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miR-10b靶向HOXD10调节RhoC-AKT信号通路促进胃癌的侵袭

中文摘要第1-6页
Abstract第6-13页
英文缩写词表第13-15页
前言第15-17页
第1章 文献综述第17-33页
   ·引言第17-18页
   ·miRNA 概述第18-21页
     ·miRNA 的发现第18页
     ·miRNA 的形成过程第18-20页
     ·miRNA 的作用机制第20页
     ·miRNAs 的生物学特征第20-21页
   ·miRNAs 与肿瘤第21-24页
     ·肿瘤特异性 miRNAs第21-22页
     ·肿瘤中的循环 miRNAs第22-24页
   ·miRNAs 与胃癌第24-31页
     ·胃癌中的 miRNAs 表达谱第24页
     ·miRNAs 在胃癌中的生物学作用第24-26页
     ·miRNAs 和胃癌病理学第26-27页
     ·miRNAs 和胃癌的转移第27页
     ·miRNAs 和胃癌的诊断第27-29页
     ·miRNAs 和胃癌的治疗第29-30页
     ·miRNAs 和胃癌的预后第30-31页
   ·结语第31-33页
第2章 miR-10b 在人胃癌组织及不同分化程度的人胃癌细胞株中的表达情况分析第33-55页
   ·实验材料第33-42页
     ·组织标本来源第33页
     ·细胞株第33页
     ·主要实验设备第33-34页
     ·主要试剂第34-36页
     ·主要试剂配制第36-42页
   ·实验方法第42-49页
     ·qRT-PCR 检测胃癌组织及其相应的癌旁正常组织中miR-10b 的表达第42-45页
     ·原位杂交法检测胃癌组织及其相应则癌旁正常组织中miR-10b 的表达第45-47页
     ·细胞培养第47-48页
     ·琼脂糖电泳第48-49页
     ·统计学处理第49页
   ·结果第49-53页
     ·qRT-PCR 的方法检测 miR-10b 在胃癌组织中的表达第49-50页
     ·原位杂交的方法检测 miR-10b 在胃癌组织中的表达第50-51页
     ·qRT-PCR 的方法检测 miR-10b 在不同分化程度的胃癌细胞株中的表达第51-53页
   ·讨论第53-55页
第3章 miR-10b 对人胃癌细胞侵袭能力的影响第55-67页
   ·实验材料第55-57页
     ·细胞株第55页
     ·主要实验设备第55-56页
     ·主要试剂第56页
     ·主要试剂配制第56-57页
   ·实验方法第57-62页
     ·细胞培养和转染第57-58页
     ·细胞计数第58页
     ·质粒构建与病毒包装第58-61页
     ·qRT-PCR 检测第61页
     ·小室侵袭实验第61-62页
     ·细胞迁移实验第62页
   ·实验结果第62-66页
     ·抑制 miR-10b 对胃癌细胞的迁移没有影响第62-63页
     ·抑制 miR-10b 抑制胃癌细胞的侵袭第63-66页
   ·讨论第66-67页
第4章 miR-10b 通过靶向 HOXD10 促进胃癌细胞的侵袭第67-83页
   ·实验材料第67-71页
     ·细胞株第67页
     ·主要实验设备第67页
     ·主要试剂第67-68页
     ·主要配制试剂第68-71页
   ·实验方法第71-77页
     ·细胞培养和转染第71页
     ·qRT-PCR 检测 HOXD10 mRNA第71-73页
     ·荧光素酶报告基因载体的构建第73-74页
     ·双荧光素酶报告基因分析第74页
     ·Western Blot 检测蛋白样本的准备第74-75页
     ·SDS-PAGE 凝胶电泳第75-76页
     ·转膜第76页
     ·免疫印迹反应第76-77页
   ·实验结果第77-80页
     ·miR-10b 靶基因的分析预测第77页
     ·荧光素酶报告基因分析第77-78页
     ·miR-10b 对 HOXD10 的调节作用第78-80页
     ·miR-10b 抑制 HOXD10 的表达促进胃癌细胞的侵袭能力第80页
   ·讨论第80-83页
第5章 miR-10b 通过激活AKT 信号通路诱导胃癌细胞的侵袭第83-89页
   ·材料与方法第83-84页
   ·实验方法第84页
   ·实验结果第84-87页
     ·miR-10b 能够诱导 RhoC 的表达第84页
     ·RhoC 在 miR-10b 对胃癌细胞侵袭能力的促进中起重要作用第84-86页
     ·miR-10b 诱导 RhoC 表达导致 AKT 信号通路的激活第86页
     ·抑制 AKT 信号通路能够逆转 miR-10b 对胃癌细胞侵袭能力的促进第86-87页
   ·讨论第87-89页
第6章 胃癌的转移与 HOXD10 低表达有关第89-95页
   ·实验材料第89页
     ·细胞株第89页
     ·主要实验设备第89页
     ·主要试剂第89页
     ·主要配制试剂第89页
   ·实验方法第89-92页
     ·细胞培养第89页
     ·western blot 检测 HOXD10 在胃癌细胞株中的表达第89-90页
     ·免疫组化检测 HOXD10 在胃癌组织中的表达第90-91页
     ·western blot 检测 HOXD10 在胃癌组织中的表达第91页
     ·统计学处理第91-92页
   ·实验结果第92-95页
     ·HOXD10 的表达与胃癌细胞株的恶性程度呈负相关第92页
     ·HOXD10 在转移阳性的胃癌组织中的表达下降第92-95页
第7章 结论第95-97页
创新点自评第97-99页
参考文献第99-115页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第115-117页
致谢第117页

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