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捻转血矛线虫蛋白酶体β5亚基编码基因的结构与功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第10-11页
1 文献综述第11-23页
   ·血矛线虫病(Haemonchosis)第11-14页
     ·捻转血矛线虫形态第11-12页
     ·捻转血矛线虫生活史第12-13页
     ·捻转血矛线虫病致病作用和临床症状第13页
     ·捻转血矛线虫病的预防和治疗第13-14页
   ·蛋白酶体(Proteasome)第14-19页
     ·泛素-蛋白酶体途径第14-15页
     ·蛋白酶体的结构第15-17页
     ·蛋白酶体的功能第17-18页
     ·寄生虫蛋白酶体的研究进展第18页
     ·蛋白酶体β5亚基第18-19页
   ·秀丽隐杆线虫及其应用第19-20页
   ·RNAi和转基因技术在动物寄生线虫基因功能研究中的应用第20-23页
     ·RNAi的机制第20-21页
     ·RNAi在动物寄生线虫中的研究第21页
     ·RNAi在动物寄生线虫中的应用第21-22页
     ·转基因技术动物寄生线虫中的应用第22-23页
2 目的意义第23-24页
3 材料与方法第24-34页
   ·主要仪器与试剂第24-26页
     ·主要仪器第24页
     ·实验生物与质粒第24页
     ·主要试剂第24-25页
     ·主要溶液的配制第25-26页
   ·试验方法第26-34页
     ·捻转血矛线虫各发育阶段虫体的收集第26页
     ·捻转血矛线虫基因组DNA的提取第26页
     ·捻转血矛线虫RNA的提取第26-27页
     ·PCR产物的电泳检测与回收第27页
     ·目的片段的连接第27-28页
     ·连接产物的转化第28页
     ·质粒DNA的小量制备与鉴定第28-29页
     ·质粒的构建第29页
     ·Hc-pbs-5基因cDNA的获得第29-30页
     ·Hc-pbs-5基因全长gDNA的获得第30-31页
     ·Hc-pbs-5 dsRNA原核表达载体的构建第31页
     ·Hc-pbs-5种间RNAi第31页
     ·Hc-pbs-5基因启动子序列的获得第31-32页
     ·基因启动子定位质粒的构建第32页
     ·显微注射第32-33页
     ·捻转血矛线虫各发育阶段转录水平分析第33页
     ·Hc-pbs-5基因主要生物信息学分析第33-34页
4 结果与分析第34-48页
   ·Hc-pbs-5基因cDNA核苷酸序列分析第34-35页
   ·Hc-PBS-5氨基酸序列分析第35-37页
   ·系统进化分析第37页
   ·Hc-pbs-5基因全长gDNA序列分析第37-39页
   ·Hc-pbs-5基因各个阶段转录水平分析第39-40页
   ·异源RNA干扰评价Hc-pbs-5基因功能第40-43页
   ·Hc-pbs-5基因启动子预测第43-46页
   ·Hc-pbs-5基因启动子定位研究第46-48页
5 讨论第48-53页
   ·线虫基因的生物信息学分析第48页
   ·Hc-PBS-5蛋白保守结构域第48-49页
   ·Hc-pbs-5转录水平分析第49页
   ·异源RNA干扰第49-51页
   ·寄生线虫的反式剪接第51页
   ·寄生线虫异源转基因技术第51-53页
6 结论第53-54页
参考文献第54-59页
附录第59-61页
致谢第61页

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