| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-13页 |
| 1 研究背景 | 第8-11页 |
| ·Nmi 简介 | 第8-9页 |
| ·γ干扰素信号通路简介 | 第9-10页 |
| ·STAT1 翻译后修饰及对其活性的影响 | 第10-11页 |
| 2 课题研究目的及意义 | 第11-13页 |
| 第二章 实验仪器与材料 | 第13-20页 |
| 1 主要实验仪器 | 第13-14页 |
| 2 主要实验材料 | 第14-20页 |
| ·菌种、质粒及细胞 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-15页 |
| ·主要溶液的配制 | 第15-20页 |
| 第三章 酵母双杂交筛选与 Nmi 相互作用的蛋白 | 第20-40页 |
| 1 实验方法 | 第21-33页 |
| ·pGBKT7-Nmi 质粒的构建 | 第21-26页 |
| ·诱饵蛋白 Nmi 自激活活性检测 | 第26-28页 |
| ·以 Nmi 为诱饵筛选人胚肾 cDNA 文库 | 第28-33页 |
| 2 实验结果与分析 | 第33-39页 |
| ·pGBKT7-Nmi 质粒构建 | 第33-34页 |
| ·诱饵蛋白 Nmi 无自激活活性 | 第34页 |
| ·酵母双杂交方法筛选与 Nmi 相互作用的蛋白 | 第34-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 UBE2I 与 Nmi 相互作用的确定 | 第40-60页 |
| 1 实验方法 | 第40-50页 |
| ·酵母双杂交实验 | 第40-41页 |
| ·GST-pull down 实验 | 第41-47页 |
| ·Co-IP 实验 | 第47-48页 |
| ·荧光共定位实验 | 第48-50页 |
| 2 实验结果与分析 | 第50-58页 |
| ·酵母双杂交方法确认 UBE2I 与 Nmi 相互作用 | 第50页 |
| ·GST Pull-down 方法确认 UBE2I 与 Nmi 相互作用 | 第50-54页 |
| ·免疫共沉淀方法确认（Co-IP）UBE2I 与 Nmi 相互作用 | 第54-56页 |
| ·Nmi 能够改变 UBE2I 的核定位 | 第56-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 第五章 Nmi 与 UBE2I 相互作用结构域的研究 | 第60-66页 |
| 1 实验方法 | 第60-62页 |
| ·pGBKT7-UBE2I 质粒的构建 | 第60-61页 |
| ·截短型 Nmi 突变体测序鉴定 | 第61页 |
| ·截短型 Nmi 突变体自激活活性检测 | 第61页 |
| ·酵母双杂交确定 Nmi 与 UBE2I 作用的结构域 | 第61-62页 |
| 2 实验结果与分析 | 第62-64页 |
| ·构建 pGBKT7-UBE2I 质粒 | 第62-63页 |
| ·截短型 Nmi 突变体的构建 | 第63页 |
| ·截短型 Nmi 突变体没有自激活活性现象 | 第63页 |
| ·Nmi 的 1-199 个氨基酸区域与 UBE2I 相互作用 | 第63-64页 |
| 3 讨论 | 第64-66页 |
| 第六章 结论与展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 附录 | 第71-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
