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镰刀菌酸诱导烟草悬浮细胞程序性死亡及其分子机制研究

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 引言第12-34页
   ·细胞死亡分类第12-13页
     ·非程序性细胞死亡第12页
     ·程序性细胞死亡第12-13页
   ·PCD 概述第13-15页
     ·PCD 和凋亡概念的提出第13页
     ·PCD 与细胞凋亡的区别第13-14页
     ·动物和植物 PCD 特征第14-15页
       ·动物细胞 PCD 的特征第14-15页
       ·植物细胞 PCD 的特征第15页
   ·植物 PCD 研究进展第15-29页
     ·植物生长发育过程中的 PCD第15-18页
       ·营养生长中的 PCD第15-17页
       ·生殖生长中的 PCD第17-18页
     ·环境胁迫下的 PCD第18-22页
       ·植物-病原体互作中的 PCD第18-19页
       ·环境中低氧导致的 PCD第19页
       ·毒素诱导的植物 PCD第19-20页
       ·重金属诱导的植物 PCD第20-21页
       ·盐胁迫诱导的植物 PCD第21-22页
       ·其他因素诱导的植物 PCD第22页
     ·植物 PCD 分子机制研究进展第22-29页
       ·植物 PCD 信号分子第22-25页
       ·与 PCD 相关的基因第25-27页
       ·与 PCD 相关的蛋白第27-29页
   ·镰刀菌酸概述第29-32页
     ·镰刀菌毒素的分类第29页
     ·镰刀菌毒素对植物细胞的影响第29-32页
       ·对植物微丝结构及骨架的影响第29-31页
       ·对细胞质膜系统的影响第31页
       ·对细胞超微结构的影响第31-32页
     ·镰刀菌酸研究进展第32页
   ·研究目的和意义第32-34页
2 材料与方法第34-52页
   ·试验材料第34-37页
     ·生化和分子试剂第34页
     ·培养基的配制第34-35页
     ·试验用试剂和溶液的配制第35-37页
     ·烟草悬浮细胞培养第37页
     ·PCR 引物第37页
   ·试验方法第37-52页
     ·烟草悬浮细胞的诱导处理第37-38页
     ·细胞死亡率测定第38页
     ·细胞核形态观察第38-39页
     ·细胞超微结构观察第39页
     ·细胞基因组 DNA 提取与分析第39-40页
     ·烟草悬浮细胞 TUNEL 检测第40-41页
     ·胞外 H_2O_2含量测定第41-42页
     ·NO 定量测定和定性测定第42-43页
       ·NO 定量测定第42-43页
       ·NO 定性测定第43页
     ·APX 和 CAT 活性测定第43-44页
       ·APX 活性测定第44页
       ·CAT 活性测定第44页
     ·考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量第44-45页
     ·膜脂过氧化检测第45-46页
     ·烟草悬浮细胞线粒体分离纯化第46-47页
     ·线粒体膜电位检测第47页
     ·线粒体 ATP 含量测定第47-48页
     ·类 caspase-3 蛋白酶活性检测第48-50页
     ·烟草悬浮细胞总 RNA 的提取和纯度测定第50-51页
     ·RT-PCR 分析烟草悬浮细胞的基因表达第51-52页
       ·cDNA 第一链的合成第51页
       ·各基因 PCR 扩增程序第51-52页
3 结果与分析第52-65页
   ·不同浓度 FA 及处理时间对烟草悬浮细胞死亡的影响第52-53页
   ·FA 诱导细胞死亡的形态特征第53-54页
   ·FA 诱导细胞 DNA 片段化第54-56页
   ·FA 诱导胞外 H_2O_2积累及其对细胞死亡的影响第56-57页
   ·NO 定量定性分析及其对细胞死亡的影响第57页
   ·FA 诱导的 APX 和 CAT 活性变化第57-59页
   ·FA 诱导的烟草悬浮细胞膜脂过氧化第59-60页
   ·线粒体参与 FA 诱导的烟草悬浮细胞死亡第60-62页
   ·NO 抑制剂对 FA 诱导的类 CASPASE-3 蛋白酶活性的影响第62页
   ·NO 抑制剂对烟草悬浮细胞基因表达的影响第62-65页
4 讨论第65-70页
   ·FA 诱导的烟草悬浮细胞死亡具有 PCD 的特征第65-66页
   ·FA 诱导烟草悬浮细胞胞外 H_2O_2积累并且影响细胞死亡第66页
   ·NO 参与 FA 诱导的烟草悬浮细胞 PCD第66页
   ·FA 诱导烟草悬浮细胞抗氧化系统和细胞膜系统的破坏第66-67页
   ·线粒体参与 FA 诱导的烟草悬浮细胞 PCD第67-68页
   ·类 CASPASE-3 蛋白酶参与 FA 诱导的 PCD 并受 NO 调控第68页
   ·NO 参与调控 FA 诱导的烟草悬浮细胞基因表达第68-69页
   ·FA 诱导植物细胞程序性死亡的分子机制第69-70页
5 总结与展望第70-72页
   ·全文总结第70页
   ·研究展望第70-72页
参考文献第72-89页
致谢第89-90页
攻读学位期间发表论文情况第90-91页
硕士学位论文内容简介及自评第91页

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