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农杆菌质粒Ti介导的藓羽藻基因转化研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
1 前言第8-18页
   ·藓羽藻转基因研究的生物学基础第8-10页
     ·藓羽藻的生物学特性第8页
     ·藓羽藻的生活史第8-9页
     ·藓羽藻原生质体团聚再生的研究进展第9-10页
     ·藓羽藻转基因的研究进展第10页
   ·藻类基因工程的研究概况第10-12页
     ·原核藻类基因工程研究进展第11页
     ·真核藻类基因工程研究进展第11-12页
   ·农杆菌介导的基因转化研究进展第12-17页
     ·农杆菌遗传转化的机理第13-14页
     ·农杆菌的宿主范围第14-15页
     ·农杆菌介导转化的方法第15页
     ·影响遗传转化效率的因素第15-17页
   ·研究内容及其意义第17-18页
2 藓羽藻凝集素在原生质体团聚中的功能研究第18-31页
   ·材料第18页
   ·实验方法第18-25页
     ·荧光定量PCR检测凝集素在团聚过程中的变化第18-22页
     ·免疫印迹法检测凝集素基因在团聚体不同发育阶段的表达第22-24页
       ·凝集素基因的原核表达及抗体制备第22-24页
       ·凝集素抗体对藓羽藻原生质体团聚的影响第24页
       ·Western Blotting检测凝集素在团聚不同发育阶段的相对表达水平第24页
     ·免疫胶体金检测凝集素在藓羽藻细胞中的分布第24-25页
   ·实验结果第25-28页
     ·藓羽藻抗血清抑制原生质体的团聚第25页
     ·凝聚素基因在团聚不同发育阶段的转录表达分析第25-26页
     ·凝聚素基因在团聚不同发育阶段的翻译表达分析第26-27页
     ·凝聚素基因的亚细胞定位第27-28页
   ·讨论第28-31页
     ·细胞器的团聚及抑制机制第28-29页
     ·原生质体各个发育阶段凝集素的相对表达情况第29页
     ·凝集素在藻体中的分布第29-30页
     ·团聚机制的假说第30-31页
3 农杆菌介导的藓羽藻基因转化研究第31-45页
   ·材料第31-33页
   ·实验方法第33-37页
     ·染色体步移技术扩增凝集素侧翼序列第33-34页
     ·表达载体Ti质粒的构建第34-36页
     ·根瘤农杆菌EHA105的转化第36页
     ·根瘤农杆菌LBA4404的转化第36-37页
     ·农杆菌转染藓羽藻原生质体第37页
   ·实验结果第37-43页
     ·凝集素基因全序列及侧翼序列第37-39页
     ·Ti质粒的构建第39-43页
     ·不同菌株侵染效果的比较第43页
     ·藓羽藻再生植株标记基因的鉴定第43页
   ·讨论第43-45页
     ·农杆菌Ti质粒的构建第43-44页
     ·藓羽藻原生质体作为转基因受体的可行性第44页
     ·农杆菌Ti质粒介导的藓羽藻转基因研究可行性分析第44-45页
4 展望第45-46页
5 参考文献第46-54页
6 攻读硕士学位期间发表论文情况第54-55页
7 致谢第55页

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