| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 符号说明及縮略词 | 第13-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-35页 |
| ·丝状真菌木质纤维素酶基因表达的转录调控 | 第16-29页 |
| ·木质纤维素酶的组成型表达 | 第16-17页 |
| ·碳源对木质纤维素酶表达合成的诱导 | 第17-20页 |
| ·纤维二糖 | 第17页 |
| ·槐糖 | 第17-18页 |
| ·龙胆二糖 | 第18页 |
| ·乳糖 | 第18-19页 |
| ·其他寡糖 | 第19-20页 |
| ·转录因子对木质纤维素酶的诱导调控 | 第20-29页 |
| ·CreA/CREI | 第20-21页 |
| ·XlnR/XYRI | 第21-24页 |
| ·Hap2/3/5复合物 | 第24-25页 |
| ·ACEⅠ | 第25页 |
| ·ACEⅡ | 第25-26页 |
| ·CLR-1,CLR-2/ClrB | 第26-28页 |
| ·其他转录因子 | 第28-29页 |
| ·易利用碳源对纤维素酶表达合成的阻遏调控 | 第29页 |
| ·丝状真菌无性繁殖的遗传调控 | 第29-30页 |
| ·真菌特有的细胞周期调控转录因子APSES蛋白 | 第30-31页 |
| ·HOMEODOMAIN蛋白 | 第31-33页 |
| ·本论文的立题依据和研究目的 | 第33-35页 |
| 第二章 草酸青霉Htf对木质纤维素酶表达合成和分生孢子生成的影响 | 第35-73页 |
| 引言 | 第35页 |
| ·材料和方法 | 第35-55页 |
| ·菌株 | 第35-36页 |
| ·培养基,培养方法和菌种保藏 | 第36-37页 |
| ·常用缓冲液和储备液 | 第37-39页 |
| ·主要生化试剂和仪器 | 第39-40页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第40页 |
| ·敲除盒、回补盒、组成型表达盒的构建 | 第40-44页 |
| ·原生质体的制备 | 第44-45页 |
| ·原生质体转化 | 第45-46页 |
| ·转化子筛选 | 第46页 |
| ·转化子的分离纯化 | 第46页 |
| ·基因组染色体的小量提取 | 第46-47页 |
| ·转化子PCR验证 | 第47页 |
| ·基因组染色体的大量提取 | 第47-48页 |
| ·Southern blotting | 第48-50页 |
| ·表型分析的点板试验 | 第50页 |
| ·胞外蛋白溶度测定和酶活力测定 | 第50-52页 |
| ·生孢能力测定 | 第52-53页 |
| ·菌丝形态显微观察(棉兰染色法) | 第53页 |
| ·qRT-PCR | 第53-55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-72页 |
| ·草酸青霉转录因子Htf的生物信息学预测 | 第55-57页 |
| ·功能结构预测 | 第55-56页 |
| ·进化树的构建 | 第56-57页 |
| ·htf敲除盒、回补盒、组成型表达盒的构建 | 第57-58页 |
| ·htf重组菌株的构建 | 第58-61页 |
| ·htf敲除株和组成型表达菌株的构建 | 第58-60页 |
| ·htf回补株和自身启动子过表达菌株的构建 | 第60页 |
| ·htf敲除株△htf-1的Southern blotting验证 | 第60-61页 |
| ·htf重组菌株的表型特征 | 第61-62页 |
| ·htf重组菌株生孢能力的测定 | 第62-63页 |
| ·对htf敲除株△htf形态的显微观察 | 第63-64页 |
| ·htf重组菌株分生孢子形成调控基因的转录水平分析 | 第64-67页 |
| ·htf敲除株△htf的斜面表型分析 | 第67页 |
| ·htf重组菌株的木质纤维素酶活和胞外蛋白浓度的测定 | 第67-69页 |
| ·htf重组菌株的木质纤维素酶基因的转录水平分析 | 第69-72页 |
| ·本章小结 | 第72-73页 |
| 第三章 草酸青霉StuA全局调控分生孢子生成并影响糖苷水解酶的表达合成 | 第73-98页 |
| 引言 | 第73页 |
| ·材料和方法 | 第73-77页 |
| ·菌株 | 第73-74页 |
| ·培养基,培养方法,菌种保藏 | 第74页 |
| ·常用的缓冲液和储备液 | 第74-75页 |
| ·敲除盒、回补盒、组成型表达盒构建 | 第75页 |
| ·stuA重组菌株的构建 | 第75页 |
| ·表型分析的点板试验 | 第75页 |
| ·表型平板无光照培养 | 第75-76页 |
| ·胞外蛋白溶度测定和酶活力测定 | 第76页 |
| ·菌丝形态显微观察(棉兰染色法) | 第76页 |
| ·qRT-PCR | 第76页 |
| ·stuA敲除株△stuA的表达谱样品的准备 | 第76-77页 |
| ·stuA敲除株△stuA的表达谱数据的分析 | 第77页 |
| ·结果和讨论 | 第77-96页 |
| ·草酸青霉转录因子StuA的生物信息学预测 | 第77-79页 |
| ·功能结构预测 | 第77-78页 |
| ·进化树的构建 | 第78-79页 |
| ·stuA敲除盒、回补盒、组成型表达盒的构建 | 第79-80页 |
| ·stuA重组菌株的构建 | 第80-83页 |
| ·stuA敲除株、组成型表达菌株的构建 | 第80-81页 |
| ·stuA回补菌株、自身启动子过表达菌株的构建 | 第81-82页 |
| ·stuA敲除株△stuA的Southern blotting验证 | 第82-83页 |
| ·stuA重组菌株的表型特征 | 第83-86页 |
| ·stuA敲除株△stuA在Mendal's盐培养平板上的表型 | 第83-84页 |
| ·stuA重组菌株在以Vogel's盐培养平板上的表型特征 | 第84-85页 |
| ·stuA敲除株△stuA在营养胁迫培养基中的表型特征 | 第85-86页 |
| ·stuA敲除株△stuA的显微观察 | 第86-87页 |
| ·stuA重组菌株中分生孢子发育调控基因的转录水平分析 | 第87-89页 |
| ·stuA重组菌株的木质纤维素酶活和胞外蛋白浓度的比较 | 第89-92页 |
| ·stuA重组菌株糖苷水解酶基因的转录水平分析 | 第92-94页 |
| ·△stuA的比较转录组学分析 | 第94-96页 |
| ·差异表达基因的分级聚类分析 | 第94-95页 |
| ·差异表达基因的GO分析 | 第95页 |
| ·差异表达基因功能注释及分类分析 | 第95-96页 |
| ·本章小结 | 第96-98页 |
| 论文创新性结果总结和展望 | 第98-101页 |
| 参考文献 | 第101-117页 |
| 致谢 | 第117-119页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第119页 |
