的制备 | 第23-24页 |
| ·动物免疫 | 第24页 |
| ·间接ELISA的建立 | 第24页 |
| ·细胞融合及阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第24页 |
| ·杂交瘤细胞的染色体分析 | 第24页 |
| ·MAb生物学特性的鉴定 | 第24-25页 |
| ·单克隆抗体亚类鉴定 | 第24页 |
| ·腹水制备、纯化及效价测定 | 第24-25页 |
| ·免疫印迹分析 | 第25页 |
| ·间接免疫荧光(IFA)检测 | 第25页 |
| ·特异性检测 | 第25页 |
| ·免疫组化检测 | 第25-26页 |
| ·动物试验 | 第25-26页 |
| ·免疫组化检测 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-29页 |
| ·杂交瘤细胞株的染色体分析与所分泌单克隆抗体亚类鉴定 | 第26页 |
| ·腹水效价测定结果 | 第26-27页 |
| ·免疫印迹分析结果 | 第27页 |
| ·IFA鉴定结果 | 第27-28页 |
| ·单克隆抗体与其它牛呼吸道病毒的反应结果 | 第28-29页 |
| ·免疫组化鉴定结果 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 双抗夹心ELISA方法的建立及初步应用 | 第31-42页 |
| 摘要 | 第31页 |
| ·材料与方法 | 第31-34页 |
| ·病毒毒株与鼻拭子样品 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·兔源多克隆抗体制备 | 第31-32页 |
| ·单克隆抗体的HRP标记 | 第32页 |
| ·双抗夹心ELISA方法的建立 | 第32-34页 |
| ·双抗ELISA工作条件及程序的建立 | 第32页 |
| ·最佳封闭试剂,最佳封闭时间与温度确定 | 第32-33页 |
| ·最佳样品孵育时间确定 | 第33页 |
| ·检测抗体作用时间的确定 | 第33页 |
| ·底物显色时间的确定 | 第33页 |
| ·包被抗体和检测抗体的溶度确定 | 第33页 |
| ·cut-off确定 | 第33页 |
| ·特异性实验 | 第33-34页 |
| ·重复性实验 | 第34页 |
| ·敏感性实验 | 第34页 |
| ·双抗夹心ELISa与PCR检测结果的符合率 | 第34页 |
| ·夹心ELISA方法的初步应用 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-40页 |
| ·夹心ELISA最佳反应条件的反应条件的确定 | 第34-37页 |
| ·包被抗体与检测抗体最佳稀释度的确定 | 第34-35页 |
| ·最佳工作时间的确定 | 第35-36页 |
| ·最佳封闭试剂的确定 | 第36-37页 |
| ·CUT-OFF值确定 | 第37页 |
| ·夹心ELISA方法的确定 | 第37页 |
| ·特异性实验 | 第37-38页 |
| ·重复性实验 | 第38-39页 |
| ·敏感性实验的结果 | 第39页 |
| ·双抗夹心ELISA与PCR检测结果的符合率 | 第39-40页 |
| ·夹心ELISA的初步引用 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 全文结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简历 | 第51页 |