| 中文摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| ·分子靶向药物的研究与开发 | 第14-15页 |
| ·靶向核酸的抗肿瘤药物 | 第14-15页 |
| ·靶向蛋白、信号受体和微管的抗肿瘤药物 | 第15页 |
| ·靶向药物的临床应用 | 第15页 |
| ·GRP78—肿瘤靶向治疗的新靶点 | 第15-20页 |
| ·GRP78的结构 | 第15-16页 |
| ·GRP78蛋白的功能 | 第16-20页 |
| ·胰蛋白酶抑制剂的抗肿瘤作用 | 第20-22页 |
| ·蛋白酶抑制剂的分类 | 第20-21页 |
| ·蛋白酶抑制剂的抗肿瘤作用 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 靶向胰蛋白酶抑制剂的表达与纯化 | 第24-31页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·菌株与质粒 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-28页 |
| ·大肠杆菌DH5α/BL21感受态细胞制备 | 第26页 |
| ·GBP-TI表达载体的构建 | 第26-27页 |
| ·胰蛋白酶抑制剂GBP-TI的诱导表达 | 第27页 |
| ·胰蛋白酶抑制剂GBP-TI的纯化 | 第27-28页 |
| ·胰蛋白酶抑制剂GBP-TI的活力测定 | 第28页 |
| ·实验结果 | 第28-30页 |
| ·胰蛋白酶抑制剂GBP-TI的诱导表达与纯化 | 第28-29页 |
| ·胰蛋白酶抑制剂GBP-TI的活性 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 靶向胰蛋白酶抑制剂的抗肿瘤效应研究 | 第31-39页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·实验仪器 | 第31页 |
| ·细胞株 | 第31页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-33页 |
| ·细胞的冻存及复苏 | 第31-32页 |
| ·细胞的培养 | 第32页 |
| ·激光共聚焦检测GBP-TI与细胞表面GRP78相互作用 | 第32页 |
| ·MTT法检测GBP-TI对细胞存活的影响 | 第32页 |
| ·流式细胞技术检测GBP-TI对细胞周期的影响 | 第32-33页 |
| ·Western blotting检测GBP-TI对细胞周期蛋白的影响 | 第33页 |
| ·DAPI染色观察GBP-TI对结肠癌细胞细胞核的影响 | 第33页 |
| ·统计学处理 | 第33页 |
| ·实验结果 | 第33-37页 |
| ·激光共聚焦检测GBP-TI与细胞表面GRP78相互作用 | 第33-34页 |
| ·GBP-TI抑制结肠癌肿瘤细胞的生长 | 第34-36页 |
| ·GBP-TI诱导结肠癌细胞凋亡 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 靶向胰蛋白酶抑制剂诱导肠癌细胞凋亡的分子机制研究 | 第39-44页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·实验仪器 | 第39页 |
| ·细胞株 | 第39页 |
| ·抗体及试剂 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-40页 |
| ·流式细胞技术检测GBP-TI对线粒体膜电位的影响 | 第39-40页 |
| ·Western blotting检测GBP-TI影响细胞凋亡相关蛋白 | 第40页 |
| ·统计学处理 | 第40页 |
| ·实验结果 | 第40-42页 |
| ·GBP-TI诱导大肠癌细胞线粒体膜电位降低 | 第40-41页 |
| ·GBP-TI诱导Bax/Bcl-2蛋白比例升高 | 第41-42页 |
| ·GBP-TI激活内质网应激途径和死亡受体途径 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第五章 靶向胰蛋白酶抑制剂对大肠癌肿瘤生长影响的体内试验研 | 第44-49页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·实验仪器 | 第44页 |
| ·实验动物及细胞株 | 第44页 |
| ·抗体及试剂 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·细胞培养 | 第44页 |
| ·裸鼠人肠癌(DLD1)移植模型的建立 | 第44-45页 |
| ·模型分组及给药 | 第45页 |
| ·瘤体积的称重 | 第45页 |
| ·Western blotting检测GBP-TI影响细胞凋亡相关蛋白 | 第45页 |
| ·免疫组织化学染色 | 第45-46页 |
| ·统计学处理 | 第46页 |
| ·实验结果 | 第46-48页 |
| ·GBP-TI对肿瘤体积及重量的影响 | 第46-47页 |
| ·GBP-TI对肿瘤组织中增殖、凋亡相关蛋白表达的影响 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 个人简况及联系方式 | 第57-59页 |
