目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
上篇 文献综述 | 第9-22页 |
1 G蛋白信号途径 | 第10-11页 |
2 G蛋白信号途径的研究进展 | 第11-19页 |
·人类和动物中的G蛋白信号途径 | 第11-12页 |
·植物中的G蛋白信号途径 | 第12-15页 |
·真菌中的G蛋白信号途径 | 第15-17页 |
·卵菌的G蛋白信号途径 | 第17-19页 |
参考文献 | 第19-22页 |
下篇 研究内容 | 第22-54页 |
1. 材料与方法 | 第26-40页 |
·试剂及培养基 | 第26-28页 |
·供试菌株及大豆品种 | 第28-29页 |
·Gateway技术构建酵母表达载体 | 第29页 |
·诱饵蛋白自激活活性检测 | 第29页 |
·大豆疫霉cDNA文库构建 | 第29-30页 |
·酵母双杂交(醋酸锂法) | 第30页 |
·利用酵母双杂交筛库流程 | 第30-31页 |
·酵母转化子PCR验证 | 第31页 |
·酵母质粒提取 | 第31-32页 |
·酵母双杂交载体构建 | 第32页 |
·Bait、Prey蛋白毒性与自激活活性验证 | 第32页 |
·Western blot验证目的蛋白表达 | 第32-33页 |
·酵母双杂交一对一互作验证 | 第33页 |
·HIS3和ADE2报告基因的表达检测 | 第33页 |
·LacZ、MEL1基因检测 | 第33-34页 |
·GST Pull-down验证蛋白体外互作 | 第34-36页 |
·大豆疫霉基因沉默转化载体构建 | 第36页 |
·大豆疫霉遗传转化 | 第36-39页 |
·基因沉默转化子筛选 | 第39页 |
·致病性测验 | 第39页 |
·沉默突变体表型分析 | 第39-40页 |
2. 结果与分析 | 第40-50页 |
·酵母双杂交筛库部分结果 | 第40-41页 |
·酵母双杂交验证PsRACK1与PsGPA1一对一互作结果 | 第41-43页 |
·GST Pull-down验证PsRACK1与PsGPA1一对一互作结果 | 第43-44页 |
·大豆疫霉PsRACK1功能分析结果 | 第44-50页 |
3. 讨论 | 第50-52页 |
·酵母双杂交研究手段 | 第51页 |
·PsRACK1与激活和非激活态Gα亚基的互作验证 | 第51页 |
·PsRACK1参与调控大豆疫霉卵孢子的产生 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-54页 |
附录 | 第54-64页 |
攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第64-66页 |
致谢 | 第66页 |