| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语Abbreviation | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-29页 |
| ·结核病与结核分枝杆菌 | 第11页 |
| ·结核分枝杆菌与DNA损伤修复 | 第11-13页 |
| ·碱基切除修复途径(BER)和糖基化酶 | 第13-18页 |
| ·真核生物AAG研究概况 | 第18-22页 |
| ·人AAG结构 | 第18-19页 |
| ·AAG底物结合位点和催化机制 | 第19-20页 |
| ·真核生物AAG的生理功能 | 第20-22页 |
| ·结核分枝杆菌AAG研究概况 | 第22页 |
| ·TetR类型转录因子 | 第22-25页 |
| ·TetR类型转录因子的一般特征 | 第22-24页 |
| ·分枝杆菌TetR类型转录因子研究概况 | 第24-25页 |
| ·BCG菌株的模式地位 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的、意义、内容和技术路线 | 第26-29页 |
| ·研究目的和意义 | 第26-27页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第27-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-40页 |
| ·材料与试剂 | 第29-32页 |
| ·菌株,质粒 | 第29页 |
| ·引物、酶、试剂盒 | 第29-31页 |
| ·单双杂交培养基配方 | 第31页 |
| ·EMSA相关试剂 | 第31页 |
| ·ChIP实验相关试剂 | 第31页 |
| ·其他 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-40页 |
| ·引物设计和PCR扩增反应 | 第32页 |
| ·重组质粒的构建 | 第32页 |
| ·大肠杆菌质粒抽提、感受态细胞制备和转化 | 第32-34页 |
| ·重组蛋白的诱导、表达和透析 | 第34-35页 |
| ·抗体制备 | 第35-36页 |
| ·凝胶迁移阻滞实验(EMSA) | 第36页 |
| ·细菌单杂交和双杂交 | 第36页 |
| ·染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第36-37页 |
| ·构建BCG0878c敲除菌株及Southern blot验证 | 第37页 |
| ·实时定量PCR(RT-PCR) | 第37-38页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性分析 | 第38页 |
| ·Dnase Ⅰ足迹实验 | 第38页 |
| ·免疫共沉淀实验(Co-IP) | 第38-39页 |
| ·表面等离子共振分析 | 第39页 |
| ·DNA糖基化酶切割次黄嘌呤实验 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-58页 |
| ·BCG0878c蛋白质在转录水平上调控mbaag基因表达 | 第40-48页 |
| ·BCG0878c蛋白质能够识别mbaag基因的上游序列 | 第40-41页 |
| ·BCG0878c在体内能够特异性地结合mbaag启动子序列 | 第41-43页 |
| ·鉴定BCG0878c所识别的DNA基序 | 第43-46页 |
| ·BCG0878c负调控mbaag的表达 | 第46-48页 |
| ·BCG0878c通过蛋白质相互作用调控MbAAG的酶活性 | 第48-54页 |
| ·BCG0878c能够与MbAAG相互作用 | 第48-51页 |
| ·BCG0878c能够刺激MbAAG对损伤DNA的结合活性 | 第51-52页 |
| ·BCG0878c能够刺激MbAAG对损伤DNA的切割活性 | 第52-53页 |
| ·MbAAG促进BCG0878c结合启动子 | 第53-54页 |
| ·MbAAG和BCG0878c的相互作用影响分枝杆菌生长 | 第54-56页 |
| ·BCG0878c的表达水平以及启动子结合活性并不受亚硝酸损伤剂的影响 | 第56-58页 |
| 4 总结与讨论 | 第58-64页 |
| ·总结 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-64页 |
| ·MbAAG表达水平对细菌生理的影响 | 第59-60页 |
| ·BCG0878c作为TetR类型转录因子的独特调控机制 | 第60-62页 |
| ·研究展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第72-73页 |
| 附录 | 第73-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
