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大豆疫霉G蛋白α亚基互作蛋白的筛选及功能分析

目录第1-6页
摘要第6-7页
ABSTRACT第7-9页
上篇 文献综述第9-22页
 1 G蛋白信号途径第10-11页
 2 G蛋白信号途径的研究进展第11-19页
   ·人类和动物中的G蛋白信号途径第11-12页
   ·植物中的G蛋白信号途径第12-15页
   ·真菌中的G蛋白信号途径第15-17页
   ·卵菌的G蛋白信号途径第17-19页
 参考文献第19-22页
下篇 研究内容第22-54页
 1. 材料与方法第26-40页
   ·试剂及培养基第26-28页
   ·供试菌株及大豆品种第28-29页
   ·Gateway技术构建酵母表达载体第29页
   ·诱饵蛋白自激活活性检测第29页
   ·大豆疫霉cDNA文库构建第29-30页
   ·酵母双杂交(醋酸锂法)第30页
   ·利用酵母双杂交筛库流程第30-31页
   ·酵母转化子PCR验证第31页
   ·酵母质粒提取第31-32页
   ·酵母双杂交载体构建第32页
   ·Bait、Prey蛋白毒性与自激活活性验证第32页
   ·Western blot验证目的蛋白表达第32-33页
   ·酵母双杂交一对一互作验证第33页
   ·HIS3和ADE2报告基因的表达检测第33页
   ·LacZ、MEL1基因检测第33-34页
   ·GST Pull-down验证蛋白体外互作第34-36页
   ·大豆疫霉基因沉默转化载体构建第36页
   ·大豆疫霉遗传转化第36-39页
   ·基因沉默转化子筛选第39页
   ·致病性测验第39页
   ·沉默突变体表型分析第39-40页
 2. 结果与分析第40-50页
   ·酵母双杂交筛库部分结果第40-41页
   ·酵母双杂交验证PsRACK1与PsGPA1一对一互作结果第41-43页
   ·GST Pull-down验证PsRACK1与PsGPA1一对一互作结果第43-44页
   ·大豆疫霉PsRACK1功能分析结果第44-50页
 3. 讨论第50-52页
   ·酵母双杂交研究手段第51页
   ·PsRACK1与激活和非激活态Gα亚基的互作验证第51页
   ·PsRACK1参与调控大豆疫霉卵孢子的产生第51-52页
 参考文献第52-54页
附录第54-64页
攻读硕士学位期间发表的研究论文第64-66页
致谢第66页

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